高產(chǎn)β-胡蘿卜素紅酵母的選育及發(fā)酵研究.pdf

1、本課題對實(shí)驗(yàn)室保藏的一株紅酵母Rhodotorula.spp進(jìn)行了鑒定，并對其發(fā)酵條件作了初步研究。同時(shí)，分別用紫外線照射、低能N+注入、高靜水壓處理對該菌株進(jìn)行誘變，并重點(diǎn)研究了高靜水壓突變株的發(fā)酵性能。 通過形態(tài)學(xué)和生理生化指標(biāo)實(shí)驗(yàn)，按照《酵母菌的特征與鑒定手冊》提供的檢索表確定了該菌株為粘紅酵母（Rhodotorula glutinis），并將其編號為NR98。利用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化該菌株發(fā)酵培養(yǎng)基，獲得其最佳配比為：葡萄糖4％

2、、蛋白胨2％、酵母膏1％，在此條件下，經(jīng)過72h培養(yǎng)，NR98的生物量、β-胡蘿卜素產(chǎn)量分別達(dá)到19.81g/L和6.03mg/L。另外，選定對R.glutinisNR98產(chǎn)β-胡蘿卜素具有促進(jìn)作用的K+、Fe2+ 、正十二烷、正己烷四種促進(jìn)劑，利用二次回歸正交優(yōu)化設(shè)計(jì)，計(jì)算結(jié)果得到每種添加物的最佳添加量分別為0.63％、0.0094％、2.11％、1.52％，得到β-胡蘿卜素的理論最高產(chǎn)量為7.61mg/L，而在該最優(yōu)添加條件下，實(shí)際

3、產(chǎn)量為7.34mg/L，比在同條件下沒有添加的5.99mg/L提高了22.54％。 其次，利用紫外線照射誘變獲得了一株β-胡蘿卜素產(chǎn)量有所提高的突變株NR98-Z3，該突變株β-胡蘿卜素產(chǎn)量可達(dá)到7.09mg/L，比出發(fā)菌株提高了18.76％；利用低能離子注入誘變篩選出的高產(chǎn)菌株NR98-L15的β-胡蘿卜素產(chǎn)量達(dá)到8.03 mg/L，比出發(fā)菌株提高了34.51％。而在高靜水壓處理后篩選出的高產(chǎn)突變株NR98-G36的β-胡蘿卜