不同膽汁引流方式對(duì)梗阻性黃疸大鼠腸黏膜機(jī)械屏障功能的影響及機(jī)制.pdf

1、目的:本實(shí)驗(yàn)建立梗阻性黃疸(OJ)大鼠模型，并對(duì)此模型施行不同的膽汁引流方式—膽汁內(nèi)引流術(shù)和膽汁外引流術(shù)。通過觀察術(shù)后各組大鼠腸黏膜組織形態(tài)學(xué)變化，檢測(cè)血清中內(nèi)毒素水平、腸黏膜細(xì)胞增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表達(dá)以及腸黏膜組織緊密連接相關(guān)蛋白—閉鎖蛋白和閉鎖小帶蛋白-1(ZO-1)的表達(dá)，探討不同膽汁引流方式對(duì)OJ大鼠腸黏膜機(jī)械屏障功能的影響及機(jī)制。從而為臨床上對(duì)OJ患者選擇何種膽汁引流方式提供

2、一定的理論依據(jù)。
　　方法:將60只SD大鼠采用膽總管結(jié)扎法制作OJ模型，1周后隨機(jī)均分為無引流組（不行膽汁引流術(shù)），內(nèi)引流組（行膽汁內(nèi)引流術(shù)）和外引流組（行膽汁外引流術(shù)），引流時(shí)間為1周。以20只假手術(shù)大鼠為對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)時(shí)間共2周，結(jié)束時(shí)分別用ELISA法、IHC法和Western blot法檢測(cè)各組大鼠血清內(nèi)毒素水平、腸黏膜細(xì)胞PCNA和Caspase-3的表達(dá)和腸黏膜組織閉鎖蛋白及ZO-1的表達(dá)，并觀察腸黏膜組織形態(tài)學(xué)改變。

3、
　　結(jié)果:
　　1、血清內(nèi)毒素水平的變化:無引流組和外引流組OJ大鼠血清內(nèi)毒素水平明顯升高，與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而無引流組與外引流組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;內(nèi)引流組較無引流組和外引流組明顯下降，基本接近對(duì)照組水平。
　　2、腸黏膜細(xì)胞PCNA的表達(dá):無引流組、內(nèi)引流組和外引流組OJ大鼠腸黏膜細(xì)胞PCNA的表達(dá)明顯下降，與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而內(nèi)引流組和外引流組較無引流組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)

4、學(xué)意義;內(nèi)引流組較外引流組亦明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3、腸黏膜細(xì)胞Caspase-3的表達(dá):無引流組、內(nèi)引流組和外引流組OJ大鼠腸黏膜細(xì)胞Caspase-3的表達(dá)明顯升高，與對(duì)照組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而內(nèi)引流組和外引流組較無引流組明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;內(nèi)引流組較外引流組亦明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4、腸黏膜組織緊密連接相關(guān)蛋白—閉鎖蛋白和ZO-1的表達(dá):與對(duì)照組比較，無引流組和外引流組OJ大鼠腸

5、黏膜上皮細(xì)胞間緊密連接相關(guān)蛋白—閉鎖蛋白和ZO-1的表達(dá)均明顯降低，且外引流組兩者表達(dá)水平降低尤為明顯，與無引流組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;內(nèi)引流組的表達(dá)水平明顯高于無引流組和外引流組，基本接近對(duì)照組。
　　5、腸黏膜的光鏡表現(xiàn):無引流組和外引流組OJ大鼠腸黏膜結(jié)構(gòu)破壞，大量或中量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，而內(nèi)引流組OJ大鼠組腸黏膜結(jié)構(gòu)完整，僅見少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　結(jié)論：膽汁內(nèi)引流對(duì)OJ大鼠腸黏膜機(jī)械屏障具有保護(hù)作用，其機(jī)制可能與膽汁