植物乳桿菌聯(lián)合辣椒素降大鼠血脂及改善腸道環(huán)境的研究.pdf

1、目前，動(dòng)脈粥樣硬化和心腦血管疾病已成為我國(guó)發(fā)病率和死亡率第一的慢性疾病，而高膽固醇血癥是誘發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化和心腦血管疾病公認(rèn)的主要危害因素，已引起全社會(huì)各界學(xué)者們的廣泛關(guān)注。辣椒素是辣椒的主要活性物質(zhì)，具有多種生理功效。關(guān)于辣椒素能有效降低機(jī)體內(nèi)膽固醇含量的功效在國(guó)內(nèi)外已有大量研究報(bào)道證實(shí)，但關(guān)于辣椒素對(duì)腸道健康的影響報(bào)道卻較少。有研究報(bào)道，辣椒素對(duì)腸道健康有重要作用，能參與胃腸道消化液的分泌，促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)。但也有研究發(fā)現(xiàn)，給健康人灌胃辣

2、椒素會(huì)即刻引起腹部痙攣和疼痛，辣椒素還會(huì)引起腸道菌群失衡，減少有益菌數(shù)量而增加有害菌數(shù)量。植物乳桿菌作為一種益生菌，其降機(jī)體血清膽固醇及維護(hù)腸道環(huán)境健康的功效已得到國(guó)內(nèi)外學(xué)界普遍認(rèn)可。因此，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分別研究辣椒素與植物乳桿菌單獨(dú)或結(jié)合降膽固醇的效果及其機(jī)理，這將對(duì)預(yù)防高膽固醇血癥及其并發(fā)癥提供理論依據(jù)。本研究的內(nèi)容分為三個(gè)部分，主要研究結(jié)果如下：
　　1.植物乳桿菌聯(lián)合辣椒素對(duì)卵巢切除大鼠膽固醇代謝及其機(jī)理的研究

3、　　40只雌性老鼠被隨機(jī)分為sham組（n=8）和OVX組（n=32）。sham組接受卵巢偽切除操作（1 mL/100 g BW生理鹽水，無(wú)辣椒素飼料），和OVX組雙側(cè)卵巢切除。待老鼠恢復(fù)后，將32只OVX組大鼠隨機(jī)分為空白組（1 mL/100 g BW生理鹽水，無(wú)辣椒素飼料），辣椒素組（1 mL/100 g BW生理鹽水，喂養(yǎng)含0.08 g/k g辣椒素的飼料），植物乳桿菌組（1 mL2×109 c fu/mL/100 g BW L.

4、P.細(xì)菌液體，無(wú)辣椒素飼料），和結(jié)合組（1 mL2×109 c fu/mL/100 g BW L.P.細(xì)菌液體，喂養(yǎng)含0.08 g/k g辣椒素的飼料）組，實(shí)驗(yàn)周期為6周。通過(guò)研究辣椒素與植物乳桿菌單獨(dú)或結(jié)合對(duì)血漿TC、TG、HDL-C、LDL-C，肝脂含量，糞便中總膽汁酸含量、中性固醇含量，小腸內(nèi)容物中總膽汁酸含量、肝臟的組織形態(tài)、肝臟和回腸相關(guān)基因及其蛋白等指標(biāo)的影響，來(lái)觀察辣椒素與植物乳桿菌對(duì)卵巢切除大鼠膽固醇代謝的影響。

5、　　研究結(jié)果：雙側(cè)卵巢切手術(shù)能顯著增加大鼠血漿中TC、TG濃度和肝臟總膽固醇濃度，另外，肝臟組織中脂肪滴積聚明顯。然而，卵巢切除大鼠中，在飼料中添加辣椒素或灌胃植物乳桿菌菌液均能降低大鼠血漿TC、L DLC、T G和肝臟膽固醇濃度，阻止大鼠肝臟組織中脂肪滴的積聚。其中，單獨(dú)喂養(yǎng)辣椒素分別使大鼠血漿TC、TG含量顯著降低22.81％、8.93%（P＜0.05），肝臟膽固醇含量降低28.02%；單獨(dú)灌胃植物乳桿菌大鼠血漿TC、TG和肝臟膽固

