離子輻射誘導(dǎo)線粒體生物發(fā)生及相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、離子輻射產(chǎn)生大量ROS/RNS(reactive oxygen species/reactive nitrogenspecies)，引發(fā)細(xì)胞凋亡，被廣泛用于癌癥的放射治療。絕大部分輻射產(chǎn)生的ROS/RNS來(lái)源于線粒體，引發(fā)多種線粒體輻射生物效應(yīng)。線粒體生物發(fā)生涉及許多生理病理過(guò)程，其缺陷與糖尿病視網(wǎng)膜病變、阿爾茲海默病和衰老等密切相關(guān)。資料顯示，離子輻射能夠誘導(dǎo)人類細(xì)胞和小鼠組織中線粒體DNA/核DNA比值的上調(diào)，但具體機(jī)制目前尚不清楚

2、。線粒體轉(zhuǎn)錄因子A(mitochondrialtranscription factor A，TFAM)是核DNA編碼的普遍存在于線粒體中的轉(zhuǎn)錄因子，在線粒體DNA的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制、穩(wěn)定性及損傷修復(fù)等方面都起著重要的作用。本論文以人肺腺癌A549細(xì)胞為主要研究對(duì)象，著重研究輻射后細(xì)胞內(nèi)線粒體生物發(fā)生及TFAM在其中的作用。具體研究結(jié)果如下:
　　 1.輻射對(duì)線粒體DNA相對(duì)拷貝數(shù)的影響:25cGy Alpha粒子輻射后24h，A549

3、細(xì)胞中線粒體DNA相對(duì)拷貝數(shù)呈現(xiàn)上調(diào)趨勢(shì);
　　 2.輻射對(duì)細(xì)胞色素C氧化酶活性的影響:25cGy Alpha粒子輻射后24h，A549細(xì)胞中由線粒體DNA和核DNA共同編碼的細(xì)胞色素C氧化酶活性顯著增加，而僅由核DNA編碼的琥珀酸脫氫酶的活性無(wú)顯著變化;
　　 3.輻射對(duì)TFAM表達(dá)的影響:25cGy Alpha粒子輻射后12h，A549細(xì)胞和人肝癌SMMC-7721細(xì)胞中TFAM表達(dá)水平上調(diào)，對(duì)A549細(xì)胞TFAM表

4、達(dá)水平的定量分析結(jié)果顯示TFAM的上調(diào)在輻照后12h呈極顯著水平;
　　 4.降低TFAM對(duì)輻射誘導(dǎo)線粒體生物發(fā)生的影響:采用短發(fā)夾RNA干擾技術(shù)抑制A549細(xì)胞中TFAM的表達(dá)獲得了TFAM穩(wěn)定敲低的細(xì)胞株，25cGyAlpha粒子輻射前后該細(xì)胞株線粒體DNA相對(duì)拷貝數(shù)和細(xì)胞色素C氧化酶活性均無(wú)明顯的變化;
　　 5.PI3K/Akt參與輻射誘導(dǎo)TFAM的上調(diào):抑制劑LY294002處理A549細(xì)胞后，25cGy Al