河豚卵巢源紅酵母產(chǎn)類(lèi)胡蘿卜素的研究.pdf

1、類(lèi)胡蘿卜素是一類(lèi)廣泛分布于動(dòng)物、植物及微生物的重要天然色素類(lèi)物質(zhì)，具有抗氧化、防衰老、皮膚保護(hù)、預(yù)防腫瘤和心血管疾病等重要生理功能，被認(rèn)為是最具潛力的雙功能色素。本論文從河豚魚(yú)卵巢中分離出一株紅酵母，并對(duì)該酵母所產(chǎn)色素進(jìn)行了提取、分離純化及結(jié)構(gòu)鑒定。主要研究?jī)?nèi)容及結(jié)果如下:
　　 1.對(duì)來(lái)自野生河豚魚(yú)卵巢及肝臟的微生物進(jìn)行分離，從卵巢中篩選到一株橘紅色的菌株TL-3。該菌株菌落較大、橘紅色、表面光滑、濕潤(rùn)，革蘭氏陽(yáng)性，菌體細(xì)胞呈

2、卵圓形;酵母鑒別染色觀察到其含有子囊孢子;PCR擴(kuò)增該菌株IST序列，經(jīng)序列同源性比對(duì)分析，該菌株與紅酵母屬(Rhodotorula sp.)相似度達(dá)99％。根據(jù)菌株的菌落形態(tài)特征觀察和生理生化試驗(yàn)，以及26S rDNA序列分析，鑒定該菌株為紅酵母。
　　 2.對(duì)該菌株產(chǎn)類(lèi)胡蘿卜素的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件進(jìn)行了初步研究，發(fā)現(xiàn)其生長(zhǎng)所需營(yíng)養(yǎng)要求低，培養(yǎng)基組成對(duì)菌體生長(zhǎng)及類(lèi)胡蘿卜素合成的影響較小;光照、溫度、pH等培養(yǎng)條件是類(lèi)胡蘿卜素合成

3、的主要影響因素。類(lèi)胡蘿卜素提取的最佳培養(yǎng)條件為:蔗糖2％，蛋白胨0.6％，酵母膏0.3％，NaCl1％，pH7.2，20℃，160 rpm，避光，培養(yǎng)84 h，在此條件下，菌體生物量為12.2 g/L，類(lèi)胡蘿卜素總產(chǎn)量為2.62 mg/L。
　　 3.對(duì)該菌株所產(chǎn)色素進(jìn)行了提取、分離及結(jié)構(gòu)鑒定研究。比較了四種常用的酵母細(xì)胞破碎方法，確定酸熱破壁法提取該菌體色素的效率較高，采用硅膠柱色譜分離菌體色素的分離效果較好。應(yīng)用類(lèi)胡蘿卜素特

4、征化學(xué)實(shí)驗(yàn)、薄層色譜法、紫外可見(jiàn)分光光度法、紅外掃描及HPLC和核磁共振法進(jìn)行色素的性質(zhì)及結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果表明，該酵母色素主要含有四種類(lèi)胡蘿卜素組分，其中兩種分別為β-胡蘿卜素和番茄紅素。
　　 4.研究了酸熱法提取酵母色素的條件及色素的穩(wěn)定性。研究發(fā)現(xiàn)酸濃度、酸浸泡時(shí)間、熱處理時(shí)間及提取溶劑是影響色素提取效果的主要因素，類(lèi)胡蘿卜素的最佳提取條件為:3M鹽酸浸泡1h，熱處理6 min，以石油醚/丙酮(2∶3)為溶劑，35℃提取30