鈦膠整體柱的制備及鈦膠在分離蛋白、肽方面的應(yīng)用.pdf

1、氧化鈦由于其獨(dú)特的化學(xué)特性，在催化領(lǐng)域、傳感領(lǐng)域、電子領(lǐng)域、光學(xué)領(lǐng)域和分離科學(xué)領(lǐng)域中得到廣泛研究與應(yīng)用。最近，對(duì)于氧化鈦整體材料的研究進(jìn)一步發(fā)展起來。將鈦膠(TiO2)的優(yōu)良化學(xué)特性與整體材料的高通透性等優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來，即將鈦膠應(yīng)用于高效液相色譜的整體固定相，引起了色譜界的極大興趣。同時(shí)，TiO2作為新型色譜固定相，在生物樣品如磷脂、磷酸蛋白、肽、核酸及中間體的分離富集以及糖類物質(zhì)分析等方面有著更為廣闊的前景。本文研究了鈦膠整體柱的制備和

2、條件優(yōu)化，以及鈦膠基質(zhì)填充色譜柱在分離蛋白、肽方面的應(yīng)用。
　　 本研究包括三部分：⑴以鈦酸丁酯(正丁基鈦)為前驅(qū)物，醋酸為螯合劑，正丁醇為溶劑，鹽酸為凝膠調(diào)節(jié)劑，通過溶膠-凝膠法制備鈦膠整體材料。所得材料性能采用N2吸附-脫附等溫線、SRD、掃描電鏡進(jìn)行分析表征。從而，確定影響整體柱內(nèi)部微觀結(jié)構(gòu)因素，包括：正丁基鈦與水、正丁醇、醋酸、鹽酸的比例及相互作用；凝膠化溫度；凝膠干燥過程中升溫程序的控制。并在正丁基鈦：醋酸：正丁醇：鹽

3、酸：水(摩爾比)=1:5:4:0.45:6和1:4:2.8:0.5:5.5的原料比下，凝膠化溫度為21℃時(shí)，控制凝膠干燥升溫過程，制備出了具有較好外觀和性能的鈦膠整體柱。⑵使用正相、反相鈦膠填充色譜柱分離酪蛋白水解液中得到的多肽，確定流動(dòng)相中有機(jī)相比例及梯度過程，使用緩沖鹽的類型及濃度，找到最佳分離條件：正相色譜柱-流動(dòng)相為85％ACN，磷酸鈉緩沖鹽pH5.0，磷酸鈉鹽濃度2.0mM；反相色譜柱-乙腈梯度：3.5-15.4％(8min)