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簡介:中圖分類號UDC學(xué)校代碼10055密級公開尚矧大謦博士學(xué)位論文GRASP蛋白介導(dǎo)的高爾基體堆疊機(jī)制及內(nèi)吞作用蛋白SGIPL,的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究GRASPSPROTEINMEDIATEDGOLGIMEMBRANESTACKINGMETABOLISMANDSTRUCTURALINSIGHTINTOENDOCYTOSISPROTEINSGIP1南開大學(xué)研究生院二O一四年五月南開大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的研究成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本學(xué)位論文的研究成果不包含任何他人創(chuàng)作的、己公開發(fā)表或者沒有公開發(fā)表的作品的內(nèi)容。對本論文所涉及的研究工作做出貢獻(xiàn)的其他個人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名遏延塞2014年5月28日非公開學(xué)位論文標(biāo)注說明本頁表中填寫內(nèi)容須打印根據(jù)南開大學(xué)有關(guān)規(guī)定,非公開學(xué)位論文須經(jīng)指導(dǎo)教師同意、作者本人申請和相關(guān)部門批準(zhǔn)方能標(biāo)注。未經(jīng)批準(zhǔn)的均為公開學(xué)位論文,公開學(xué)位論文本說明為空白。論文題目申請密級口5艮帶FI42年口秘密410年口機(jī)密420年保密期限20年月13至20年月日審批表編號批準(zhǔn)日期20年月日南開大學(xué)學(xué)位評定委員會辦公室蓋章有效注限制★2年可少于2年秘密一WIO年可少于10年機(jī)密★20年可少于20年
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簡介:分類號分類號密級級學(xué)號號20091030172009103017單位代碼單位代碼1075910759石河子大學(xué)石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文阿爾泰獨尾草人工栽培與野生個體若干生物學(xué)特性及次生代謝產(chǎn)物變化格局的研究學(xué)位申請人高茸茸高茸茸指導(dǎo)教師馬淼馬淼教授教授申請學(xué)位門類級別理學(xué)碩士學(xué)科、專業(yè)名稱植物學(xué)研究方向資源植物學(xué)所在學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院中國〃新疆〃石河子2012年6月STUDYONSOMEBIOLOGICALACTERTHEPATTERNOFTHESECONDARYMETABOLITESCONTENTSCHANGESOFWILDCULTIVATEDEREMURUSALTAICUSADISSERTATIONSUBMITTEDTOSHIHEZIUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFTHEDEGREEOFMASTEROFNATURALSCIENCEBYGAORONGRONGPHYTOCHEMISTRYDISSERTATIONSUPERVISPROFMAMIAOJUNE2012
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簡介:DISSERTATIONFORTHEDEGREEOFMASTERBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCOLLETOTRICHUMGLOEOSPORIOIDESANDSCREENINGEFFECTIVEFUNGICIDESTOCONTROLDANGSHANPEARANTHRACNOSEMASTERCANDIDATESHENJINGTINGSUPERVISORPROFTANGENJIAANHUIAGRICULTURALUNIVERSITYHEFEI,ANHUI,CHINAJUNE,2012獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)卜進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也彳、包含為獲得安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我‘同作的|一J志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝立。F夏。學(xué)位論文作者簽名簽字日期紗/2年鄉(xiāng)月//EL學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位淪文的規(guī)定,有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文件,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,收錄到中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文,向社會公眾提供信息服務(wù)。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書。學(xué)位論文作者簽名逃盔至鯉簽字ET期加P年么月//日學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向工作單位通信地址指導(dǎo)教師簽名簽字ET期沙/Z年/月//日電話郵編
