急性白血病M4Eo型患者ETV6基因重排及其臨床意義.pdf

1、目的: 1、檢測急性髓細(xì)胞白血病M4Eo型患者中ETV6基因重排。 2、探討ETV6基因重排在急性髓細(xì)胞白血病M4Eo型發(fā)病機(jī)制中的作用。 3、初步揭示ETV6基因重排與急性髓細(xì)胞白血病M4Eo型患者預(yù)后的關(guān)系。材料與方法: 1、病例資料11例AML-M4Eo患者均為初治病例，男性5例，女性6例，中位年齡25(13-37)歲，臨床診斷根據(jù)患者的臨床表現(xiàn)，骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)，骨髓細(xì)胞化學(xué)染色，免疫學(xué)，細(xì)胞遺傳學(xué)

2、和分子生物學(xué)檢查結(jié)果并參照2001年WHO的分型和診斷標(biāo)準(zhǔn)來確定。 2、骨髓細(xì)胞培養(yǎng)及染色體制備取患者骨髓標(biāo)本，在無刺激條件下培養(yǎng)16-24小時(shí)后收獲細(xì)胞，采用直接法和(或)短期培養(yǎng)法制備骨髓細(xì)胞染色體。 3、傳統(tǒng)細(xì)胞遺傳學(xué)分析制備骨髓細(xì)胞染色體后進(jìn)行R顯帶處理，核型根據(jù)<<人類細(xì)胞遺傳學(xué)國際命名體制(ISCN 1995)>>識別和描述。 4、Split-signal FISH分析應(yīng)用分裂探針DIG525I3和B

3、io407P10，對11例AML-M4Eo患者染色體標(biāo)本進(jìn)行熒光原位雜交檢測其ETV6重排情況。 5、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)對涉及12p13和1q25易位的患者采用巢式RT-PCR檢測ETV6/ARG融合基因。 結(jié)果: 1、傳統(tǒng)細(xì)胞遺傳學(xué)分析采用骨髓細(xì)胞染色體R顯帶核型分析11例AML患者中，異常染色體檢出率為54.5％(6/11)，異常染色體中有4例為inv(16)，2例為22三體(+22)，傳統(tǒng)核型分析未發(fā)現(xiàn)12

4、pl 3和lq25畸變。 2、Split-signal FISH 對 11例AML～-M4Eo患者染色體標(biāo)本進(jìn)行熒光原位雜交檢測其ETV6重排情況，發(fā)現(xiàn)在一例inv(16)的患者中存在12p13，1q25的易位，核型為46 XY，inv(16)，t(1；12)(q25；p13)。 3、RT-PCR對涉及12p13和1q25易位的患者采用RT-PCR可檢測到ETV6/ARG融合基因產(chǎn)物。這是國際上第2例報(bào)道ETV6/ARG

5、融合基因在AML-M4Eo中表達(dá)。 4、伴有ETV6/ARG融合基因的患者對化療不敏感，預(yù)后較ETV6/ARG融合基因陰性者差。 結(jié)論: 1、ETV6基因重排是涉及12p13染色體易位較常見的目的基因，它與急性髓細(xì)胞白血病M4Eo型患者的發(fā)病有密切關(guān)系。 2、ETV6基因重排與急性髓細(xì)胞白血病M4Eo型患者的臨床表現(xiàn)有較密切關(guān)系。ETV6基因重排的急性髓細(xì)胞白血病M4Eo型患者臨床表現(xiàn)危重。 3、

6、ETV6基因重排與急性髓細(xì)胞白血病M4Eo型患者的預(yù)后有較密切關(guān)系。ETV6重排患者對化療不敏感，預(yù)后差。 4、國內(nèi)首次在急性髓細(xì)胞白血病M4Eo型患者中發(fā)現(xiàn)ETV6/ARG融合基因，初步揭示其致白血病機(jī)制。ETV6/ARG融合蛋白中ETV6的HLH結(jié)構(gòu)域?yàn)锳RG激酶結(jié)構(gòu)域提供了二聚化界面，從而激活了ARG，通過信號傳導(dǎo)途徑作用于相鄰的轉(zhuǎn)錄因子和靶基因，造成細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。 5、Spl it-signal FISH是檢測