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1、近年來,天然有機(jī)類護(hù)膚品尤其是發(fā)酵類護(hù)膚品,因其安全性高、低刺激的親膚特性而風(fēng)靡市場(chǎng),酵母作為一種天然、安全、營(yíng)養(yǎng)、高效的活性有機(jī)物而受到高度關(guān)注。本課題采用生物酶解技術(shù)與酵母RNA提取純化技術(shù)相結(jié)合的有效原理,建立了可用于產(chǎn)業(yè)化推廣的一體化提取技術(shù),即從新鮮釀酒酵母細(xì)胞中同時(shí)提取酵母RNA、酵母β-葡聚糖及生產(chǎn)酵母提取物,并對(duì)產(chǎn)品的理化性質(zhì)和加工特性進(jìn)行了測(cè)定。
本研究主要內(nèi)容包括:⑴酵母破壁采用誘導(dǎo)自溶的方法,在破壞酵母壁
2、結(jié)構(gòu)的同時(shí),鈍化內(nèi)源核酸酶活力,確保酵母核酸的完整性。破壁后的酵母乳液通過單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化酶解工藝,最終確定最佳工藝為:pH值6.5、溫度60℃,添加1.5‰復(fù)合蛋白酶和2.0‰風(fēng)味蛋白酶,酶解24h。在此條件下,氨基氮轉(zhuǎn)化率和酶解收率分別達(dá)到55.68%和62.87%。經(jīng)成分測(cè)定,產(chǎn)品中小肽和氨基酸含量高達(dá)90.69%,游離氨基酸含量達(dá)25.68%;NaCl<0.3%,比國(guó)內(nèi)同類酵母提取物產(chǎn)品低72%;不溶性固形物含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于《酵
3、母抽提物》國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中純品型≤2.0%的要求,產(chǎn)品具有高溶解性。⑵采用中溫淡鹽工藝從酵母酶解產(chǎn)物中提取酵母RNA,以酵母RNA的純度、含量和收率為指標(biāo),通過單因素和正交試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝,最終確定最佳工藝為:酶解清液濃度20%、提取溫度12℃、pH2.4、徑高比為1:2.8的條件下提取16h。在此條件下,可得到酵母RNA含量為93.28%,得率81.84%,OD260/OD280比值為2.033。與傳統(tǒng)高溫濃鹽工藝對(duì)比,新工藝用鹽量和用堿量
4、大大降低,減少了廢液排放,而且提取的酵母RNA收率和含量分別提高了18.52%和10.37%,產(chǎn)品純度較好。⑶酵母酶解提取后余下的酵母細(xì)胞壁,采用生物酶-稀堿法提取酵母β-葡聚糖,通過單因素和均勻試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝,最終確定最佳除雜工藝為:溫度60℃、pH值7.0的條件下加入2‰的37071酶提取6h后,降溫至55℃,用稀堿溶液pH值調(diào)至9.0,加入2‰堿性蛋白酶提取8h;最佳提純工藝為:2%NaOH溶液、溫度80℃的條件下提取細(xì)胞壁2h
5、后,于pH值5.0,溫度70℃的條件下反應(yīng)2h。提純后得到酵母β-葡聚糖83.2%。⑷用酶增溶法獲得水溶性酵母β-葡聚糖,所制得的水溶性葡聚糖得率可達(dá)48.67%。在葡聚糖濃度為0.5%時(shí),溶解性可達(dá)到96.84%,這表明水溶性葡聚糖產(chǎn)品溶解性良好。⑸經(jīng)產(chǎn)品性能測(cè)試,3%酵母提取物具備良好的鎖水保濕功效和美白效果。改性后的水溶性酵母β-葡聚糖具有較強(qiáng)的吸濕性能和保濕性能:在濕度54%條件下24h后的吸水率為8.29%,與甘油相當(dāng);在濕度
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