大鼠腦缺血再灌注后COX-2的表達(dá)及川芎嗪腦保護(hù)作用的研究.pdf

1、本文研究目的：①觀察腦缺血再灌注后不同時(shí)間點(diǎn)COX-2在腦中的誘導(dǎo)及表達(dá)部位、時(shí)間的變化；MDA的變化。初步探討COX-2在腦缺血再灌注后神經(jīng)元氧化損傷中的作用。②觀察川芎嗪對(duì)腦缺血再灌注后COX-2、MDA及Bcl-2表達(dá)的影響，探討川芎嗪腦保護(hù)作用機(jī)制，旨在為臨床治療提供理論依據(jù)。 研究方法：健康雄性SD大鼠(280g±20g)分假手術(shù)組、模型組、給藥組。用線栓法制作大鼠大腦中動(dòng)脈缺血模型。假手術(shù)組12只，尼龍線插入長(zhǎng)度短于

2、15mm；模型組分為缺血2h再灌注6h組，12h組，24h組，48h組，每組12只；給藥組12只，大鼠于手術(shù)開始即刻和術(shù)后12h分別于腹腔內(nèi)注射川芎嗪(35mg/kg)。假手術(shù)組和給藥組大鼠于再灌注24h后處死，模型組大鼠于規(guī)定時(shí)間點(diǎn)處死。每組6只免疫組化觀察COX-2的表達(dá)變化、HE染色觀察病理組織形態(tài)學(xué)特點(diǎn)；6只硫代巴比妥酸法檢測(cè)MDA的含量變化、Western-Blot檢測(cè)COX-2、Bcl-2蛋白的表達(dá)變化。 研究結(jié)果：

3、①COX-2的表達(dá)：COX-2主要出現(xiàn)在額、頂葉大腦皮層梗死邊緣神經(jīng)元內(nèi)。假手術(shù)組偶可見免疫弱陽性的神經(jīng)元。與假手術(shù)組相比，COX-2免疫陽性細(xì)胞在缺血再灌注6h后即有明顯升高(p<0.01)，且隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)逐漸增強(qiáng)，至24h達(dá)高峰，48h有所下降，但仍維持在較高水平。Western-Blot結(jié)果可見：假手術(shù)組、I2h/R6h、I2h/R12h、 I2h/R24h、 I2h/R48h均出現(xiàn)一個(gè)特異性條帶，圖像分析表明I2h/

4、R24h蛋白最高， I2h/R48h有所下降；與模型組比較，給藥組COX-2免疫陽性神經(jīng)元明顯減少(p<0.01)。②MDA含量的變化：假手術(shù)組MDA的表達(dá)較低，與假手術(shù)組相比，I2h/R6h組腦組織MDA含量即有明顯升高(p<0.01)，并且隨著再灌注時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸升高，在I2h/R24h達(dá)高峰， I2h/R48hMDA水平略有下降，但仍維持較高水平；與模型組比較，給藥組MDA含量明顯降低(p<0.01)。③MDA和COX-2在表達(dá)的

5、時(shí)間和部位上有高度的一致性。經(jīng)相關(guān)性分析顯示，再灌注后不同時(shí)間皮層COX-2與MDA表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.910，p<0.01)。④與模型組相比，治療組腦組織病理損傷減輕，Bcl-2蛋白表達(dá)增加(p<0.05)。 研究結(jié)論：①大鼠腦缺血再灌注后，COX-2和MDA的表達(dá)增加，二者有表達(dá)時(shí)間和部位上的一致性，COX-2在大鼠腦缺血再灌注后可能導(dǎo)致了MDA含量的增加。②川芎嗪腦保護(hù)作用可能與抑制COX-2的活性、抗自由基損傷及上調(diào)B