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文檔簡介
1、背景及目的:高爾基體在腦卒中發(fā)生時(shí)及發(fā)生之后產(chǎn)生一系列改變。在高爾基體膜上存在一種分泌途徑衍生鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶(Secretory-Pathway Ca2+-ATPases,SPCAs),是P型ATP酶的一類亞家族。SPCA的功能是將Ca2+從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到高爾基體,對(duì)高爾基體內(nèi)及胞漿內(nèi)Ca2+濃度變化有著重要意義。SPCA2是SPCAs中的一種亞型。SPCA2的基因主要沿著消化道表達(dá),同時(shí)也表達(dá)于前列腺、骨髓、肺、氣管及中性粒細(xì)胞;而
2、SPCA2蛋白目前所知主要表達(dá)于腸道杯狀細(xì)胞、海馬神經(jīng)元、中性粒細(xì)胞及小鼠的乳腺分泌腺泡。了解在腦缺血及再灌注過程中SPCA2蛋白與基因的表達(dá)變化可以使我們更清楚的認(rèn)識(shí)鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶在氧化應(yīng)激中的作用。本實(shí)驗(yàn)的目的就在于評(píng)價(jià)在大鼠腦缺血再灌注過程中SPCA2蛋白與基因表達(dá)的變化。
方法:60只雄性SD大鼠被隨機(jī)分為5組,分別為:假手術(shù)組,缺血組,缺血后再灌注1,3,24小時(shí)組。線栓法建立大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞腦梗死及再灌注
3、模型(MCAO),TTC染色驗(yàn)證建模成功。免疫組織化學(xué)方法檢測大腦皮質(zhì)和海馬中SPCA2蛋白隨缺血再灌的表達(dá)變化,而大腦皮質(zhì)中SPCA2基因的表達(dá)變化用實(shí)時(shí)熒光定量PCR來完成。
結(jié)果:和假手術(shù)組相比,缺血期SPCA2蛋白與基因的表達(dá)沒有明顯變化。但是與假手術(shù)組相比,再灌注1小時(shí)組SPCA2基因表達(dá)明顯下降至44%(P<0.05),再灌注3小時(shí)組下降至33%(P<0.01),再灌注24小時(shí)組下降至31%(P<0.01)。在
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