金黃色葡萄球菌壓電免疫傳感器檢測方法研究.pdf

1、金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在，因此污染食品的機(jī)會很多，由于金黃色葡萄球菌而引起的食物中毒事件屢見不鮮，僅次于大腸桿菌，此外，當(dāng)生長環(huán)境適宜時，金黃色葡萄球菌所產(chǎn)生的腸毒素也嚴(yán)重危害人類健康。而目前金黃色葡萄球菌檢測的主要方法是國標(biāo)中的平板計數(shù)法，其工作量大，操作繁瑣，且周期較長，需要3-5天。面對食品安全所受到的挑戰(zhàn)，亟需建立一種簡單、快速、靈敏、檢出限低的檢測方法。
　　本文建立了一種基于免疫反應(yīng)，利用壓電傳感器快速且靈敏的

2、檢測食品中金黃色葡萄球菌的方法。實驗中，將抗金黃色葡萄球菌的鼠單克隆抗體修飾在石英晶振金電極表面作為生物敏感元件，并通過借助金標(biāo)抗體達(dá)到對響應(yīng)信號進(jìn)行放大的目的，根據(jù)溶液中金黃色葡萄球菌含量的不同而引起的儀器響應(yīng)值的變化，便可以實現(xiàn)對金黃色葡萄球菌的檢測。
　　實驗結(jié)果表明，在適宜條件下，選取pH5.0的醋酸-醋酸鈉緩沖溶液作為偶聯(lián)緩沖溶液將鼠單抗?jié)舛认♂屩?.30μg/μL修飾在石英晶振金電極表面;采用粒徑為30nm的膠體金顆粒

3、，最適pH為8.5，最適抗體固定量為1 mL膠體金溶液固定42μg的兔抗，以此制得的金標(biāo)抗體作為儀器響應(yīng)信號放大的材料;以磷酸鹽吐溫緩沖溶液(PBST)作為背景溶液，以60μL/min作為進(jìn)樣速度，對不同濃度的金黃色葡萄球菌進(jìn)行檢測，在菌體濃度為2.1×102-2.1×105 CFU/mL時，菌體濃度與儀器的響應(yīng)值(△F，Hz)呈良好的線性相關(guān)，檢出限為22 CFU/mL，對于單個樣品的檢測20 min即可完成。在特異性實驗中，該電極對