梗阻性黃疸對(duì)腸粘膜屏障功能影響及烏司他丁干預(yù)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：梗阻性黃疸(以下簡(jiǎn)稱(chēng)梗黃)的治療一直是外科一大難題。盡管麻醉水平、手術(shù)技術(shù)等有了很大提高，但其術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率和死亡率并無(wú)明顯降低。研究發(fā)現(xiàn)，腸道細(xì)菌和內(nèi)毒素移位是導(dǎo)致梗黃繼發(fā)感染及多臟器功能衰竭的主要原因，而腸粘膜屏障功能損害可能是其發(fā)生的關(guān)鍵。因此，積極開(kāi)展梗黃對(duì)腸粘膜屏障功能影響的研究并探討如何改善和保護(hù)之具有重要意義。但以往有關(guān)這方面的研究大多為單一較長(zhǎng)時(shí)相觀察，或檢測(cè)指標(biāo)較少，尤其是目前認(rèn)為評(píng)價(jià)腸屏障功能的較好指標(biāo)-血漿

2、D-乳酸的檢測(cè)鮮有應(yīng)用。烏司他丁(UTI)是尿胰蛋白酶抑制劑，有多種特殊的藥理作用：除對(duì)多種蛋白酶有抑制作用外，還有改善休克時(shí)的循環(huán)狀態(tài)，穩(wěn)定溶酶體膜，清除氧自由基，抑制炎癥介質(zhì)的釋放等功能。在臨床上已廣泛應(yīng)用于急性胰腺炎、休克、體外循環(huán)的治療及抗手術(shù)刺激等。但在梗黃治療中的應(yīng)用較少，尤其有關(guān)它對(duì)梗黃腸粘膜屏障功能影響的研究少有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立S-D大鼠梗黃模型，并用UTI干預(yù)，進(jìn)行多時(shí)相的隨機(jī)分組對(duì)照研究，觀察或檢測(cè)反映腸粘膜結(jié)構(gòu)

3、的組織形態(tài)學(xué)變化、反映腸通透性的血D-乳酸水平、反映腸氧化應(yīng)激的腸組織中MDA及SOD的含量、反映腸屏障功能受損的血內(nèi)毒素及腸外組織臟器細(xì)菌移位率改變等多個(gè)指標(biāo)，旨在探討梗黃對(duì)腸粘膜屏障功能的影響及UTI的保護(hù)作用，為臨床防治提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：1實(shí)驗(yàn)對(duì)象及分組：將72只雄性S-D大鼠隨機(jī)均分為3組：假手術(shù)組(A組)、梗黃組(B組)、UTI干預(yù)組(C組)，每組又分術(shù)后3天、5天、7天、10天四個(gè)時(shí)相，每個(gè)時(shí)相6只。2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模

4、型制備及處理：B組和C組通過(guò)雙重結(jié)扎膽總管制成梗黃模型。A組只分離而不結(jié)扎膽總管。C組從術(shù)后第1天始每天腹腔注射UTI40000IU/kg，A組和B組則用等量生理鹽水作對(duì)照，1次/d，直至動(dòng)物處死前一天。3監(jiān)測(cè)指標(biāo)：按上述不同時(shí)相于動(dòng)物處死前抽下腔靜脈血檢測(cè)各組肝腎功能有關(guān)指標(biāo)、血漿內(nèi)毒素及D-乳酸水平，取回腸末端組織測(cè)其中的丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量，取腸系膜淋巴結(jié)、肝、脾組織行細(xì)菌培養(yǎng)，光鏡觀察末端回腸組織形態(tài)學(xué)

5、改變，并用病理圖像分析系統(tǒng)測(cè)量腸絨毛高度及粘膜厚度。4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：計(jì)量資料組間比較采用方差分析；計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果：1B組各時(shí)相肝、腎有關(guān)指標(biāo)較A組明顯升高，差異有顯著性意義(P＜0.01)；C組較B組測(cè)定值降低(P＜0.01)；C組與A組相比，部分時(shí)相腎功能差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。 2B組各時(shí)相血漿內(nèi)毒素、D-乳酸水平均高于A組(P＜0.01)，且隨時(shí)間

6、的延長(zhǎng)呈進(jìn)行性增高的趨勢(shì)；C組則較B組降低(P＜0.01)；C組較A組仍升高，但術(shù)后3天組差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。 3B組各時(shí)相腸組織中MDA含量均高于A組，SOD含量較A組降低(P＜0.01)，且隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈進(jìn)行性增高或降低的趨勢(shì)；C組則較B組MDA降低，SOD升高，(P＜0.01或P＜0.05)；C組與A組相比，術(shù)后3天組差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。 4B組各時(shí)相小腸絨毛高度、粘膜厚度均低于A組(P＜0.0

7、1)，且隨時(shí)間的延長(zhǎng)呈進(jìn)行性降低的趨勢(shì)；C組則較B組升高(P＜0.01或P＜0.05)；C組較A組仍降低，但術(shù)后3天組差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。 5B組細(xì)菌移位率為37.5％，A組為0％，二者比較差異有顯著性(P＜0.01)；C組細(xì)菌移位率為8.3％，明顯低于B組(P＜0.05)。C組與A組相比，差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。細(xì)菌移位最多的部位是腸系膜淋巴結(jié)(8/72)，菌種鑒定結(jié)果主要是G菌，以大腸桿菌最多見(jiàn)。 6

8、B組術(shù)后第3天即見(jiàn)腸粘膜輕度萎縮，絨毛不規(guī)整，間質(zhì)水腫明顯，隨時(shí)間推移，病變進(jìn)行性加重，至術(shù)后第10天可見(jiàn)腸壁變薄，粘膜明顯萎縮，絨毛稀疏、倒伏，短縮、融合，上皮脫落；C組與B組各對(duì)應(yīng)時(shí)相相比，腸粘膜病理改變明顯減輕；A組回腸末端腸粘膜結(jié)構(gòu)基本正常。 結(jié)論：1梗黃早期即可導(dǎo)致腸粘膜屏障功能受損，且隨著梗阻時(shí)間延長(zhǎng)呈進(jìn)行性加重趨勢(shì)。2腸粘膜屏障功能受損可能是梗黃發(fā)生內(nèi)毒素血癥和細(xì)菌移位的主要原因。3檢測(cè)血漿D-乳酸水平可及時(shí)評(píng)價(jià)梗