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文檔簡介
1、目的:通過觀察頭穴叢刺法對大鼠腦缺血再灌注(cerebral ischemia-reperfusion,CIR)后腦水腫和炎癥反應(yīng)的影響,探討頭穴叢刺法的腦保護(hù)作用及可能機(jī)制。 方法:采用改良的線栓法制備大鼠大腦中動脈缺血再灌注模型;將Wistar雄性大鼠隨機(jī)分成3組:假手術(shù)組、腦缺血再灌注模型組(模型組)、腦缺血再灌注后頭穴叢刺組(頭穴叢刺組),各組隨機(jī)分成再灌注后6h、24h、48h、72h、120h五個時間點(diǎn)對大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
2、觀察:(1)干濕重法測量各組大鼠各時間點(diǎn)腦水含量的變化;(2)HE染色法觀察大鼠腦組織病理形態(tài)學(xué)改變;(3)免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測大鼠CIR后AQP4的表達(dá)及頭穴叢刺法對其的影響;(4)酶聯(lián)免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)測定各組大鼠各時間點(diǎn)血漿TNF-α含量及頭穴叢刺治療對其的影響。 結(jié)果:(1)與假手術(shù)組比較,大鼠腦缺血再灌注后不同時間點(diǎn)模型組、頭穴叢刺組均出現(xiàn)不同程
3、度的腦水含量升高,兩兩比較具有顯著性差異(P<0.05);頭穴叢刺組在再灌注后6h、24h、48h與模型組比較無顯著性差異(P>0.05),72h、120h時均可見腦水含量明顯減少,優(yōu)于模型組,具有顯著性差異(P<0.05,P<0.01)。(2)HE染色顯示:假手術(shù)組腦組織結(jié)構(gòu)完整,神經(jīng)細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞及毛細(xì)血管形態(tài)正常,各時間段均未見炎性細(xì)胞浸潤及梗死灶出現(xiàn);模型組缺血腦組織存在明顯的水腫,神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞腫脹、變性、壞死,可見炎性細(xì)胞
4、浸潤,以再灌注后48h和72h為著;頭穴叢刺組于再灌注后72h、120h較模型組神經(jīng)細(xì)胞腫脹和間質(zhì)水腫減輕,炎性細(xì)胞浸潤降低,神經(jīng)元數(shù)量及新生毛細(xì)血管增多。(3)免疫組化結(jié)果顯示:與假手術(shù)組比較,模型組于再灌注后6h~72h,頭穴叢刺組于再灌注后6h~120h,AQP4表達(dá)均出現(xiàn)不同程度的降低,兩兩比較具有顯著性差異(P<0.05);與模型組比較,頭穴叢刺組于再灌注后24h~120h可見AQP4表達(dá)降低,具有顯著性差異(P<0.05)。
5、(4)ELISA法測定血漿TNF-α含量結(jié)果顯示:與假手術(shù)組比較,模型組和頭穴叢刺組大鼠于6h~72h時間點(diǎn)血漿TNF-α含量明顯升高,兩兩比較具有顯著性差異;頭穴叢刺組血漿TNF-α 含量與模型組比較于再灌注后24h~72h均明顯降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05,P<0.01)。結(jié)論: (1)頭穴叢刺法能夠明顯降低腦缺血再灌注后大鼠腦水含量,減輕腦水腫。(2)頭穴叢刺法能夠減輕腦缺血再灌注后大鼠神經(jīng)細(xì)胞腫脹和間質(zhì)水腫以及炎癥反
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