小肽、糖類的毛細(xì)管電泳分離研究.pdf

1、毛細(xì)管電泳(CE)是在電泳技術(shù)和色譜技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種分離技術(shù)，它具有快速、高效、樣品用量少的特點，能用于多種化合物的分離，如氨基酸、肽、蛋白質(zhì)、甚至整個細(xì)胞和病毒顆粒，顯示了其獨(dú)有的優(yōu)勢。此外，毛細(xì)管電泳的分離模式靈活多變，方法較為容易，而且操作費(fèi)用低。 毛細(xì)管電泳的分支--非水毛細(xì)管電泳(nonaqueouscapillaryelectrophoresis，NACE)，具有毛細(xì)管電泳的優(yōu)點，相對于水相毛細(xì)管電泳，擁有

2、自己獨(dú)特的特點與優(yōu)勢。其研究范圍逐漸擴(kuò)大，包括多肽、無機(jī)離子、聚糖、中性物質(zhì)、其代謝物的分離等，涵蓋了分析應(yīng)用和基礎(chǔ)研究兩個方面。由于很多非水溶液的物理性質(zhì)還不很清楚，并且有機(jī)試劑的數(shù)目繁多，這些問題給試劑的選擇帶來一定的困難。今后一段時間研究重點應(yīng)該是對溶劑系統(tǒng)選擇的規(guī)律和優(yōu)化方法的研究。 糖廣泛存在于自然界和生物體中，一直以來人們認(rèn)為糖主要是提供能量，但是新興的糖生物化學(xué)研究表明糖類物質(zhì)還有其它多方面的生物活性與功能。多肽是

3、生命科學(xué)中重要的生物大分子物質(zhì)，是生物體實現(xiàn)其功能的物質(zhì)基礎(chǔ)。多肽、糖類是生命有機(jī)體的重要組成部分，研究其毛細(xì)管電泳分離對醫(yī)藥、生物、食品、衛(wèi)生等領(lǐng)域具有重要意義。 目前，紫外檢測仍是CE中最常用的檢測手段，對于肽類和糖類大多數(shù)沒有或只有微弱的紫外吸收，直接紫外檢測滿足不了低含量組分測定的要求，化學(xué)衍生化法應(yīng)運(yùn)而生。本文采用實驗室自行合成的新型衍生化試劑，改變被測化合物的特性，進(jìn)行了肽類物質(zhì)和糖類物質(zhì)的毛細(xì)管電泳分離，結(jié)果令人滿

4、意。 論文分三章： 第一章 簡單介紹了毛細(xì)管電泳的發(fā)展及其在醫(yī)學(xué)藥物、生命科學(xué)、生物技術(shù)、法醫(yī)科學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用，并對CE分離被分析物的策略及相關(guān)基礎(chǔ)知識進(jìn)行了闡述。 第二章 非水毛細(xì)管電泳對小肽衍生物的分離研究，包括兩部分： 2.1采用咔唑-9-乙基氯甲酸酯(CEOC)作為柱前衍生試劑，采用乙酸-乙酸銨為電解質(zhì)，甲醇和乙腈混合液為有機(jī)溶劑對小肽衍生物進(jìn)行了分離，實現(xiàn)了4種小肽的基線分離。

5、 2.2采用新型衍生試劑2-(11H-苯[a]咔唑)乙基氯甲酸酯(BCEC-C1)作為柱前衍生試劑，在甲醇和乙腈為溶劑，乙酸-乙酸銨為緩沖體系，毛細(xì)管毛細(xì)管柱長58.5cm(有效長度50cm)，20℃，30kV，壓力進(jìn)樣8s，279nm二極管陣列檢測(DAD)條件下，采用非水毛細(xì)管電泳模式考察了小肽衍生物的分離條件，實現(xiàn)了5種小肽的基線分離。 第三章 以1-氨基蒽為衍生試劑，采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳模式考察并優(yōu)化了糖類衍