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文檔簡介
1、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)將血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化為血管緊張素Ⅱ,還可以催化舒緩激肽的分解,導(dǎo)致血壓升高。通過抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的活性,可以達到降低血壓的效果。水解植物蛋白,篩選具有ACE抑制活性的水解物,這方面的研究成為熱點。
本文比較了pH stat法、TNBS法和OPA法測定油菜蜂花粉蛋白的水解度,選用pH stat法測定油菜蜂花粉蛋白的水解度。水解120min時,0.5mg/mL水解物對ACE的抑制率達到55.24%,
2、水解度為8.97%。
應(yīng)用酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和堿性蛋白酶水解油菜蜂花粉,水解物對ACE均有抑制作用,其水解物對ACE的IC50分別為0.67mg/mL、0.55mg/mL、0.46mg/mL、0.35mg/mL。
氨基酸分析顯示,蜂花粉和水解物中疏水氨基酸占總氨基酸的45.02%、49.43%,其中丙氨酸占總氨基酸的6.06%、6.73%,脯氨酸占總氨基酸的5.12%、13.12%。
3、 水解物通過膜過濾分離,濃度為0.5mg/mL時,1500Da~5000Da水解物的ACE抑制率和得率都是最高的,ACE抑制率達到54.83%,得率為57%;大于5000Da水解物的ACE抑制率為49.64%,得率為5%;300Da~1500Da水解物的ACE抑制率為42.72%,得率為36.55%;小于300Da水解物的ACE抑制率僅為5.78%,得率為1.5%。
四種蛋白酶的水解物經(jīng)過凝膠分離,發(fā)現(xiàn)ACE抑制活性較
4、強的組分主要集中在70 min和120min之間,對應(yīng)的分子量在146Da和1355Da之間。堿性蛋白酶水解物分離組分ACE抑制率最大,達到90%以上。
油菜蜂花粉蛋白水解物經(jīng)過凝膠層析分離,得到六個組分,均有ACE抑制活性。其中,P-1、P-2和P-3與水解物相比,ACE抑制活性提高,總得率為80.6%;P-2對ACE的抑制活性最強,ACE抑制活性的IC50為90μg/mL,得率為23%;其次是P-3,ACE抑制活性的I
5、C50為120μg/mL,得率為21.8%;P-4、P-5和P-6組分與水解物相比,ACE抑制活性下降,總得率為17.1%。
油菜蜂花粉凝膠層析組分P-2經(jīng)過制備型反相高效液相分離得到7個組分,各分離組分ACE抑制活性不同。H-5對ACE抑制活性最強,IC50為10μg/mL;其次是H-3,IC50為30μg/mL;H-2、H-4和H-6組分ACE抑制率分別為24.39%、14.08%和33.17%;H-1和H-7沒有AC
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