siRNA干擾Nrf2逆轉伊成替尼耐藥細胞株K562-G01耐藥機制的研究.pdf

1、目的：
　　 研究siRNA干擾核因子NF-E2相關因子-2(Nuclear factor erythroid2-relatedfactor2，Nrf2)對伊馬替尼耐藥細胞株K562/G01耐藥性的影響及其機制。
　　 方法：
　　 (1)以慢病毒為載體，將Nrf2-siRNA轉染至K562/G01細胞，利用激光共聚焦顯微鏡(LSCM)及流式細胞術(FCM)檢測轉染效率，實時熒光定量聚合酶鏈反應(RT-qPCR)

2、及Western bolt檢測Nrf2-siRNA干擾前后K562/G01細胞中Nrf2及其下游基因TrxR mRNA和蛋白的表達水平;
　　 (2)流式細胞術檢測Nrf2-siRNA干擾前后K562/G01細胞內活性氧(ROS)的水平;
　　 (3)分別用CCK-8比色法、流式細胞術檢測Nrf2-siRNA干擾前后K562/G01細胞的耐藥指數、凋亡率。
　　 結果：
　　 (1) Nrf2-siRNA

3、可抑制K562/G01細胞Nrf2及其下游基因TrxR mRNA和蛋白的表達(P＜0.05);
　　 (2)轉染Nrf2-siRNA后，K562/G01細胞內ROS水平升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);
　　 (3)轉染Nrf2-siRNA后，K562/G01細胞的耐藥指數降低、凋亡率增加，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　 結論：
　　 Nrf2通過發(fā)揮其保護細胞免受氧化應激損傷和抗凋亡的作