靶向干預AKR1B10-S1P信號通路抑制小鼠肝癌生長的實驗研究.pdf

1、目的：
　　肝細胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC）是最常見的惡性腫瘤之一，全球半數(shù)以上的肝癌發(fā)生在中國，由于其病情發(fā)展隱匿，且缺乏有效的早期診斷方法，使得大部分肝癌病人治療時已至中晚期，預后往往較差。AKR1B10最先是從肝癌組織中克隆分離出來的，研究表明，AKR1B10可成為肝癌早期診斷的血清學分子標志物。近期我們研究發(fā)現(xiàn)，S1P是AKR1B10的下游信號分子，抑制AKR1B10可抑制腫瘤細胞的生長

2、，并且S1P的水平降低。為進一步明確靶向干預AKR1B10-S1P信號通路對肝癌生長的影響，本文將從動物水平進行研究，探討AKR1B10-S1P信號通路是否能作為肝癌新的潛在的治療靶點。
　　方法：
　　1.采用肝癌細胞HepG2建立肝癌皮下移植瘤模型。將裸鼠隨機分成對照組、OA實驗組和FTY720實驗組。
　　2.當腫瘤體積達到70–100 mm3時，各組分別腹腔注射生理鹽水、OA(20 mg/kg)或 FTY720

3、(10 mg/kg)，隔天注射一次，共治療21天。
　　3.每兩天用游標卡尺測量腫瘤的大小，用公式計算出腫瘤的體積大小V=[L×W2]÷2，V代表體積，L代表長徑，W代表短徑。治療結(jié)束后收集腫瘤組織。
　　4.收集腫瘤標本和血液標本，稱量裸鼠腫瘤的重量，用HE染色的方法觀測裸鼠腫瘤的細胞形態(tài)。
　　5.采用Western-blot實驗檢測AKR1B10-S1P信號通路的一些重要蛋白的表達水平。
　　6.TUNEL

4、檢測分析腫瘤組織細胞凋亡。
　　結(jié)果：
　　1.AKR1B10抑制劑OA明顯抑制腫瘤生長。
　　2.S1P抑制劑FTY720明顯抑制腫瘤生長。
　　3.OA和FTY720抑制裸鼠腫瘤AKR1B10的表達。
　　4.OA和FTY720抑制S1P相關代謝酶的表達。
　　5.靶向抑制AKR1B10-S1P誘導肝癌細胞凋亡。
　　結(jié)論：
　　1.靶向干預AKR1B10-S1P信號通路可顯著抑制肝癌