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簡介:學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所提交的學(xué)位是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果。本論文中除引文外,所有實驗、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實的。本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外,不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了聲明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名沌R希日期≯\1辱歲同2B同學(xué)位論文使用授權(quán)聲明研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬南京師范大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存本學(xué)位論文的電子和紙質(zhì)文檔,可以借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部內(nèi)容,可以采用影印、復(fù)印等手段保存、匯編本學(xué)位論文。學(xué)??梢韵驀矣嘘P(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔,允許論文被查閱和借閱。保密論文在解密后遵守此規(guī)定保密論文注釋本學(xué)位論文屬于保密論文,保密期限為年。學(xué)位論文作者簽名癍閂芳指導(dǎo)教師簽名1之夕勿主一日期2DFL辱5月2D目日期■■RI目錄目錄摘要工ABSTRACTII前沿IV第一部分1文獻(xiàn)綜述1第1章B淋巴細(xì)胞刺激因子BAFF的研究進(jìn)展211BAFF的結(jié)構(gòu)特點及組織分布2111BAFF的結(jié)構(gòu)特點2112BAFF的表達(dá)分布412BAFF受體4121BAFFR512TACI。5123BCMA613BAFF介導(dǎo)的信號通路614BAFF的生物學(xué)功能8141BAFF對B細(xì)胞的作用_8142BAFF對T細(xì)胞的作用9143BAFF與抗體生產(chǎn)和分化1015BAFF與相關(guān)疾病11151BAFF與自身免疫病11152BAFF與感染12153BAFF與惡性腫瘤1316結(jié)語和展望13第2章Y一干擾素誘導(dǎo)的溶酶體巰基還原酶GILT的研究進(jìn)展1521干擾素簡介1522溶酶體簡介1523Y一干擾素誘導(dǎo)的溶酶體巰基還原酶GILT16231GILT的生物學(xué)活性16232GILT與李斯特病16233國內(nèi)外研究概況和發(fā)展趨勢17第二部分18實驗部分18
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簡介:分類號/怕2密級么開⑧單位代碼10422學(xué)號功,,珈T2∥戶東只季SHANDONGUNIVERSITY博士學(xué)位論文敝朋綴蘭一◆仡渺勻以‘刪了R。一。M跏紉,刎壓縱茁如璣作者培養(yǎng)專業(yè)指導(dǎo)合作姓名單位名稱教師導(dǎo)師沙TS’年于月≯7日一勤一一一一面『瓦一一跳一鱉劾一Z互驢一壁笞一山東大學(xué)博士學(xué)位論文目錄目勇之ICONTENTS1中文摘要1ABSTRACT3導(dǎo)論物種、本質(zhì)與進(jìn)化6第一節(jié)問題的提出一7第二節(jié)問題的分析8第三節(jié)研究歷史和現(xiàn)狀12第四節(jié)我的主要思路18第一章本質(zhì)主義與進(jìn)化論一23第一節(jié)類本質(zhì)主義的三個信條23第二節(jié)本質(zhì)主義與物種漸變論29第三節(jié)界限與模糊性33第四節(jié)群體思想42第五節(jié)反生物學(xué)本質(zhì)主義者們的共識47第二章DNA條形碼理論50第一節(jié)本質(zhì)主義從亞里士多德到克里普克50第二節(jié)DNA條碼技術(shù)54第三節(jié)DNA條碼技術(shù)與物種本質(zhì)主義58第四節(jié)內(nèi)在屬性與分類問題62第五節(jié)同一性條件與物種本質(zhì)68第三章歷史本質(zhì)主義74第一節(jié)支序系統(tǒng)學(xué)與系統(tǒng)發(fā)育物種概念74第二節(jié)歷史本質(zhì)79第三節(jié)模式支序系統(tǒng)學(xué)與歷史本質(zhì)一84第四節(jié)單系群與歷史本質(zhì)89第四章關(guān)系本質(zhì)主義98第一節(jié)三種“物種概念”98第二節(jié)生物學(xué)物種概念與本質(zhì)主義102第三節(jié)基因庫與物種的邊界105第四節(jié)關(guān)系本質(zhì)與特征問題109第五章穩(wěn)態(tài)屬性簇HPC類理論115第一節(jié)穩(wěn)態(tài)屬性簇類115
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簡介:2Q12屆攻讀碩士學(xué)位研究生學(xué)位畢業(yè)論文玫瑰黃腹三節(jié)葉蜂幼蟲附肢的胚胎發(fā)育及其幼期形態(tài)和生物學(xué)研究學(xué)科專業(yè)壅些邑蟲蘭益蟲陵迨研究方向星蟲理查堂研究生整塹堂指導(dǎo)教師蕉堡麴熬援完成時間2Q生屢I燃㈣炒研究生學(xué)位畢業(yè)論文的獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的碩士學(xué)位畢業(yè)論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨立進(jìn)行的研究工作及取得的研究結(jié)果論文中的研究數(shù)據(jù)及結(jié)果的獲得完全符合學(xué)校關(guān)子規(guī)范西北農(nóng)林科技大學(xué)研究生學(xué)術(shù)道德的暫行規(guī)定,如果違反此規(guī)定,一切后果與法律責(zé)任均由本人承擔(dān)。