COX-2表達與全腦缺血再灌注大鼠腦損傷關(guān)系的初步探討.pdf

1、目的:初步探討COX-2表達與全腦缺血再灌注大鼠腦損傷之間的關(guān)系。
　　 方法:
　　 (1)采用雙側(cè)頸總動脈夾閉合并低血壓方法建立全腦缺血再灌注大鼠模型。在缺血再灌注30min、2h、6h、24h、48h、7d、15d、30d觀察COX-2 mRNA及蛋白表達的動態(tài)變化。選擇在缺血再灌注7d時間點,給予COX-2選擇性抑制劑美洛昔康(Meloxicam)(1、3和5mg·kg-1)進行干預(yù)。
　　 (2)指標(biāo)檢

2、測及方法:Morris水迷宮測定大鼠空間學(xué)習(xí)能力,組織切片HE染色觀察海馬神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu),免疫組化染色和熒光免疫染色檢測海馬組織核轉(zhuǎn)錄因子NF-κBp65和COX-2蛋白的表達,生物酶學(xué)方法觀察超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)和蛋白免疫印跡法(Western-Blot)檢測大鼠海馬組織中的COX-2 mRNA及蛋白的表達情況。
　　 結(jié)果:與假手術(shù)組比較,全腦缺血再灌注大

3、鼠尋臺潛伏期明顯延長,空間學(xué)習(xí)記憶能力降低,海馬神經(jīng)元出現(xiàn)明顯核固縮、丟失,細(xì)胞層次紊亂,神經(jīng)元數(shù)目減少,并隨再灌注時程延長而損傷加重,48h-7d損傷達峰;海馬神經(jīng)元NF-κB3p65蛋白表達明顯增強;COX-2 mRNA和蛋白表達顯著性增高。
　　 給予COX-2選擇性抑制劑美洛昔康,能明顯縮短全腦缺血再灌注大鼠的尋臺潛伏期,減輕全腦缺血再灌注大鼠海馬神經(jīng)元損傷,升高大鼠海馬MDA含量,降低SOD活性,明顯阻遏海馬神經(jīng)元NF