反應(yīng)型熒光法測定多巴胺和谷胱甘肽的研究.pdf

1、隨著生命科學(xué)的發(fā)展，人們對多巴胺(DA)和谷胱甘肽(GSH)兩種生物小分子在生命科學(xué)中的重要作用了解的越來越多，因此建立快速、準確和簡便的多巴胺和谷胱甘肽的檢測方法對生命科學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域都具有重要的意義。熒光分析法因其靈敏度高、選擇性好、簡單快速且穩(wěn)定性好等優(yōu)點被廣泛應(yīng)用于生物小分子的檢測中。本文利用多巴胺和谷胱甘肽與熒光特異性試劑的反應(yīng)，結(jié)合熒光技術(shù)建立了兩種多巴胺和三種谷胱甘肽測定新方法。
　　本論文主要分為以下五個部分:

2、
　　(1)利用Mn2+催化DA生成的醌類化合物與具有強熒光性質(zhì)的2，3-二氨基吩嗪(DAP)縮合，使DAP熒光猝滅，通過測定DA加入前后熒光強度變化定量檢測DA。DA濃度在2.0×10-6M～6.1×10-5M范圍內(nèi)與熒光強度改變量呈線性關(guān)系，檢測限是1.76×10-6M。
　　(2)利用乙二醛作為熒光衍生劑與DA反應(yīng)生成強熒光物質(zhì)測定DA。DA的濃度在1.0×10-7～1.0×10-5M范圍內(nèi)與熒光強度呈線性關(guān)系，檢出限

3、為3.35×10-8M。
　　(3)利用茜素紅(ARS)在BR中有強的熒光發(fā)射，Cu2+可猝滅ARS在BR緩沖溶液中的熒光，面GSH的巰基與Cu2+的強絡(luò)合作用可使體系熒光恢復(fù)，根據(jù)熒光強度定量的檢測GSH。在pH6.3的BR緩沖溶液中，茜素紅-Cu2+體系熒光強度的增強值與GSH的濃度在1.0×10-5～1.9×10-4M范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，檢測限為1.0×10-5M。
　　(4)Hg2+可以猝滅1，8-蒽二磺酰甲胺的熒光，

4、加入GSH后，由于GSH所帶的巰基（-SH）和Hg2+更強的絡(luò)合作用，奪取了與1，8-蒽二磺酰甲胺絡(luò)合的Hg2+，體系的熒光強度增大，據(jù)此可快速的測定GSH。1，8-蒽二磺酰甲胺體系熒光強度的增強值與GSH的濃度在2.5×10-6～3.5×10-5M范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，檢測限是1.68×10-6M。
　　(5)合成的5-（2-甲基-4-三氟甲基-噻唑-5-基）-[1，3，4]噻二唑-2-基胺(MTA)具有強熒光，并能與Hg2+發(fā)生絡(luò)