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含莫他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究結(jié)果,也不包含其他人和自己本人已獲得西北農(nóng)林科技大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同事對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文的致謝中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名么之≥∥時間Z口7P∥月/日導(dǎo)師指導(dǎo)研究生學(xué)位畢業(yè)論文的承諾上一一、本人承諾我的碩士研究生童壘蔓型所呈交的碩士學(xué)位畢業(yè)論文是在我指導(dǎo)下獨立開展研究工作及取得的研究結(jié)果,屬于我現(xiàn)崗職務(wù)工作的結(jié)果。并嚴(yán)格按照學(xué)校關(guān)于規(guī)范西北農(nóng)林科技大學(xué)研究生學(xué)術(shù)道德的暫行規(guī)定而獲得的研究結(jié)果。如果違反學(xué)校關(guān)于規(guī)范西北農(nóng)林科技大學(xué)研完生學(xué)術(shù)道德的暫行規(guī)定,我愿接受按學(xué)校有關(guān)規(guī)定的處罰處理并承擔(dān)相應(yīng)導(dǎo)師連帶責(zé)任。導(dǎo)師簽名時間2OL7卑石月/日
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簡介:獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其姒吆艨麟聰撕賊晁螄鏘燃蚴彬鼽貅橢的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意學(xué)位論文作者簽名劉磊簽字日期如侈年6月夕日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了熊0疑數(shù)犬勁關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱本人授怒萎焰欠爭以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)乎論文作者簽名爰』磊簽字吼沙陟年6月羅日學(xué)位論文作者畢業(yè)去向工作單位通訊地址導(dǎo)師簽名簽字日期電郵編日不同接頭的白蛋白干擾素Q2B在畢赤酵母中表達(dá)量及生物活性研究ABSTRACTOBJECTIVEHUMANSERTLMALBUMINISAPROTEINWITHHIGHERLEVELSOFPLASMAWHICHCANCOMBINEWITHMANYSUBSTANCESINTHEBODYALBUMINISALSOAGOODDRUGCARRIERINTHEBODYCANEFFECTIVELYEXTENDTHEDRUGHALFLIFE,BUTWILLNOTTOPRODUCEIMMUNOGENICTHISEXPERIMENTWANTTOMAKEDIFFERENTLINKEROFPPIC9一HSAIFNA一2B,ANDTHENTHEPPIC9KHSAIFNA一2BWASCUTWITHRESTRICTIVEENDONUCLEASESALI,ATTHESAMETIME,THELINEDPLASMIDWASTRANSFORMEDINTOPICHIAPASTORSMDLL68BYELECTROPORATION,POSITIVETRANSFORMANTSEXPRESSTHETARGETPROTEINBYINDUCEOFMETHANOLUNDERTHERIGHTCONDITIONS,THESUPEMATANTANALYZEDBYSDSPAGEANDWESTERNBLOT,ANDTHENTHEEXPRESSIONLEVELOFTHEFUSIONALBUMININTERFERONWASIDENTIFIEDBYTHEENZYMELINKEDIMMUNOSORBENTASSAYANDFINALLYUSINGTHECYTOPATHICEFFECTINHIBITIONASSAYWISHCELLSVSVVIRUSTOMEASUREITSANTIVIRALACTIVITYMETHODSDIFFERENTLINKEROFTHEHUMANSERUMALBUMININTERFERONBYOVERLAPPINGPCRBETWEENALBUMINANDINTERFERON0【一2B,THENUMBEROFAMINOACIDSJOINTSARE15,10,5UNDERTHESALTLECONDITIONS,THEFIRSTJOINTOFEACHHUMANALBUMININTERFERONINDUCEDTOEXPRESS,F(xiàn)ILTEROUTTHEHIGHESTEXPRESSIONLEVEL,ANDTHENWETAKETHREETHEHIGHESTCLONINGTOEXPRESSBYTHEMETHANOLINDUCTIONUNDERTHESAMECONDITIONS,ITWASMEASUREDBYTHEAMOUNTOFEXPRESSION,ACCORDINGTOTHEDIFFERENCEOFEXPRESSION,WITHA500MLSHAKEFLASKCULTURE,THEPRELIMINARYSEPARATIONANDPURIFICATIONOFPROTEINS,F(xiàn)INALLYWEUTILIZEDTHECYTOPATHICEFFECTINHIBITIONASSAYFORTHEDETERMINATIONOFTHESIZEOFITSACTIVITYRESPECTIVELY‘TOCALCULATETHESPECIFICACTIVITYRESULTSTHECONSTRUCTINGOFTHREERECOMBINANTSOFTHEADAPTERPROTEINEXPRESSEDINPICHIAPASTOR括BYOVERLAPPINGPCRTHEEXPRESSIONOFTHE15AMINOACIDSLINKERTHE10AMINOACIDSLINKERANDTHE5AMINOACIDSLINKEROFPROTEINSCONCENTRATIONIS194MG/L,135MG/L,AND177MG/L,THREEKINDSOFLINKERSOFHUMANALBUMININTERFERONSPECIFICACTIVITYAREMUCHLOWERTHANSPECIFICACTIVITYOFN
