大鼠單側視神經損傷致雙側視網膜細胞變化的研究.pdf

1、目的：
　　觀察大鼠單側視神經橫斷傷后雙側眼視網膜膠質細胞隨時間的變化特點，檢測對側眼視網膜神經節(jié)細胞的凋亡變化。
　　方法：
　　健康成年Fischer344大鼠，8-12周齡，共86只。分兩組：實驗組腹腔麻醉后右眼球后2-3mm行視神經橫斷，左眼不作處理，對照組暴露視神經但未損傷。損傷后3天、1周、2周、3周、6周、12周取雙側眼球，行石蠟切片HE染色觀察視網膜節(jié)細胞層細胞變化，視網膜鋪片免疫熒光組織化學特異性抗體

2、標記觀察大膠質細胞、小膠質細胞密度和形態(tài)，對損傷后3周組行雙眼視網膜鋪片免疫組織化學觀察視網膜神經節(jié)細胞的存活，石蠟切片TUNEL檢測視網膜凋亡并與視網膜神經節(jié)細胞共染觀察視網膜神經節(jié)細胞凋亡情況。數據分析多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用Bonferroni或DunnettT3檢驗。
　　結果:
　　HE染色示損傷眼視網膜神經節(jié)細胞層數目減少，細胞核廣泛縮小，對側眼視網膜神經節(jié)細胞層數目輕度減少，細胞核形態(tài)不規(guī)則，

3、胞漿空泡改變。視網膜鋪片免疫組化顯示損傷側視網膜內層小膠質細胞密度增加胞體增大變形，分支減少，對側眼小膠質細胞分支點減少。3天開始雙眼müller細胞表達GFAP。上述膠質細胞變化1～3周較為明顯，6周后已基本恢復。3周時，損傷側眼視網膜神經節(jié)細胞存活密度為413.87/mm2，對側眼為1046.01/mm2，與對照組比較，差異均有統計學意義（P＜0.01）。損傷側視網膜凋亡細胞較多，對側眼局部、少量凋亡，凋亡細胞與視網膜神經節(jié)細胞共染