豚鼠壺腹部Cajal樣間質(zhì)細胞形態(tài)學觀察.pdf

1、目的：
　　自1887年Oddi括約肌(Sphincter of Oddi，SO)被發(fā)現(xiàn)以來，人們對其結構及功能的認識也不斷深入，且清楚地認識到其對膽胰正常功能的維持具有重要的作用。我們在前期的一系列研究發(fā)現(xiàn)SO的解剖及功能異常與多種膽胰疾病有關，如原發(fā)膽管色素結石、膽囊切除術后綜合征、先天性膽胰管合流異常、急性胰腺炎及Oddi括約肌功能障礙（Sphincter of Oddi Dysfunction，SOD）等。
　　SO

2、的自主動力本質(zhì)上是肌源性的。SO處存在多種神經(jīng)以調(diào)節(jié)其運動，同時協(xié)調(diào)SO運動與十二指腸，膽囊和胃的運動。SO動力的改變可能是來自于神經(jīng)和生物活性物質(zhì)在平滑肌水平上的信號的整合。SO中興奮的起源和傳導機制仍不清楚。SO動作電位的產(chǎn)生，同步化和協(xié)調(diào)化以及相應的收縮活動是否涉及一種特殊的細胞或是SO細胞的內(nèi)在起搏機制仍不清楚。Cajal間質(zhì)細胞(Interstitial Cells ofCajal，ICCs)是胃腸道的起搏細胞，它能產(chǎn)生自發(fā)性

3、電慢波、參與神經(jīng)信號的整合與傳遞，對胃腸平滑肌節(jié)律性運動具有重要調(diào)控作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，在胃腸道外的一些器官，如膽囊、膽道中亦存存在Cajal樣細胞(Interstitial Cajal-likeCells，ICLCs)。與胃腸道ICCs相似，這些器官的ICLCs能產(chǎn)生自發(fā)節(jié)律性電活動而且對節(jié)律性運動具有重要調(diào)控作用。
　　本研究擬利用免疫組織熒光染色方法、透射電鏡成像技術研究SO中ICLCs的形態(tài)學特征以及其在調(diào)控SO運動中

4、的作用，探討ICLCs在調(diào)控SO運動以及在SOD發(fā)病中的作用，為明確SO運動機理及治療SOD提供新的理論依據(jù)。
　　方法：
　　(1)制備豚鼠壺腹部組織冰凍切片，進行免疫熒光雙重染色，使用酪氨酸激酶受體(c-kit)作為ICLCs的標記物，SMA標記SO中平滑肌細胞，PGP9.5標記神經(jīng)纖維，分別對c-kit與SMA以及c-kit與神經(jīng)纖維進行免疫熒光雙重標記，研究豚鼠壺腹部Cajal樣間質(zhì)細胞的形態(tài)學和分布特征。(2)豚鼠

5、壺腹部切片HE染色觀察壺腹部形態(tài)。(3)制備豚鼠壺腹部標本超薄切片，透射電鏡觀察ICLCs超微結構及其與SMA和神經(jīng)纖維之間的細胞連接結構。
　　結果：
　　(1)豚鼠壺腹部的ICLCs呈紡錘形，有向外伸展的突起，有電子致密度高的巨大卵圓形核，核周胞質(zhì)少，胞質(zhì)內(nèi)有豐富的線粒體，大量的光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，沿ICLCs胞膜有空泡。(2)壺腹部ICLCs主要分布于粘膜下環(huán)肌層表面、環(huán)肌層與縱肌層之間、肌間神經(jīng)叢區(qū)及環(huán)肌層與縱肌

6、層內(nèi)。ICLCs在肌間神經(jīng)叢區(qū)相互連接形成網(wǎng)絡狀結構，ICLCs突起也和平滑肌細胞形成緊密關系。(3) ICLCs與神經(jīng)纖維之間形成緊密連接，在壺腹部環(huán)形肌層縱肌層間圍繞有神經(jīng)纖維，神經(jīng)纖維有高電子致密度的軸芯和電子致密度低的囊泡，神經(jīng)元軸突末端與環(huán)肌層、縱肌層形成突觸樣連接，提示在解剖及功能上密切相關。
　　結論：
　　豚鼠壺腹部存在ICLCs，豚鼠壺腹部ICLCs主要分布于平滑肌層或肌束以及肌間神經(jīng)叢區(qū)。壺腹部ICLCs