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簡介:中國海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文南極大磷蝦(EUPHAUSIASUPERBA)胰蛋白酶樣酶分離純化、酶學(xué)性質(zhì)探索及其生物學(xué)活性研究姓名向宇申請學(xué)位級別碩士專業(yè)海洋生物學(xué)指導(dǎo)教師姜國良201106采用右旋葡聚糖硫酸鈉DSS誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎UC模型,以生理鹽水為陰性對照,柳氮磺胺吡啶為陽性對照,分別灌胃不同劑量20RAGKG1和40MGKGD的南極磷蝦蛋白酶制劑,通過肉眼及實體觀察,EGF的測定,組織切片觀察對比各組實驗結(jié)果。結(jié)果顯示灌胃南極磷蝦蛋白酶的小鼠在飲用DSS誘導(dǎo)UC后,能夠保持良好的精神狀態(tài),少有便血現(xiàn)象,并能抑制小鼠體重的減輕;同時,南極磷蝦蛋白酶能夠明顯提高UC小鼠血液中EGF表達(dá)水平,從組織切片結(jié)果來看,南極磷蝦蛋白酶也能降低潰瘍癥狀的發(fā)生,其作用效果在一定程度上與其濃度成正比。關(guān)鍵詞南極大磷蝦胰蛋白酶樣酶分離純化酶學(xué)性質(zhì)生物學(xué)活性
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簡介:學(xué)校代碼10225學(xué)號B15020學(xué)位論文擬南芥ATCYSB相互作用蛋白的篩選及生物學(xué)功能研究指導(dǎo)教師姓名申請學(xué)位級別論文提交日期授予學(xué)位單位郭坤元柳參奎教授東北林業(yè)大學(xué)博士學(xué)科專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)2015年3月論文答辯日期2015年06月東北林業(yè)大學(xué)授予學(xué)位日期2015年06月答辯委員會主席論文評閱人聾宣冬櫛素大擎摘要摘要半胱氨酸蛋白酶抑制劑普遍存在于動物,植物和微生物體內(nèi),它在蛋白質(zhì)水解,蛋白酶活性調(diào)節(jié)等許多生理過程中起著重要的作用。之前人們對半胱氨酸蛋白酶抑制劑的研究主要集中在抗病抗蟲害方面,但是近些年來,人們逐漸發(fā)現(xiàn)半胱氨酸蛋白酶抑制劑在植物逆境防御過程中也起著重要的作用,因此探求和挖掘半胱氨酸蛋白酶抑制劑在植物逆境防御中的這種抗逆機(jī)理和潛在的作用對象具有十分重要的意義。ATCYSB是擬南芥中的一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑,GUS染色結(jié)果表明ATCYSB在萌發(fā)的種子,年幼的葉,花藥,種莢和成熟的葉,莖,種莢里均有表達(dá),這表明它是植物生長周期里一個十分活躍的基因。另外前期的研究結(jié)果表明它可以受鹽,堿和氧化等多種逆境脅迫的誘導(dǎo)表達(dá),且在擬南芥中過量表達(dá)ATCYSB可以提高轉(zhuǎn)基因擬南芥對鹽,堿和氧化等逆境脅迫的耐受性,這說明ATCYSB在植物應(yīng)對逆境脅迫的過程中起著重要的作用。為了探求和尋找ATCYSB轉(zhuǎn)基因擬南芥植株的這種抗逆機(jī)理以及它潛在的作用對象,我們對其進(jìn)行了酵母雙雜交篩選并得到了一個與其具有相互作用的蛋白,鈣離子依賴性的核酸酶ATCAN2,同時利用酵母共轉(zhuǎn)化實驗,體外PULLDOWN實驗和體內(nèi)雙分子熒光互補(bǔ)實驗驗證了ATCYSB與ATCAN2之間的相互作用。ATCAN2的酶活性檢測實驗表明,ATCAN2對雙鏈DNADSDNA,單鏈DNASSDNA,環(huán)形質(zhì)粒,RRNA,MRNA和TRNA等多種底物均具有降解能力,且ATCAN2降解RNA的速率快于DNA。除了鈣離子之外,ATCAN2的酶活性還可以依賴鎂離子和錳離子,以及鈣離子鎂離子和鈣離子錳離子雙離子條件,但是鋅離子和金屬螯合劑EDTA可以抑制ATCAN2的酶活性。點突變實驗表明ATCAN2氨基酸序列中的天冬氨酸和精氨酸位點在保持其核酸酶活性上起著重要作用。UREAPAGE實驗結(jié)果表明ATCAN2是一種從3端往5,端酶解的外切核酸酶。另外實驗過程中還發(fā)現(xiàn),ATCAN2的酶活性可以一定程度上被ATCYSB的抑制,這迸一步說明了ATCYSB和ATCAN2之間存在著相互作用關(guān)系。ATCAN2的生物學(xué)功能研究表明,ATCAN2也可以受鹽,堿,滲透和氧化等多種逆境脅迫誘導(dǎo)表達(dá),同時GUS染色也顯示ATCAN2在種子,花,莖,衰老的葉等多個時期和組織器官中有表達(dá)且逆境脅迫可以提高GUS的表達(dá)量,這說明ATCAN2基因也與逆境相關(guān)。另外在酵母里的功能研究表明過表達(dá)ATCAN2會導(dǎo)致酵母對鹽脅迫的敏感性。在擬南芥里的功能研究表明過表達(dá)ATCAN2也會導(dǎo)致擬南芥對鹽,堿和氧化等多種逆境脅迫的敏感性,而突變掉該基因則會提高植株對鹽,堿和氧化等多種逆境脅迫的抗性,同
