丙戊酸誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)樣細胞分化中對Oct-4的影響.pdf

1、骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymalstem cells，BMSCs)是一種來源于骨髓的具有多向分化潛能的成體干細胞，它具有的特點包括：多向分化和自我更新的特性，骨髓間充質(zhì)干細胞在一定的條件和刺激因子作用下，可以分化為神經(jīng)元樣細胞、成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞、心肌細胞等。但是有關(guān)骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)樣細胞分化的調(diào)控機制的研究尚未取得突破性進展。有關(guān)研究實驗表明，丙戊酸作為組蛋白去乙酰化酶抑制劑，其能夠抑制

2、腫瘤細胞生長和干細胞分化，本研究實驗應(yīng)用組蛋白去乙?；敢种苿┍焖嶙鳛檎T導(dǎo)劑，探索大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)樣細胞分化的過程中對Oct-4的影響。
　　目的:
　　探討丙戊酸誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞向成神經(jīng)樣細胞分化過程中對OCT-4的影響。
　　方法:
　　體外分離SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞，將其分為兩組：對照組，不加丙戊酸，細胞加入預(yù)誘導(dǎo)液（含1μmol/Lβ-ME，10％FBS的DMEM/F12）培養(yǎng)24小

3、時，然后換誘導(dǎo)液（含200μmol/L BHA,2%DMSO的DMEM/F12）誘導(dǎo)5小時。實驗組，誘導(dǎo)前12小時，在細胞培養(yǎng)液中加入丙戊酸。用倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)，免疫細胞化學(xué)法檢測 NSE、GFAP、Oct-4蛋白的表達。Western blot檢測細胞內(nèi) NSE及 GFAP蛋白OCT4的表達。
　　結(jié)果:
　　倒置顯微鏡下可以觀察到骨髓間質(zhì)干細胞呈紡錘狀、橢圓形，誘導(dǎo)后出現(xiàn)突出，向周圍伸出明顯突起，呈現(xiàn)神經(jīng)細胞樣