復(fù)合手性體系毛細(xì)管電泳-非接觸式電導(dǎo)分離檢測氨基酸對映體研究.pdf

1、氨基酸在生命的起源以及各種動(dòng)植物的生存和演化中扮演著十分重要的角色。組成蛋白質(zhì)的20種氨基酸（甘氨酸除外）都是L型的，D型和L型氨基酸對映體在生物和生理活性方面存在很大的差別。因此手性氨基酸的分離是研究生命科學(xué)的基礎(chǔ)之一，同時(shí)在蛋白質(zhì)多肽的研究、有機(jī)化學(xué)中不對稱合成以及醫(yī)藥、食品、衛(wèi)生等領(lǐng)域都具有很重要的意義。 氨基酸對映體的分離分析是分析化學(xué)研究中的熱點(diǎn)和難點(diǎn)之一。目前已經(jīng)報(bào)道的拆分方法，主要有氣相色譜、液相色譜和毛細(xì)管電泳。

2、前兩種方法，操作復(fù)雜費(fèi)時(shí)，制備的手性色譜柱費(fèi)用昂貴。毛細(xì)管電泳具有高效、快速、樣品用量少和操作簡單等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)成功地應(yīng)用于氨基酸的手性分離，但是目前所采用的檢測方法以光學(xué)檢測為主，而大部分氨基酸無光學(xué)活性，需進(jìn)行柱前或柱后衍生化處理才能進(jìn)行檢測，操作費(fèi)時(shí)繁瑣，靈敏度低，且易引入新的誤差。電化學(xué)檢測作為一種靈敏度高、選擇性好的檢測方法在毛細(xì)管電泳分離分析中開始得到應(yīng)用，其中電導(dǎo)檢測法具有通用性，氨基酸無須經(jīng)過衍生即可檢測，操作簡單方便。本

3、論文采用毛細(xì)管—非接觸式電導(dǎo)檢測法對未衍生化苯丙氨酸和絲氨酸對映體進(jìn)行了分離檢測，并對其分離機(jī)理進(jìn)行初步探討。 本論文主要內(nèi)容和方法如下： 1．以鋅—L—精氨酸作為配體交換選擇劑，與羥丙基甲基纖維素（HPMC）構(gòu)成新型二元手性選擇體系，在熔融石英毛細(xì)管（50μmi．d．×50cm）中，用毛細(xì)管區(qū)帶電泳—非接觸式電導(dǎo)法成功對未衍生化苯丙氨酸對映體（D，L—Phe）進(jìn)行分離。在選定體系下：2．0mmol/LNaOH+1．0m

4、mol/LCit+2．0mmol/Zn（Ac）2+4．0mmol/LL—Arg+10mg/LHPMC（pH=7．8），苯丙氨酸對映體獲得良好的基線分離。其線性范圍為10～210mg/L，標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)r=0．998，檢出限（S/N=3）為2mg/L。對影響分離度的影響因素：電泳運(yùn)行液組成和濃度、配體選擇劑摩爾比和濃度、HPMC的濃度等進(jìn)行了詳細(xì)的討論。本實(shí)驗(yàn)具有較好的靈敏度和重現(xiàn)性，操作簡便，分析成本低，可發(fā)展于實(shí)際樣品的分析應(yīng)用。

5、 2．在熔融石英毛細(xì)管（50μmi．d．×50cm）中，以銅—L—精氨酸作為配體交換選擇劑，與羥丙基甲基纖維素（HPMC）構(gòu)成新型二元手性選擇體系，用毛細(xì)管區(qū)帶電泳—非接觸式電導(dǎo)法對未衍生化絲氨酸對映體（D，L—Ser）實(shí)現(xiàn)分離檢測。在選定體系下：3．0mmol/LNaOH+0．4mmol/LCit+2．5mmol/LCu（Ac）2+5．0mmol/LL—Arg+15mg/LHPMC（pH=10．5），絲氨酸對映體獲得很好的基線