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簡介:戴長松抗人神經(jīng)菌毛素1BLB2區(qū)單克隆抗體的制備及其生物學(xué)活性初步研宄抗人神經(jīng)菌毛素1BLB2區(qū)單克隆抗體的制備及其生物學(xué)活性初步研究摘要神經(jīng)菌毛素1NEUROPILIN一1;NRPL是一種多功能的非酪氨酸激酶受體,其最初作為軸突導(dǎo)向因子3SEMAPHORIN3,SEMA3的受體,在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中具有調(diào)控神經(jīng)元細(xì)胞的導(dǎo)向以及軸突生長的功能。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn),NRPL在血管內(nèi)皮細(xì)胞以及多種腫瘤細(xì)胞表面高表達(dá),是血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子165VEGFL65的共受體。NRPL通過其胞外區(qū)BLB2結(jié)構(gòu)域與VEGFL65相結(jié)合,顯著提高VEGFL65與血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2VEGFR2,K_DR的結(jié)合能力,促進(jìn)血管發(fā)育生成。腫瘤部位新生血管及腫瘤細(xì)胞表面高表達(dá)的NRPL,能顯著促進(jìn)腫瘤局部血管生成以及腫瘤生長、侵襲和轉(zhuǎn)移。研究顯示,阻斷VEGFL65與NRPI的結(jié)合,不僅能直接抑制腫瘤細(xì)胞的遷移,抑制移植瘤的形成,而且還能抑制腫瘤局部血管生成,間接抑制腫瘤的生長。由于NRPL在腫瘤發(fā)生發(fā)展中所起到的病理性促進(jìn)作用,NRPL逐漸成為繼VEGFR后的一個抗腫瘤治療的新靶標(biāo)。本研究通過基因工程技術(shù)克隆得到人NRPLBLB2結(jié)構(gòu)域HUNRPLBLB2CDNA,并對其進(jìn)行表達(dá)并純化,將獲得的重組蛋白免疫BALB/CD、鼠,通過雜交瘤技術(shù)篩選特異性針對人HUNRPLBLB2HUNRPLBIB2的單克隆抗體。該特異性單克隆抗體的獲得將為抗血管生成及靶向抗腫瘤治療提供良好的生物學(xué)材料。一、人神經(jīng)菌毛素1BLB2區(qū)編碼基因的克隆、表達(dá)利用PCR技術(shù)獲得HUNRPL叭B2編碼基因,將該基因片段克隆到載體質(zhì)粒DCOLDTMTF,獲得重組質(zhì)粒PCOLDⅢTF.HUNRPL叭B2,雙酶切鑒定和測序分析正確后,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌BL21DE3,構(gòu)建重組菌BL21DE3PCOLDTMTF.HUNRPLBLB2。16。C下,重組表達(dá)菌經(jīng)不同濃度的IPTG誘導(dǎo)表達(dá),SDS.PAGE分析,確定IPTG的最佳誘導(dǎo)濃度。融合蛋白經(jīng)NI柱親和層析進(jìn)行純化,純化后的蛋白經(jīng)超濾、濃縮、截留、BUFFER交換后獲得濃縮的融合蛋白TFNRPL叭比。SDSPAGE結(jié)果表明IPTG的最佳誘導(dǎo)濃度為0.4MM/L,濃縮后的融合蛋白TFNRPL叭吣濃度為1.0MGDML。二、抗人神經(jīng)菌毛素1BLB2區(qū)單克隆抗體的制備及生物學(xué)特性分析采用融合蛋白TFHUNRPLB1蛇及標(biāo)簽蛋白TF分別免疫8、ⅣKBALB/CDX鼠,100UG/只,共免疫3次,間隔2WK。首免,將融合蛋白與等量完全弗氏佐劑混合乳化,采用腹部皮下多點注射免疫;二免,將融合蛋白與等量不完全弗氏佐劑混合乳化,采用腹部皮下多點免疫;加強(qiáng)免疫,尾靜脈注射不加佐劑的融合蛋白。3D后,取鼠脾臟細(xì)胞與SP2/0.AG14進(jìn)行細(xì)胞融合。采用間接ELISA及間接免疫熒光兩種方法分別篩選陽性雜交瘤細(xì)胞。間接ELISA,戴長松抗入神經(jīng)菌毛素1BLB2區(qū)單克隆抗體的制備及其生物學(xué)活性初步研究3DEVELOPMENTOFMONOCLONALANTIBODIESAGAINSTHUMANNEUROPILINIBLB2DOMAINANDIDENTIFICATIONOFITSBIOLOAICALACTIVBIOLOGICALACTIVI‘T‘YABSTRACTNEUROPILIN1NRPI,AMULTIFUNCTIONALRECEPTORNONTYROSINEKINASEWASFIRSTLYCHARACTERIZEDASARECEPTOROFSEMAPHORIN3,WHICHACTSASANAXONGUIDANCEMOLECULEMEDIATINGTHEGUIDANCEOFNEURONALCELLSANDAXONALGROWTHDURINGTHEDEVELOPMENTOFNERVOUSSYSTEM.FURTHERSTUDIESSHOWEDTHATNRPIISHIGHLYEXPRESSEDONTHESURFACEOFENDOTHELIALCELLSASWELLASVAZRIOUSTYPESOFTUNLORCELLLINESANDACTSASACORECEPTOROFVASCULARENDOTHELIALGROWTHFACTOR165VEGFT65.NRPLVEGFL65BINDINGTHROUGHKSNRPLBLB2DOMAINANDITGREATLYENHANCESVEGFR2ACTIVITYANDDOWNSTREAMSIGNALINGANDGREATLYPROMOTESANGIOGENESIS.NRPLPROMOTESTUN3.ORANGIOGENESISANDGROWTHOBVIOUSLYDUETOITSHIGHLYEXPRESSIONONTHESURFACEOFTUMORCELLSANDTUMORVESSELS,PREVIOUSSTUDIESHAVESHOWNTHATBLOCKINGTHEINTERACTIONBETWEENVEGFANDNRP1COULDDIRECTLYSUPPRESSTHEMIGRATIONOFTUMORCELLLINES,INHIBITXENOGRAFTFORMATIONANDINDIRECTLYSUPPRESSTHEDEVELOPMENTOFTULTIORBYSUPPRESSINGULTIORANGIOGENESIS.GIVENTHEEVIDENCESTHATNRP1PLAYSAGREATIMPORTANTROLEINTUMORIGENESIS,ITISBECOMINGANOVELTARGETFORCANCERTHERAPY.INTHISSTUDYGENEENCODINGHUMANNRP1BLB2DOMAINHUNRPLBLB2WASCLONEDANDEXPRESSED,MONOCLONALANTIBODIESMCABSAGAINSTRECOMBINANTHUNRPL6M2PROTEINWEREDEVELOPED.THESEMCABSWOULDBECOMEUSEFULMATERIALSINDEVELOPINGDRUGSTARGETINGANGIOGENESISANDTUNLOTSTHERAPY.1.PREPARATIONOFRECOMBINANTPROTEINHUNRPL6162H1LNRPL6岫2EDNAOBTAINEDBYPCRWASINSERTEDINTOPLASMIDPCOLDTMTFTOMAKEARECOMBINANTPLASMIDPCOLDTMTF.HUNRPL61砣.AFTERDOUBLE.ENZYMEDIGESTIONANDSEQUENCING.THERECOMBINANTPLASMIDWASTRANSFERREDINTOE.COLICOMPETENCEBL21DE3ANDTHERECOMBINANTBACTERIABL2LDE3PCOLDTMTF.HUNRPL6162、WASINDUCEDBYIPTGINDIFFERENTCONCEN訂ATIONAT16℃ANDANALYSEDBYSDSPAGE.THENTHERECOMBINANTPROTEINTFHUNRPL6162WASPURIFIEDBYNICKELAFFINITYCHROMATOGRAPHY,CONCENTRATEDANDBUFFEREXCHANGEDBYUITRAFFLTRATION.RESULTSOFSDSPAGESHOWEDTHATTHEBESTCONCEN缸AFIONOFIPTGFORINDUCINGTHISRECOMBINANTPROTEINIS0.4MM/LANDTHERECOMBINANTPROTEINOBTAINEDISABOUT1MG/ML.
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簡介:鐵線蕨屬(ADIANTUM)為鳳尾蕨科(PTERIDACEAE)植物,全屬共有200多種,從寒溫帶到熱帶地區(qū)均有分布,南美洲分布最廣,我國共有34種,其中特有種16個。關(guān)于鳳尾蕨科的研究已發(fā)展到多領(lǐng)域多學(xué)科,但對鐵線蕨屬的研究大多集中在系統(tǒng)發(fā)育和生理生化方面,關(guān)于該屬的生殖學(xué)研究還較少。近年該屬先后多次發(fā)現(xiàn)新種和自然雜交種,尤其是在一回羽葉鐵線蕨類群中。關(guān)于我國產(chǎn)一回羽葉鐵線蕨類的生殖研究,目前只報道了假鞭葉鐵線蕨(AMALESIANUM)的配子體發(fā)育,和少數(shù)幾個種的孢子形態(tài)。本文選取一回羽葉鐵線蕨類為研究材料,用5個葉綠體基因序列(RBCL,ATPB,ATPA,TRNLF,RPS4TRNS)和三種建樹方法(最大簡約法、最大似然法及貝葉斯推理法)研究該類群系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系,在明確種間親緣關(guān)系的基礎(chǔ)上,應(yīng)用掃描電鏡、孢子繁殖、流式細(xì)胞術(shù)等方法,對這一類群進(jìn)行包括孢子形態(tài)演化、配子體發(fā)育過程和生殖方式在內(nèi)的生殖生物學(xué)研究,得出結(jié)果如下團(tuán)羽鐵線蕨(ACAPILLUSJUNONIS)為一回羽葉鐵線蕨類群的基部類群;半月形鐵線蕨(APHILIPPENSE)和孟連鐵線蕨(AMENGLIANENSE)互為姐妹群;翅柄鐵線蕨(ASOBOLIFERUM)與孟連鐵線蕨和半月形鐵線蕨親緣關(guān)系最近,比二者更進(jìn)化;產(chǎn)于泰國的AZOLLINGERI與產(chǎn)于中國的鞭葉鐵線蕨(ACAUDATUM)互為姐妹類群;白堊鐵線蕨系(SERGRAVESIANA)與普通鐵線蕨(AEDGEWOTHII)親緣關(guān)系最近。鐵線蕨屬孢子為四面體三裂縫、輻射對稱,孢子紋飾由周壁形成,紋飾復(fù)雜多樣。一回羽葉鐵線蕨類孢子紋飾可分為光滑、粗糙、顆粒、瘤狀和疣狀5種類型。一回羽葉鐵線蕨類群的祖先孢子形態(tài)是瘤狀紋飾的可能性最大。本文觀察了具有代表性的仙霞鐵線蕨(AJUXTAPOSITUM)、白堊鐵線蕨(AGRAVESII)、半月形鐵線蕨、假鞭葉鐵線蕨、鞭葉鐵線蕨及蒼山鐵線蕨(ASINICUM)6個物種的配子體發(fā)育。孢子萌發(fā)類型除假鞭葉鐵線蕨為紫萁型外,其他均為書帶蕨型;除了半月形鐵線蕨原葉體發(fā)育過程較特殊以外,其他均為鐵線蕨型。假鞭葉鐵線蕨、仙霞鐵線蕨及半月形鐵線蕨在無菌培養(yǎng)下可進(jìn)行發(fā)達(dá)的營養(yǎng)繁殖。一個配子體上可發(fā)育出十幾個或更多的子代原葉體,子代原葉體也有性器的著生,并且仍可繼續(xù)營養(yǎng)繁殖下去。假鞭葉鐵線蕨和仙霞鐵線蕨的子代原葉體,發(fā)育后期開始長出假根,子代可無損傷的脫離母體獨立存活;半月形鐵線蕨在絲狀體階段可發(fā)育成介于絲狀體與片狀體之間的群叢。配子體的營養(yǎng)繁殖可以看作為一種同植物孢子體類似的胎生現(xiàn)象。半月形鐵線蕨和鞭葉鐵線蕨為無配子生殖。鱗片先于葉發(fā)育出來,外層深紅棕色鱗片發(fā)育為葉柄基部鱗片,內(nèi)層綠色鱗片發(fā)育為葉柄和葉片的鱗片及毛。二者孢子體發(fā)育初期無胚根,半月形鐵線蕨的幼孢子體旁偶爾生長有表面無毛的“軸刺結(jié)構(gòu)”。孢子體發(fā)育順序為鱗片葉根。確定物種是否為無配子生殖應(yīng)結(jié)合形態(tài)、孢子計數(shù)和細(xì)胞倍性綜合考慮。對鐵線蕨屬進(jìn)行生殖生物學(xué)研究,不僅可以為討論一些復(fù)雜科的系統(tǒng)演化提供必要佐證,而且可以為雜交物種的形成提供必要的資料及證據(jù),為其保護(hù)和繁育提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。
