桔小實(shí)蠅為害柑橘的生物學(xué)特性及其嗅覺感受機(jī)制研究.pdf

1、桔小實(shí)蠅是一種重要的檢疫性害蟲,可選擇香蕉、柑橘和芒果等多種水果作為寄主,其危害方式主要是以雌蟲產(chǎn)卵于果皮下,幼蟲取食果肉,從而導(dǎo)致水果腐爛或未熟先黃而落,嚴(yán)重影響了水果的產(chǎn)量和品質(zhì),有的甚至完全失去食用價(jià)值,給水果產(chǎn)業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前對(duì)桔小實(shí)蠅的綜合防治過程中,誘劑誘殺是一種既有效又環(huán)保的防治措施,但目前采用的甲基丁香酚僅引誘雄蟲,而桔小實(shí)蠅的危害方式特殊,給防治帶來困難。此外,化學(xué)防治又不符合綠色環(huán)保的理念,所以開發(fā)桔小實(shí)

2、蠅雌蟲誘劑已成為一種新的生防思路。本論文研究桔小實(shí)蠅為害幾種不同柑橘的生物學(xué)特性及其嗅覺感受機(jī)制,為開發(fā)桔小實(shí)蠅雌蟲誘劑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。主要是研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1.桔小實(shí)蠅取食不同柑橘年度間生物學(xué)特性的差異研究連續(xù)兩年對(duì)桔小實(shí)蠅取食4類7種柑橘,即寬皮柑橘類的大葉尾張、本地早、宮川、椪柑,雜柑類的胡柚,金柑類的金桔,和枸櫞類的檸檬等柑橘類果實(shí)后生活史變化的觀察,結(jié)果表明桔小實(shí)蠅的幼蟲歷期與蛹?xì)v期呈顯著的負(fù)相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)為-

3、0.812;而一般,蟲輕蛹?xì)ぶ嘏c蟲重蛹?xì)ぽp的,其存活率均不高;而蛹?xì)ぶ?0.95mg-1.0mg)或蟲體重適中(12mg-15mg)的桔小實(shí)蠅存活率均較高。尤其是金桔,兩年的存活率分別為95％與80%,均屬第一位;其次是椪柑、本地早等寬皮桔類,以檸檬和宮川為最低。不同年度間寬皮橘和雜柑類各品種上的性比較穩(wěn)定,性比值均>1,其中椪柑上雌蟲數(shù)穩(wěn)定多于雄蟲;而胡柚上雄蟲數(shù)穩(wěn)定多于雌蟲。此外,根據(jù)幼蟲歷期及其相應(yīng)的成蟲或蛹及蛹?xì)さ妮p重,可初步推

4、斷金桔是桔小實(shí)蠅生長較適宜的果品,而檸檬為不太適宜的果品。經(jīng)生命表分析,在胡柚上桔小實(shí)蠅凈增殖率R0、內(nèi)稟增長率rm與周期增長率λ最大,種群加倍時(shí)間DT最短;在檸檬上R0、rm和λ值最小,而T和DT最長,而其他品種間差異不大。
　　2.桔小實(shí)蠅氣味結(jié)合蛋白BdorOBP2的基因克隆、表達(dá)和純化利用PCR技術(shù)克隆得到了桔小實(shí)蠅氣味結(jié)合蛋白基因BdorOBP2開放閱讀框全長,GenBank登錄號(hào)為KC773766。序列分析表明,Bdo

5、rOBP2的ORF長約447bp,編碼了148個(gè)氨基酸;多重序列比對(duì)結(jié)果表明,BdorOBP2蛋白與擬黃果蠅和黑腹果蠅的序列相似性最高;通過系統(tǒng)發(fā)育分析,桔小實(shí)蠅與雙翅目昆蟲的親緣關(guān)系較近,特別是蔥地種蠅的DantOBP2。并且構(gòu)建了BdorOBP2原核表達(dá)載體,誘導(dǎo)表達(dá)獲得了BdorOBP2重組蛋白,為下一步的熒光結(jié)合實(shí)驗(yàn)打下了基礎(chǔ)。
　　3.桔小實(shí)蠅氣味結(jié)合蛋白BdorOBP2的結(jié)合特性熒光競爭結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,BdorOBP

6、2與醛類和酯類物質(zhì)的結(jié)合能力較強(qiáng),而與醇類和烯類化合物的結(jié)合能力較弱。在酯類化合物的結(jié)合實(shí)驗(yàn)中,除順3-己烯乙酸酯和水楊酸甲酯外,大多數(shù)氣味揮發(fā)物都能將1-NPN與BdorOBP2的結(jié)合率降至50%以下;在醛類化合物中,除乙醛外,幾乎都能將1-NPN與BdorOBP2的結(jié)合率降至50%以下,其中苯甲醛和3,4二甲基苯甲醛的結(jié)合能力最強(qiáng),并且它們可以將相對(duì)熒光值競爭至10%或以下;BdorOBP2與β-紫羅蘭酮的結(jié)合能力也較強(qiáng),且也能夠?qū)?/p>

7、1-NPN與BdorOBP2的結(jié)合率降至7%。這表明這些重要的揮發(fā)性物質(zhì)在桔小實(shí)蠅對(duì)寄主水果進(jìn)行定位、產(chǎn)卵和危害等過程中發(fā)揮著重要的作用。
　　4.桔小實(shí)蠅對(duì)揮發(fā)性物質(zhì)的觸角電位反應(yīng)觸角電位反應(yīng)結(jié)果顯示,桔小實(shí)蠅對(duì)大多數(shù)酯類和醛類物質(zhì)具有較高的反應(yīng)活性,這與結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本一致。桔小實(shí)蠅雌蟲對(duì)反-2-己烯醛和苯甲醛均能產(chǎn)生較強(qiáng)的電生理反應(yīng)活性,而水楊酸甲酯卻能對(duì)雄蟲產(chǎn)生較強(qiáng)的反應(yīng)活性,在熒光結(jié)合試驗(yàn)中癸醛是結(jié)合較好的一種配基,但在