烏司他丁對勞力型熱射病大鼠腸粘膜屏障保護作用的研究.pdf

1、目的:為進一步研究勞力型熱射病(EHS)發(fā)病機制,探索利用熱應(yīng)激+運動建立穩(wěn)定的EHS大鼠模型,觀察烏司他丁(UTI)對EHS大鼠腸粘膜通透性的影響,并檢測腸粘膜免疫狀態(tài)的變化。初步探討不同劑量烏司他丁對腸粘膜機械屏障、免疫屏障的保護作用。
　　方法:取30只SPF級成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,應(yīng)用環(huán)境訓(xùn)練實驗室將溫度設(shè)定至(40±0.5)℃,濕度70％±5%,通過實驗動物運動跑臺跑步,建立EHS大鼠模型,留

2、取血清測CK、ALT、AST,取股四頭肌做HE染色,觀察病理學(xué)變化,以驗證EHS模型建立成功,并觀察大鼠肛溫變化、發(fā)病時間(體溫達42.5℃),以及存活時間、死亡率。
　　取SPF級成年雄性 SD大鼠134只隨機分為以下4組:空白對照組(Normal-Control,n=8)、勞力型熱射病組(EHS,n=42)、大劑量烏司他丁治療組( LUTI-EHS,n=42)、小劑量烏司他丁治療組( SUTI-EHS,n=42)。EHS、LU

3、TI-EHS、SUTI-EHS3組大鼠應(yīng)用熱應(yīng)激+運動建立EHS模型,成模后分別立即給予2mL0.9%NaCl、5×104U/Kg UTI、2×104U/Kg UTI尾靜脈注入。建模后EHS、LUTI-EHS、SUTI-EHS組分別取10只觀察存活時間、死亡率,其余大鼠根據(jù)發(fā)病后30min、2h、4h、6h隨機分為4個亞組(每組8只)。經(jīng)頸動脈取血測定血漿中二胺氧化酶(DAO)活性及D-乳酸濃度,觀察烏司他丁對大鼠腸粘膜通透性的影響,取

4、小腸組織標(biāo)本進行形態(tài)學(xué)、免疫組化檢測,并對比不同劑量烏司他丁對勞力型熱射病大鼠腸粘膜屏障的保護作用、對存活時間及死亡率的影響。
　　結(jié)果:(1)EHS大鼠平均發(fā)病時間為57.8±18.9min,8h死亡率100%。EHS模型組大鼠CK、ALT、AST顯著升高;骨骼肌組織肉眼觀:骨骼肌紋理不清,組織韌性降低;鏡下觀:模型組肌纖維排列紊亂,出現(xiàn)廣泛結(jié)構(gòu)破裂,炎性細胞浸潤。
　　(2)本實驗觀察到LUTI-EHS、SUTI-EHS

5、兩組的存活時間均高于EHS組大鼠的存活時間,且8h死亡率均低于EHS大鼠的8h死亡率。
　　(3)在發(fā)病后的4個時間點中,與對照組比較,EHS、LUTI-EHS、SUTI-EHS組大鼠的DAO活性及D-乳酸濃度均為先升高后降低;烏司他丁治療能顯著降低血清DAO活性及D-乳酸濃度,減輕腸粘膜損傷,但仍可見炎性細胞浸潤、血管擴張等,而大劑量烏司他丁治療優(yōu)于小劑量;此外,在4個時間點,三組大鼠腸粘膜CD4+T淋巴細胞百分比降低、CD8+