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簡介:中圖分類號Q958UDC590訝{I£解密級學(xué)校代碼碩士學(xué)位論文學(xué)歷碩士公開兩種血蜱的生物學(xué)特性及系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系分析BIOLOGICALCHARACTERISTICSANDPHYLOGENYANALYSISOFTWOHAEMAPHYSALISSPECIES作者姓名指導(dǎo)教師學(xué)科專業(yè)研究方向論文開題日期陳雪沽劉敬澤教授生態(tài)學(xué)生理生態(tài)與分子生態(tài)學(xué)2009年12月30日H字丈乒D4●■學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人所提交的學(xué)位論文兩種血蜱‘L物學(xué)特性及系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析.是在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨立進(jìn)行研究工作所取得的原創(chuàng)性成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本滄文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體.均已在文中標(biāo)明。本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。論文作者簽名冶乳虧J喜指導(dǎo)教師確認(rèn)簽名2.012年J月,夕同伽L,年J_月J。閂學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書夕F硝JF本學(xué)位論文作者完全了解河北師范大學(xué)有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交學(xué)位論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)河北師范大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其它復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。敞儲,C簽智靜舌浩指刪吣孫夕』訓(xùn)砷姍7N郵年㈨磊J謠1/鞏
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簡介:溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文論文題目答辯委員會主席答辯委員會成員溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中英文縮略詞對照表縮略詞英文全稱中文名稱DDH20PBSLBECOLIDNAPCRDNTPTAEADIGADMT晰ERP44ER01LAPPAR1,PPI砸CHOAMPHRPPMSFTNFQSTNFRDMS0FBSDMESDSPAGEODBPKDAMLDOUBLEDISTILLEDWATER去離子水PHOSPHATEBUFFERSALINE磷酸緩沖鹽溶液LURIABERTANINBROTHLB培養(yǎng)基ESCHERICHIACOLI大腸桿菌DEOXYRIBONUCLEICACID脫氧核糖核酸POLYMERASECHAINREACTION聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)DEOXYNUCLEATRADETRIPHOSPHASE三磷酸脫氧核糖核苷酸TRIS/ACETATEBUFFERTRIS/乙酸電泳緩沖液ADIPONEETIN脂聯(lián)素GLOBULARDOMAINOFADIPONECTIN脂聯(lián)素球部區(qū)域MUTANTTYPE突變型WILDTYPE野生型ENDOPLASMICRETICULUMPROTEINOF44KDA44KDA內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ENDOPLASMICRETICULUMOXIDOREDUCTASEILA內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氧化還原酶1LAPEROXISOMEPROLIFERATORACTIVATEDRECEPTORY過氧化物酶體增殖活化受體丫PPARRESPONSIVEELEMENTPPAR結(jié)合元件CHINESEHAMSTEROVARYCELLS中國倉鼠卵巢細(xì)胞AMPICILLIN氨芐青霉素HORSERADISHPEROXIDASE辣根過氧化物酶PHENYLMETHANESULFONYLFLUORIDE苯甲基磺酰氟TUMORNECROSISFACTOR0【腫瘤壞死因子0【SOLUBLETUMORNECROSISFACTORRECEPTOR可溶性腫瘤壞死因子受體DIMETHYISULFOXIDE二甲基亞砜FETALCALFSERUM胎牛血清IMERCAPTOETHANOLB一巰基乙醇SODIUMSALT十二烷基硫酸鈉POLYACRYLAMIDEGELELECTRICITY聚丙烯酰胺凝膠電泳OPTICALDENSITY吸光度BASEPAIR堿基對KILODALTON千道爾頓MILLILITER毫升
