類胡蘿卜素體外模擬吸收研究.pdf

1、本文旨在進(jìn)一步探索類胡蘿卜素的吸收機理。首先建立了穩(wěn)定的較純的牛和雞腸上皮細(xì)胞體外原代培養(yǎng)模型，并在此基礎(chǔ)上模擬牛和雞腸道內(nèi)環(huán)境，系統(tǒng)研究了兩種腸上皮細(xì)胞對類胡蘿卜素的兩種典型代表全反式β-胡蘿卜素和黃體素的吸收特點。 牛和雞小腸上皮細(xì)胞體外原代培養(yǎng)體系的建立聯(lián)合使用胰蛋白酶和EDTA作為消化酶液能分離出健全的腸絨毛隱窩單位，經(jīng)堿性磷酸酶染色鑒定培養(yǎng)至第11-14d的牛和雞腸上皮細(xì)胞為分化完全、功能健全的成熟腸上皮細(xì)胞。本試驗為

2、腸上皮細(xì)胞的體外原代培養(yǎng)提供了可行的方法，所獲得的腸上皮細(xì)胞完全可供相關(guān)研究之用。 時間和濃度對類胡蘿卜素吸收的影響牛和雞腸上皮細(xì)胞對β-胡蘿卜素和黃體素的吸收具有時間依賴性、飽和性。低濃度下(≤2.5uM)，兩種細(xì)胞對兩種類胡蘿卜素的吸收量與濃度呈直線相關(guān)，高濃度下(3-27uM)，吸收量與濃度呈曲線相關(guān)；當(dāng)濃度≥18uM時，吸收達(dá)到最大值。 牛和雞腸上皮細(xì)胞對類胡蘿卜素的選擇性吸收牛和雞腸上皮細(xì)胞對β-胡蘿卜素和黃體

3、素的吸收表現(xiàn)出一定的選擇性。雞腸上皮細(xì)胞對β-胡蘿卜素和黃體素的吸收均極顯著高于牛腸上皮細(xì)胞(p<0.01);牛和雞腸上皮細(xì)胞均優(yōu)先累積β-胡蘿卜素，當(dāng)濃度為1uM、1.6uM和2.2uM時，兩種腸上皮細(xì)胞對β-胡蘿卜素的吸收量均極顯著高于黃體素(p<0.01)；同一濃度下(0.5～27uM)，兩種細(xì)胞對β-胡蘿卜素吸收量是黃體素的1.3～2倍；在吸收量與濃度呈直線相關(guān)的范圍內(nèi)，培養(yǎng)16h，牛腸上皮細(xì)胞對β-胡蘿卜素的吸收率為10.1±

4、1.8％，而對黃體素的吸收率為7.1±0.5％，雞腸上皮細(xì)胞對β-胡蘿卜素的吸收率為12.2±1.1％，而對黃體素的吸收率為8.9±0.6％。 類胡蘿卜素在吸收過程中的相互影響細(xì)胞外相對高濃度的βC(或LUT)對細(xì)胞LUT(或βC)的吸收并未產(chǎn)生不利影響，隨著細(xì)胞外βC(或LUT)濃度的升高，牛和雞腸上皮細(xì)胞對LUT(或βC)的吸收量逐漸增大，當(dāng)濃度為24uM時，細(xì)胞對LUT(或βC)的吸收量均極顯著高于對照組(p<0.01)。