蜂花粉和葎草中還原型谷胱甘肽及總巰基含量的測定.pdf

1、本研究用與半胱氨酸殘基的巰基化合物進(jìn)行選擇性衍生化作用的衍生化試劑、利用改進(jìn)的前處理方法，分別用HPLC法和光譜分析的方法，經(jīng)過篩選分別測定了蜂花粉和葎草果穗中的還原型谷胱甘肽（GS H）和總巰基（-SH）含量。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)；蜂花粉中含豐富的GSH和含巰基蛋白，這些巰基化合物是構(gòu)成蜂花粉的重要的活性成分。葎草作為生長迅速、具有抗逆性（抗低溫、抗旱）的草本類植物，其果穗中也含有豐富的GSH和含巰基蛋白，意味著其對(duì)低溫、干旱的抗逆性可能與其

2、含豐富的巰基化合物有關(guān)。葎草果穗細(xì)胞在重金屬脅迫中，其巰基含量具有與重金屬脅迫具有明顯的應(yīng)答作用，說明其對(duì)重金屬脅迫的抗逆性可能也與胞內(nèi)巰基化合物的相互作用有關(guān)。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴利用DTNB為衍生化試劑，高效液相色譜法測定蜂花粉中GSH的含量蜂花粉中GSH和總巰基含量分別為2.1132-2.2106molg-1和4.4288-4.3965molg-1,方法的回收率達(dá)101.84％和100.81%，其檢測限分別為5.43

3、μmolL-1和4.26μmolL-1。⑵光譜法測定蜂花粉中總巰基和GSH的含量。蜂花粉中總巰基和GSH的含量分別為4.7687-4.9075μmo lg-1和1.9079-1.9098μmolg-1，兩種方法的回收率分別達(dá)98.32%和101.44%，檢測限分別為0.39μmolL-1和3.58μmolL-1。⑶采用細(xì)胞破壁、衍生化為一體的同步衍生化的前處理方法，利用OPA衍生化熒光分光光度法和 DTNB衍生化 UV-vis分光光度法

4、測定了葎草果穗中GSH和總巰基的含量。葎草果穗中GSH和總巰基的含量為0.1671-0.1720μmolg-1和1.9937-2.2973μmolg-1，回收率達(dá)95.53%和100.78%，其檢測限分別為0.5725μmolL-1和0.1632μmo lL-1。⑷用葎草果穗作為細(xì)胞樣本，利用光譜法研究不同重金屬脅迫時(shí)巰基化合物的應(yīng)答作用，從而探討了GSH等巰基化合物與Cd、Pb、Fe、Cu等重金屬與胞內(nèi)巰基化合物的相互作用，為生物細(xì)胞