褐藻膠寡糖的高效毛細(xì)管電泳分離分析方法的研究.pdf

1、褐藻膠寡糖是由β-1,4-D-甘露糖醛酸(M)和α-1,4-L-古羅糖醛酸(G)兩種單體通過1-4糖苷鍵連接而成的海洋酸性寡糖,具有抗病毒、增強(qiáng)免疫功能、抗腫瘤及抗炎等生物活性,與內(nèi)源性糖鏈中的許多結(jié)構(gòu)有相似之處,有著巨大的開發(fā)潛力.該論文首次利用高效毛細(xì)管電泳中的區(qū)帶電泳,進(jìn)行了褐藻膠寡糖的高效毛細(xì)管電泳分離分析方法研究.酶降解的褐藻膠寡糖在非還原端碳4,5位形成雙鍵與碳6位羧基中的羰基共軛,在235nm處具有特征紫外吸收.該論文采用

2、235nm的紫外光直接進(jìn)行檢測,進(jìn)行了酶降解褐藻膠寡糖的高效毛細(xì)管電泳分離分析方法的研究.優(yōu)化了電泳條件,實(shí)現(xiàn)了高效分離.酶降解的褐藻膠寡糖與酶解寡糖不同,在碳4,5位沒有形成雙鍵,沒有紫外吸收特征,也沒有熒光發(fā)光基團(tuán),對其進(jìn)行分析檢測比較困難.利用柱前衍生技術(shù),與衍生試劑8-氨基芘-1,3,6-三磺酸鈉(APTS)反應(yīng),引入熒光基團(tuán),采用毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測方法,建立了標(biāo)準(zhǔn)褐藻膠寡糖的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光檢測分離分析方法.

3、優(yōu)化了衍生條件,并考察了電泳緩沖液介質(zhì)、濃度、pH值、工作電壓及分離溫度對寡糖-APTS衍生物分離的影響,實(shí)現(xiàn)了酸降解褐藻膠寡糖的高效分離,檢測限達(dá)到了10<'-17>mol水平,確定了標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍.同時(shí)應(yīng)用該分析方法對褐藻膠的水解產(chǎn)物進(jìn)行了分離分析,檢測了聚甘露糖醛酸和聚古羅糖醛酸的酸降解產(chǎn)物,進(jìn)行了褐藻膠全水解產(chǎn)物M/G比值的測定,都獲得了良好的分離分析效果.褐藻膠寡糖是酸性寡糖,其電泳條件和電泳行為與文獻(xiàn)報(bào)道的中性糖有不同之