Rhodol類生物活性小分子熒光探針的構(gòu)建以及應(yīng)用研究.pdf

1、近年來熒光成像技術(shù)因其時(shí)間和空間分辨率好，操作安全、簡便已經(jīng)發(fā)展成為監(jiān)測各種生理過程中生物分子變化最重要的手段之一，而選擇光譜性能優(yōu)良的熒光分子對成像分析至關(guān)重要。本文從熒光分子結(jié)構(gòu)改進(jìn)入手，首次設(shè)計(jì)并合成了一種新型的Rhodol類熒光染料ROA，并以此為熒光團(tuán)設(shè)計(jì)合成了三種不同類型的熒光探針。研究內(nèi)容如下:
　　(1)以ROA為熒光骨架，設(shè)計(jì)合成了一種高選擇性次氯酸根熒光探針R0610。該探針分子由于碳氮雙鍵的異構(gòu)化作用熒光被猝

2、滅，而與次氯酸反應(yīng)之后，碳氮雙鍵被氧化、水解為甲?；悩?gòu)化作用消失，分子熒光顯著增強(qiáng)。利用這種熒光信號的變化，已將R0610成功應(yīng)用于活細(xì)胞及小鼠體內(nèi)外源性次氯酸根的檢測。
　　(2)首次用肼基修飾ROA上的甲酰基，合成了一種同時(shí)具有C=N雙鍵和聯(lián)氨基的氧雜蒽類次氯酸根熒光探針R0585。此探針實(shí)現(xiàn)了緩沖溶液測試體系中次氯酸的實(shí)時(shí)檢測，且不受其它活性氧類物質(zhì)的干擾。對其檢測機(jī)理進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)次氯酸首先作用于此分子的聯(lián)氨基團(tuán)，將其氧

3、化為重氮基后經(jīng)過分子內(nèi)質(zhì)子轉(zhuǎn)移形成一種穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)RON，并已經(jīng)通過核磁滴定與質(zhì)譜分析驗(yàn)證了此機(jī)理。這一設(shè)計(jì)策略也為次氯酸熒光探針的設(shè)計(jì)提供了一種新思路。
　　(3)以化合物ROA為母體，設(shè)計(jì)、合成了一種H2S熒光探針R0587。我們將Cu+與R0587絡(luò)合得到R0587-Cu2+，因Cu2+的順磁性效應(yīng)，R0587的熒光信號被猝滅。因?yàn)镃u2+與S2-之間具有更強(qiáng)的親和作用，所以我們利用S2-將配合物的Cu2+奪出，使得R0587