三種蟲(chóng)草屬真菌金屬硫蛋白性質(zhì)研究.pdf

1、金屬硫蛋白是一類(lèi)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物體內(nèi)，具有低分子量、高巰基含量，能大量結(jié)合重金屬離子的活性蛋白質(zhì)。
　　蛹蟲(chóng)草以15g·L-1Zn2+在10L發(fā)酵罐中誘導(dǎo)培養(yǎng)56h后收集，產(chǎn)率為每升發(fā)酵液收集12.021g菌絲體（干重）;亞香棒蛹蟲(chóng)草以18g·L-1Zn2+在10L發(fā)酵罐中誘導(dǎo)培養(yǎng)64h后收集菌絲體，產(chǎn)率為每升發(fā)酵液收集12.164g菌絲體（干重）;九州蟲(chóng)草以15g·L-1Zn2+在10L發(fā)酵罐中誘導(dǎo)培養(yǎng)56h后收集，

2、產(chǎn)率為每升發(fā)酵液收集16.921g菌絲體（干重）。細(xì)胞破碎取上清液通過(guò)兩次凝膠柱層析，冷凍干燥得到三種蟲(chóng)草金屬硫蛋白純品。利用考馬斯亮藍(lán)法（Bradford法）進(jìn)行純度鑒定，運(yùn)用銀飽和分析法結(jié)合原子吸收光譜（AAS）測(cè)定MT含量，利用Ellman's方法和火焰原子吸收法分別測(cè)得巰基含量和結(jié)合鋅原子數(shù)，運(yùn)用電噴霧質(zhì)譜法測(cè)得分子量，利用全自動(dòng)氨基酸分析儀測(cè)定氨基酸組成。
　　發(fā)酵終點(diǎn)處蛹蟲(chóng)草金屬硫蛋白、亞香棒蟲(chóng)草金屬硫蛋白、九州蟲(chóng)草金

3、屬硫蛋白的產(chǎn)量分別為12.876mg/g菌絲體（濕重）、15.335mg/g菌絲體濕重、14.335mg/g菌絲體（濕重），分子量分別為7390D、7680D、6500D，每分子蛋白質(zhì)含巰基數(shù)分別為14個(gè)、18個(gè)、20個(gè)，每分子蛋白質(zhì)結(jié)合Zn原子數(shù)分別為5個(gè)、4個(gè)、6個(gè)。氨基酸組成分析結(jié)果顯示，每分子蛹蟲(chóng)草金屬硫蛋白共含57個(gè)氨基酸，其中含有13個(gè)半胱氨酸，疏水氨基酸占29.8％，且含有組氨酸;每分子亞香棒蟲(chóng)草金屬硫蛋白共含60個(gè)氨基酸

4、，其中含有15個(gè)半胱氨酸，疏水氨基酸占22.7％，且含有組氨酸和芳香族氨基酸;每分子九州蟲(chóng)草金屬硫蛋白共含54個(gè)氨基酸，其中含有20個(gè)半胱氨酸，疏水氨基酸占19.6％，且含有1個(gè)組氨酸。
　　從半數(shù)清除率濃度來(lái)看，三種蟲(chóng)草總還原能力的大小:九州蟲(chóng)草金屬硫蛋白＞亞香棒蟲(chóng)草金屬硫蛋白＞蛹蟲(chóng)草金屬硫蛋白;九州蟲(chóng)草Zn-MT與谷胱甘肽清除羥基自由基的能力相當(dāng)，強(qiáng)于亞香棒Zn-MT和蛹蟲(chóng)草Zn-MT，而亞香棒Zn-MT強(qiáng)于蛹蟲(chóng)草Zn-MT;