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簡介:分類號密級華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文恥垢分枝桿菌引物合成酶DNAG的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究及CDIGMP的體外合成STRUCTURALBIOLOGYSTUDYONML℃D8爿CZER雙刀MSJ互EG』L互Z刀SPRIMASEDNAGANDTHESYNTHESISOFCDIGMPJV陌ZXD研究生學(xué)號指導(dǎo)教師指導(dǎo)小組羅秋琦2013304110244曾志雄教授代明球教授殷平教授彭貴青教授位燈國教授范成鵬副教授專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究方向結(jié)構(gòu)生物學(xué)獲得學(xué)位名稱理學(xué)碩士獲得學(xué)位時間2016年6月26日華中農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院二。一六年六月恥垢分枝桿菌引物合成酶DNAG的結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究及CDIGMP的體外合成目錄摘要IABSTRACTII縮略詞表V1前言111研究問題的由來112恥垢分枝桿菌213DNA引物合成酶3131真核生物的引物合成酶3132原核生物及噬菌體的引物合成酶4133引物合成酶的功能614CDIGMP6141CDIGMP的合成與降解6142CDIGMP的信號調(diào)控及受體815結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究進(jìn)展9151結(jié)構(gòu)生物學(xué)9152X射線晶體學(xué)91521晶體優(yōu)化101522質(zhì)譜1116研究目的及主要內(nèi)容112材料與方法1321材料13211載體及菌株13212酶及各種化學(xué)試劑1322基因、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)及功能預(yù)測分析。1323表達(dá)載體構(gòu)建14231表達(dá)載體構(gòu)建14232重疊延伸PCR1524蛋白表達(dá)和純化16I
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簡介:SOUTHWESTUNIVERSITYCODE10635STUDENTNUMBER112012410002323UNIVERSITYMASTERDISSERTATIONREACTIVEOXYGENSPECLESELECTROCHEMCIAL1~‘‘●’L●OSENSORSANDTHEIRAPPLICATIONINCELLBIOLOGYSTUDIES』L●MAJORANALYTICALCHEMISTRYFIELDBIOSENSORANDITSAPPLICATIONSINCELLBIOLOGYSUPERVISORASSOCIATEPROF.LINGYUCANDIDATELIXIAGAOCHONGQING,CHINAMAY2015目錄中文摘要???????????????????????????????IABSTRACT?????????????????????????????III第1章緒論?????????????????????????????..11.1活性氧簡述??????????????????????????11.1.1活性氧的產(chǎn)生和性質(zhì)???????????????????..11.1.2活性氧對機(jī)體的危害???????????????????一41.1.3活性氧的清除??????????????????????..61.1.4活性氧的檢測??????????????????????一71.2活性氧及細(xì)胞損傷???????????????????????111.3生物電化學(xué)傳感器???????????????????????121.3.1生物電化學(xué)傳感器的發(fā)展?????????????????121.3.2生物電化學(xué)傳感器的應(yīng)用?????????????????131.3.3生物電化學(xué)傳感器的發(fā)展趨勢???????????????131.4本論文的選題依據(jù)及研究思路??????????????????14第2章超氧陰離子和一氧化氮參與小分子抑制劑威羅菲尼對黑色素瘤細(xì)胞的殺傷。。。。。。.。。。...。,。。。。。。。。.。。..。.。。。.。。。。。。。.?。。..。。。。。。....。。.。。。。。。。。。....。。..。.。。。.。。.?。。。。。。...。。...。。。。。。。。。。.。。..。。。。。。。。。。。。。...】172.1引言????????????????????????????..172.2實驗部分??????????????????????????..182.2.1材料與試劑???????????????????????182.2.2儀器??????????????????????????????????.182.2.3細(xì)胞生長能力與毒性實驗?????????????????182.2.4電化學(xué)傳感器檢測02一和NO水平?????????????192.2.5細(xì)胞氧化應(yīng)激與線粒體膜電位的熒光分析??????????202.2.6統(tǒng)計分析????????????????????????202.3結(jié)果與討論?????????????????????????一212.3.1PLX4032誘導(dǎo)的細(xì)胞生長抑制???????????????212.3.2電化學(xué)傳感器監(jiān)測A375和MV3細(xì)胞時02一和NO的釋放???212.3.3熒光法檢測細(xì)胞內(nèi)02“和NO水平?????????????25
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