降膽固醇植物乳桿菌I4菌安全性、凍干保護(hù)劑及應(yīng)用研究.pdf

1、膽固醇即膽甾醇，屬于環(huán)戊烷多氫菲的衍生物，是構(gòu)成機(jī)體組織細(xì)胞內(nèi)膜的重要物質(zhì)之一。然而過(guò)量攝入膽固醇，易誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、腦中風(fēng)、高血壓等心腦血管疾病，嚴(yán)重影響了人類生命安全，因此降低血清中膽固醇含量對(duì)心腦血管病人來(lái)說(shuō)十分重要。乳酸菌是一種廣泛存在并與人類生活密切相關(guān)的益生菌，具有促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)，維持機(jī)體微生態(tài)平衡，進(jìn)而改善胃腸道功能；抑制胃腸道內(nèi)非正常菌落的生長(zhǎng)，提高身體免疫力等眾多生理功能息息相關(guān)。有實(shí)驗(yàn)證明部分乳酸菌具有降膽固

2、醇的作用，這就為降低血清中膽固醇的濃度又提供了新的可行性研究方向。同時(shí)，也要注意到一些乳酸菌又是人畜的致病菌，在應(yīng)用前必須確保乳酸菌的安全性。
　　本文研究了Lactobacillus plantarum I4的安全性；凍干保護(hù)劑的優(yōu)化；在酸奶上的應(yīng)用。為L(zhǎng)actobacillus plantarum I4的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
　　論文從以下三個(gè)方面進(jìn)行研究。
　　1 Lactobacillus plantarum

3、 I4安全性檢測(cè)
　　由于部分乳酸菌的代謝產(chǎn)物對(duì)機(jī)體的健康存在潛在的不良影響，因此對(duì)本實(shí)驗(yàn)室保藏的降膽固醇植物乳桿菌I4菌進(jìn)行了安全性檢測(cè)。通過(guò)在培養(yǎng)基中添加組氨酸、酪氨酸和5′-磷酸吡哆醛的誘導(dǎo)，經(jīng)培養(yǎng)基檢測(cè)法初步檢測(cè)，Lactobacillus plantarum I4沒(méi)有表現(xiàn)出組氨酸和酪氨酸脫羧酶活性。Lactobacillus plantarum P8有酪氨酸脫羧酶活性， Lactobacillus plantarum H

4、21既有組氨酸脫羧酶活性又有酪氨酸脫羧酶活性。利用引物PHDC1/PHDC2和P1-rev/P2-for，以5株乳酸菌基因組DNA為模板，經(jīng)PCR擴(kuò)增，電泳。結(jié)果顯示，PCR檢測(cè)與培養(yǎng)基檢測(cè)法結(jié)果一致。降膽固醇植物乳桿菌I4菌沒(méi)有組氨酸和酪氨酸脫羧酶活性。同時(shí)，經(jīng)培養(yǎng)基檢測(cè)的乳酸菌全都不代謝硝基還原酶和偶氮還原酶。說(shuō)明Lactobacillus plantarum I4是安全的。
　　2 Lactobacillus plantar

5、um I4凍干保護(hù)劑優(yōu)化研究
　　為了提高直投式Lactobacillus plantarum I4發(fā)酵劑的生物活性，考察了5種保護(hù)劑對(duì)Lactobacillus plantarum I4真空冷凍干燥的保護(hù)效果,選擇其中效果較好的四種保護(hù)劑進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化，結(jié)果表明，以4.04％海藻糖、2.9%谷氨酸鈉、10.38%蔗糖、14.84%脫脂乳粉作為復(fù)合保護(hù)劑，Lactobacillus plantarum I4的凍干存活率較高，可達(dá)8

6、3.32%。對(duì)凍干后Lactobacillus plantarum I4發(fā)酵劑降膽固醇能力的進(jìn)行測(cè)試，得出膽固醇降解率為36.2±1.75（%，n=3）。說(shuō)明凍干對(duì)植物乳桿菌 I4的降膽固醇能力沒(méi)有明顯影響。
　　3 Lactobacillus plantarum I4制劑在酸奶中的應(yīng)用
　　由由于Lactobacillus plantarum I4具有良好的功能特性，為了更好地發(fā)揮其益生作用，將其應(yīng)用于產(chǎn)品中具有更重要的現(xiàn)

7、實(shí)意義。因此，通過(guò)其降膽固醇實(shí)驗(yàn)以及與商業(yè)酸奶發(fā)酵劑 YO-MIX復(fù)配實(shí)驗(yàn)，并對(duì)酸奶21d內(nèi)的微生物含量、理化指標(biāo)和降膽固醇率進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明：以商業(yè)益生菌與I4菌粉比例為1:1、發(fā)酵時(shí)間10.6h、發(fā)酵溫度40.9℃、蔗糖濃度8.1%、后發(fā)酵時(shí)間16h進(jìn)行發(fā)酵，酸奶感官評(píng)分最高。4℃冷藏21d間乳酸菌數(shù)為4.01?107 cfu ml-1-4.45?107 cfu ml-1、pH為4-4.28、滴定酸度為72 oT-88oT、持水力