6、醇含量均有降低但無(wú)顯著性變化（P＞0.05）；而二者結(jié)合同時(shí)作用時(shí)，大鼠血漿TC、TG含量顯著降低24.45%，21.43%，且肝臟組織中脂肪滴堆積明顯減輕。這些數(shù)據(jù)表明，辣椒素與植物乳桿菌結(jié)合阻止由雌激素缺乏引發(fā)的高膽固醇血癥效果優(yōu)于單獨(dú)喂養(yǎng)辣椒素或單獨(dú)灌胃植物乳桿菌。辣椒素與植物乳桿菌結(jié)合能顯著上調(diào)卵巢切除大鼠肝臟中CYP7A1 mRNA及蛋白的表達(dá)，顯著下調(diào)HMG-CoA還原酶、FXR和回腸中ASBT和IBABPmRNA及蛋白及的

7、表達(dá)，并且能增加小腸內(nèi)容和糞便中總膽汁酸、糞便中中性固醇的含量（P＜0.05）。辣椒素與植物乳桿菌結(jié)合降低機(jī)體膽固醇的機(jī)制可能是：通過(guò)調(diào)控相關(guān)基因促進(jìn)肝臟中膽固醇合成膽汁酸，同時(shí)促進(jìn)膽汁酸和中性固醇通過(guò)糞便排泄。
　　2.辣椒素與植物乳桿菌在體外結(jié)合降膽固醇的效果
　　為探討辣椒素與植物乳桿菌結(jié)合降膽固醇的機(jī)理，采用體外培養(yǎng)方法進(jìn)行試驗(yàn)。植物乳桿菌菌種活化后，選出降膽固醇率最大的植物乳桿菌添加量，用最大的植物乳桿菌添加量找出

8、其耐受辣椒素的最大辣椒素濃度，在植物乳桿菌耐受辣椒素的濃度范圍內(nèi)研究不同濃度水平的辣椒素溶液與植物乳桿菌結(jié)合對(duì)膽酸釋放、膽鹽與膽固醇共沉淀、菌體細(xì)胞吸收同化和細(xì)胞膜吸附膽固醇能力的影響。
　　研究結(jié)果：植物乳桿菌耐受辣椒素的最高辣椒素質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL。在植物乳桿菌能耐受辣椒素的濃度范圍內(nèi)，隨著培養(yǎng)基中辣椒素濃度的不斷增大，植物乳桿菌釋放膽酸的能力下降，對(duì)膽固醇沉淀量和菌體細(xì)胞吸收量均降低，但細(xì)胞膜吸附膽固醇量卻增加。說(shuō)

9、明，辣椒素與植物乳桿菌體外結(jié)合，辣椒素抑制了植物乳桿菌降膽固醇的能力，也從側(cè)面證實(shí)，辣椒素與植物乳桿菌在動(dòng)物體內(nèi)聯(lián)合降膽固醇機(jī)理不是通過(guò)辣椒素與植物乳桿菌相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
　　3.植物乳桿菌與辣椒素對(duì)卵巢切除大鼠腸道環(huán)境的影響
　　主要探討辣椒素與植物乳桿菌對(duì)卵巢切除大鼠腸道環(huán)境的影響，分析其與降大鼠膽固醇的相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)方法同1.。
　　研究結(jié)果：與sham組相比，雙側(cè)卵巢切除使大鼠盲腸pH值、游離氨含量顯著增加，腸

10、道組織絨毛長(zhǎng)度、隱窩深度顯著減小。在卵巢切除大鼠中，單獨(dú)喂養(yǎng)辣椒素顯著增加大鼠盲腸內(nèi)游離氨含量，同時(shí)，一定程度損傷腸道壁組織，使組織絨毛長(zhǎng)度變短且稀疏；單獨(dú)灌胃植物乳桿菌，或辣椒素與植物乳桿菌結(jié)合均能顯著增加大鼠盲腸總短鏈脂肪酸含量，顯著降低pH值，一定程度減少游離氨含量和含水量。單獨(dú)灌胃植物乳桿菌使大鼠腸道組織絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度顯著增加。卵巢切除手術(shù)降低了大鼠盲腸腸道菌群的多樣性，增大了擬桿菌門和厚壁菌門的比率，減少了有益群菌的含量。