MIA2在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)及其甲基化研究.pdf

1、第一部分：MIA2在不同HBV表達(dá)水平肝癌細(xì)胞中的表達(dá)
　　目的：探討黑色素瘤抑制蛋白2(melanoma inhibitory activity,MIA2)在肝癌細(xì)胞中的表達(dá)與HBV感染狀態(tài)的關(guān)系。
　　方法：培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞株HepG2和持續(xù)表達(dá)乙肝病毒的人肝癌細(xì)胞株HepG2.2.15,采用細(xì)胞免疫組化和Western Blot檢測兩種細(xì)胞株中MIA2蛋白表達(dá)差異。
　　結(jié)果：MIA2蛋白在HepG2.2.15細(xì)胞

2、株中的表達(dá)水平較HepG2細(xì)胞株減低,結(jié)果有統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)論：MIA2蛋白在HBV陽性肝癌細(xì)胞中表達(dá)減低,提示HBV感染可能通過抑制MIA2的表達(dá)導(dǎo)致肝癌發(fā)生發(fā)展。
　　第二部分：5-氮雜-2-脫氧胞苷對肝癌細(xì)胞中MIA2表達(dá)的影響
　　目的：應(yīng)用甲基化酶抑制劑5-氮雜-2-脫氧胞苷(5-aza-2,-deoxycytidine,5-Aza-CdR)作用肝癌細(xì)胞株HepG2,觀察其對細(xì)胞增殖和凋亡的影響,并觀察用

3、藥后肝癌細(xì)胞中黑色素瘤抑制蛋白2(melanoma inhibitory activity 2,MIA2)表達(dá)的變化情況。
　　方法：分別以濃度0、1、2、4、8、10、20、40μmol/L的5-Aza-CdR作用HepG2細(xì)胞,MTT法檢測細(xì)胞增殖,流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡。再以0μmol/L和10μmol/L的5-Aza-CdR作用HepG2細(xì)胞,細(xì)胞免疫組化和Western blot檢測細(xì)胞中MIA2蛋白表達(dá)。
　　結(jié)

4、果：5-Aza-CdR作用HepG2后,MTT結(jié)果顯示細(xì)胞增殖受到抑制,在一定藥物濃度范圍內(nèi),細(xì)胞增殖抑制率和藥物濃度呈正相關(guān);流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示細(xì)胞早期凋亡增加,在一定藥物濃度范圍內(nèi),早期凋亡率和藥物濃度呈正相關(guān);細(xì)胞免疫組化和Western blot結(jié)果顯示與對照組(0μmol/L)比較,10μmol/L組中MIA2蛋白表達(dá)增強。
　　結(jié)論：5-Aza-CdR作用HepG2細(xì)胞后,MIA2蛋白表達(dá)明顯增強,細(xì)胞增殖受到抑制,細(xì)