烏司他丁對(duì)大鼠腎缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:該研究應(yīng)用夾閉大鼠雙側(cè)腎蒂造成腎缺血再灌注損傷模型,通過檢測(cè)缺血后血腎功能;結(jié)合常規(guī)病理檢查,以及應(yīng)用免疫組化方法進(jìn)行腎組織標(biāo)本bcl-2和HSP 70檢測(cè),并行透射電鏡檢查腎組織超微結(jié)構(gòu),來探討烏司他丁對(duì)腎缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及作用機(jī)理.方法:一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與試劑健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠,體重210-250g,共75只,由浙江省醫(yī)科院動(dòng)物中心提供,鼠抗bcl-2單克隆抗體及鼠抗HSP單克隆抗體均購于福州邁新

2、生物工程有限公司.烏司他丁由廣東天普生化醫(yī)藥股份有限公司提供.二、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)1、動(dòng)物分組.2、動(dòng)物模型的制作.三、觀察指標(biāo)1、腎功能檢查用酶法測(cè)再灌注各時(shí)點(diǎn)血BUN、Cr.2、HE染色福爾馬林液固定左腎組織,常規(guī)石蠟切片,作HE染色,在HB-2型Olympus光學(xué)顯微鏡下觀察其組織學(xué)改變.按paller標(biāo)準(zhǔn)評(píng)分.3、Bcl-2和HSP70免疫組化檢測(cè).4、透射電鏡檢測(cè)2.5﹪戊二醛磷酸緩沖液固定左腎組織、按透射電鏡標(biāo)本制作常規(guī),經(jīng)漂洗,固

3、定,再漂洗、脫水、浸透、包埋、聚合、切片、染色等步驟,在TECNAL-10型菲利浦電鏡下觀察其超微結(jié)構(gòu)改變.四、統(tǒng)計(jì)方法結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)表示,所有數(shù)據(jù)均在PIV微機(jī)上用spss11.0統(tǒng)計(jì)軟件包完成.采用方法:計(jì)量資料采用方差分析;等級(jí)資料先H檢驗(yàn)后再Nemenyi法,P值小于0.05定為統(tǒng)計(jì)學(xué)有顯著差異.結(jié)論:一、烏司他丁可降低大鼠缺血再灌注后血肌酐,尿素氮數(shù)值,改善腎功能,對(duì)大鼠缺血再灌注損傷有明顯保護(hù)作用.二、腎缺血再灌注損傷時(shí)烏