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1、本文從以下四章進(jìn)行了詳細(xì)的探討:
第一章緒論。綜述了谷胱甘肽的性質(zhì)及生物學(xué)功能,并指出了研究谷胱甘肽的重要性,提出了本文的選題思想和研究?jī)?nèi)容。
第二章利用5,5'-二硫硝基苯甲酸衍生化反應(yīng) UV-Vis分光光度法和質(zhì)譜分析法測(cè)定枸杞中谷胱甘肽。利用衍生化試劑和植物材料同步破壁提取的樣品處理方法,采用電噴霧質(zhì)譜法和分光光度法對(duì)枸杞中還原型谷胱甘肽(GSH)進(jìn)行定性、定量分析。質(zhì)譜、UV-Vis吸收光譜測(cè)定結(jié)果表明:枸杞
2、樣品提取過程中GSH受破壁后胞外化學(xué)環(huán)境的影響導(dǎo)致氧化變性,故對(duì)提取液直接測(cè)定GSH含量得不到完整的含量信息。利用5,5'-二硫硝基苯甲酸(DTNB)衍生化試劑同步提取,因生成了穩(wěn)定的GSH的衍生化產(chǎn)物避免了GSH氧化變性導(dǎo)致的GSH分析信息丟失。對(duì)本處理方法得到的枸杞提取液,用 UV-Vis分光光度法測(cè)定了GSH含量,發(fā)現(xiàn)枸杞中含有豐富的GSH,其含量達(dá)6.56-7.37 mg/g(干品),是目前為止植物樣品中GSH含量最高的物種。本
3、研究對(duì)藥用植物胞內(nèi)活性物質(zhì)的準(zhǔn)確分析提供了方法學(xué)上的重要的嘗試,并通過測(cè)定首次發(fā)現(xiàn)枸杞中富含GSH。
第三章鄰苯二甲醛衍生化熒光分光光度法測(cè)定枸杞中GSH的研究。利用電噴霧質(zhì)譜法和紫外-可見分光光度法研究了鄰苯二甲醛(OPA)和還原型谷胱甘肽(GSH)熒光衍生化反應(yīng),發(fā)現(xiàn)GSH和OPA在pH=8時(shí)生成兩種不同結(jié)構(gòu)的衍生化產(chǎn)物。其中與GSH的巰基和氨基與醛基直接縮合產(chǎn)物發(fā)出強(qiáng)烈的熒光發(fā)射且其熒光發(fā)射強(qiáng)度與GSH濃度呈良好的線性關(guān)
4、系。利用熒光分光光度法分別采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法和標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)定枸杞提取液中的GSH含量,發(fā)現(xiàn)枸杞中含有迄今植物樣品中GSH測(cè)定中最高的含量。本研究在前任工作基礎(chǔ)上對(duì)熒光分光光度法測(cè)定GSH的方法學(xué)和衍生化反應(yīng)機(jī)理研究上都做了進(jìn)一步深入的探討并首次測(cè)定枸杞中的GSH含量。通過測(cè)定發(fā)現(xiàn)藥用植物枸杞是一種富含GSH的植物。該研究對(duì)GSH在枸杞生物活性及其藥用價(jià)值中的評(píng)價(jià)和枸杞在防病治病中的應(yīng)用都有實(shí)際意義。
第四章循環(huán)伏安法研究Cu2+與
5、谷胱甘肽的配位作用及分析應(yīng)用。通過 Cu2+與(GSH)的配位作用,在過量 Cu2+溶液中,利用循環(huán)伏安法測(cè)定剩余銅的陽極溶出峰的方法,間接測(cè)定了GSH的含量。實(shí)驗(yàn)表明,銅的氧化峰電流隨溶液中GSH濃度的增加呈線性降低。用該方法測(cè)定7次的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.5132%,檢測(cè)限達(dá)5.6×10-7 mol/L-1。利用該方法測(cè)定針劑中的GSH含量,并與光度法測(cè)定結(jié)果相比較,兩者結(jié)果基本吻合。本研究提供了一種簡(jiǎn)便、可靠、快速測(cè)定基體成
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