壁虎醇提物抗腫瘤作用研究.pdf

1、目的：觀察壁虎醇提物對小鼠腎包膜下移植S180肉瘤和人食管癌EC-109細(xì)胞增值的抑制作用，并探討作用機(jī)制。
　　 方法：建立小鼠腎包膜下移植S180肉瘤模型，將40只雄性昆明小鼠隨機(jī)分為模型對照組(生理鹽水)、環(huán)磷酰胺組(0.1 g/kg)、壁虎醇提物高劑量組(2.4 g/kg)、壁虎醇提物低劑量組(1.2 g/kg)共4組。腹腔注射給藥6天后，測量荷瘤小鼠體重，評價(jià)藥物對小鼠的毒性反應(yīng)；測量小鼠肉瘤體積，稱取移植瘤小鼠胸腺重

2、、脾臟重，計(jì)算抑瘤率、胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)；用SP免疫組化法檢測血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)。應(yīng)用MTT法測定壁虎醇提物對食管癌EC-109細(xì)胞增值的抑制情況；倒置顯微鏡下觀察壁虎醇提物對食管癌EC-109細(xì)胞形態(tài)的影響；Hoechst 33342染色熒光顯微鏡下觀察食管癌EC-109細(xì)胞核形態(tài)學(xué)變化；流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率；SP免疫組化檢測Fas蛋白和Caspase-3蛋白的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果：體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，壁虎

3、醇提物可抑制小鼠S180肉瘤的生長，環(huán)磷酰胺組、壁虎醇提物高劑量組、壁虎醇提物低劑量組抑瘤率分別為74.5[％]、77.5[％]、57.5[％]，且各組終末體重/初始體重的比率分別為0.94、1.03、0.99；組織免疫組化顯示壁虎醇提物組與模型對照組比較VEGF蛋白的表達(dá)明顯減少。體外抑瘤實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，壁虎醇提物可以抑制食管癌EC-109細(xì)胞的增值，2.5，3.0，3.5，4.0，4.3，4.6 mg/mL壁虎醇提物組48 h抑瘤率分

4、別3.3[％]，14.3[％]，16.5[％]，25.7[％]，62.4[％]，77.9[％]，72 h抑瘤率分別為25.5[％]，30.1[％]，32.6[％]，46.8[％]，84.9[％]，96.9[％]；壁虎醇提物作用組細(xì)胞體積變小，變圓，分泌顆粒增多，細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡現(xiàn)象，并且隨著時(shí)間和濃度的增大，大部分細(xì)胞脫壁；壁虎醇提物作用于食管癌EC-109細(xì)胞48 h后，出現(xiàn)明顯的細(xì)胞凋亡特征(DNA濃縮、致密,表現(xiàn)為高亮度熒光)；流式