成束狀阿拉伯半乳糖蛋白(FLA)家族基因在桃果實采后貯藏期間的表達分析.pdf

1、桃果實因其濃郁的香味、柔軟多汁的口感，以及豐富的營養(yǎng)深受消費者的喜愛。桃果實為典型的呼吸躍變型果實，采后在常溫下迅速進入呼吸和乙烯高峰，從而加速衰老和軟化，極易受到機械損傷和病原微生物侵染而導致大量腐爛。低溫冷藏是抑制桃果實采后呼吸代謝進、延長貨架期的有效手段。然而，桃果實又屬于冷敏性果實，低溫貯藏環(huán)境會導致果實冷害的發(fā)生，主要表現(xiàn)為出汁率下降、果肉絮敗、果心褐變等不良性狀。成束狀阿拉伯半乳糖蛋白（FLA）作為一類與細胞壁結構相關的糖蛋

2、白，與果實軟化之間的聯(lián)系及其作用還不清楚。為此，本研究以“湖景蜜露”桃果實為試材，鑒定了12個假定的FLA家族成員，并對它們進行了生物信息學分析，測定了這些成員在桃生長發(fā)育組織中的表達；分析了褪黑素處理后的桃果實細胞壁果膠中性糖的組成變化，從細胞壁代謝的層面揭示了褪黑素緩解冷害的機理；研究了外源乙烯和ABA處理對FLA成員在桃果實成熟期間的表達影響，以期為闡明果實軟化的分子調(diào)控機制提供新的視角。研究結果如下：
　　（1）成束狀阿拉

3、伯半乳糖蛋白（FLA）是阿拉伯半乳糖蛋白（AGP）大家族中的亞族，含有阿拉伯半乳糖糖基化區(qū)域和假定的成束域（FAS）。從桃基因組數(shù)據(jù)庫篩選出了12個假定的FLA序列，對這12個 FLA的蛋白結構進行分析，結果顯示PpFLA7不具有特定的阿拉伯糖或半乳糖糖基化位點，不屬于典型的FLA家族。PpFLA6的氨基酸組成和保守域的分布與其它成員相比差別較大。聚類分析結果表明PpFLAs家族可以分為CladeⅠ，CladeⅡ，CladeⅢ三類。利用

4、熒光定量PCR（qPCR）對不同組織和成熟階段桃果實進行表達分析，發(fā)現(xiàn)各個成員在不同時期的桃組織中差異化表達。其中，PpFLA4在桃果實成熟階段顯著上調(diào)表達，暗示了它可能在桃果實的成熟階段扮演重要角色。
　　（2）低溫貯藏下的桃果實在經(jīng)過褪黑素處理后質(zhì)地特性發(fā)生了改變，其中包括果實硬度、內(nèi)聚力和粘附力，出汁率得到了明顯提升。中性糖（阿拉伯糖和半乳糖）的流失現(xiàn)象出現(xiàn)在貯藏第7天桃果實CDTA溶性和Na2CO3溶性的果膠組分中，分支程

5、度明顯下降，但在貯藏第21天這一現(xiàn)象得到了改善。原子力顯微鏡結果顯示處理組桃果實果膠多糖的鏈寬集中在較小的區(qū)間，表明處理組中果膠的降解更為嚴重。FLA家族成員在褪黑素處理的桃果實貯藏后期呈現(xiàn)一致的上調(diào)表達，暗示它們響應了褪黑素誘導下的果實軟化，可能起到保護細胞壁結構不被過快分解的作用。
　　（3）外源乙烯和ABA處理上調(diào)了常溫貯藏桃果實中PpFLA2、PpFLA4、PpFLA5、PpFLA6、PpFLA8的表達水平，表明FLA部分