pdgf-b與il-1α對大鼠動脈平滑肌細胞mmp-1mrna表達影響的實驗研究

1、8 9 8f 1 {箜 苤查o 0生 9箜鲞 箜—C h i nJ — N e u r o m e d , S e p t e m b e r2 0 0 5 , V o l4 , N o ． 9P D G F — B與 I L 一 1對大 鼠動脈平滑肌細胞 MMP 一 1mR N A表達影響的實驗研究 劉兵 浦佩 玉 張建 寧 高永 中【 摘要 】目的 探討 【 0 【 小板源件生 長【子 一 B ( P DG F — B ) 與 白

2、介素 一 l e ~ ( I L — l) 對動脈平滑肌 細胞 基 質(zhì)金 屬 蛋 n酶 ( MMP ) ． 1 、 2及 基 質(zhì) 金 屬 蛋 白 酶 的組 織 抑 制 因 子 ( T I MP ) 一 l 表 達 的影 響 。方 法 通 過 R T ． P C R 方 法 ．研 究 體 外 原 代 培 養(yǎng) 的 大 鼠 主 動 脈 平 滑 肌 細 胞 存 使 用 P D G F — B 及 I L — l的 情 況 下 ，MMP — l

3、、 2及 T I MP ． 1mR NA 表 達 的情 況 結(jié) 果 正 常 大 鼠 動 脈 平 滑 肌 細 胞 有 MMP 一 2與 T I MP - lmR NA 的 表 達 ， 但 沒 有 MMP — lmR NA 的 表 達 ． 單 獨 使 用 P DG F ． B 或 I L ． 1不 能 誘 導(dǎo) MMP - l的表 達 ，但 是 同時 使 用 即 可誘 導(dǎo) 其 表 達 結(jié) 論 存 病 理 情 況 下 ， P D G F —

4、 B 與 I L — l協(xié) 同 作 用 誘 導(dǎo) MMP — l 表 達 ， 降解 膠 原 蛋 白 ． 推 測 是 顱 內(nèi) 動 脈瘤 q - K塑 形 機 制 中 的重 要 途 徑 之 一 。【 關(guān)鍵詞 】顱 內(nèi)動脈瘤 ；媾質(zhì)金屬蛋白酶 ． 1 ；平滑肌細胞 ；血小板源性 生長因子 ． B；白介 素 一 l【 中圖分類號 】 R 3 9 2 ． 1【 文獻標識碼 】 A【 文章編號】1 6 7 l 一 8 9 2 5 ( 2 0 0 5

5、) 0 9 — 0 8 9 8 — 0 0 4Efe c t so fPDGF— Ba n dl L— lo nt h ee x p r e s s i o no fM M P一1m RNA i nt h ec u l t u r e da o r t as mo o t hmu s c l ec e l l so fr a t sL I UB i n g ,P Ul ' e i 一 ’ ¨ ．Z H A N GJ

6、i a n — n i n g ,G A0Y o n g — z h o n ~ D e p a r t m e n to fNe u r o s u r g e r y ， T i a nJ i nMe d i c a lU n i v e r s i t )Ge n e r a lHo s pi t a l ，T i a nJ i n3 0 0 0 5 2 ， C h i n a【 Ab s t r a c t 】 0b j e c

7、 t i v eT os t u d yt h ee f f e c t so f P DG F — Ba n dI L — lo nt h ee x p r e s s i o no f MMP 一 1 、 2a n dT I M P — li nt h ec u l t u r e da o r t as mo o t hmu s c l ec e l l so fr a t s ．M e t h o d sT h es mo o

8、t hmu s c l ec e l l so fr a ta o r t aa r t e r ywe r ep r i ma r il yc u l t u r e da n dt h ee f f e c t so fP DGF — B a n dI L - 1o nt h ee x p r e s s i o no fMM P - 1 、 2a n dT I M P 一 1mR NA we r ed e t e r m i

9、n e db yR T— P CR．Re s u l t s T h ea o r t as mo o t hmu s c l ec e l l sc a ns e c r e t eM M P - 2a n dTI M P - 1wi t h o u tP DGF— Ba n dI L— l． b u tn oM M P - 1 ． Ne i t h e rP DGF — Bn o rI L 一 1aa l o n ei n d u

10、c e st h ee x p r e s s i o no fM M P 一 1i nt h ea o r t as mo o t hmu s c l ec e l l s ， h o we v e r ， P DGF — B c a ni n d u c et h ee x p r e s s i o no fMM P - 1s y n e r g i s t i c a l l ywi t hI L— l．Co n c l u

11、s i o nP DGF— Bi sa b l et oi n d u c et h ee x p r e s s i o no fM MP 一 1s y n e r g i s t i c a l l ywi t hI L — lf o rd e g r a d a t i o no ft h ee x t r a c e l l u l a rma t r ixo nt h ea r t e r i a lwa l 1 ． t h

12、i sma y b eo n ep o s s i b l eme c h a n i s m o nt h ep a t h o g e n e s i so fi n t r a c r a n i a la n e u r y s ms ．【 Ke ywo r d s 】I n t r a c r a n i a la n e u r y s m；Ma t r i xme t a l l o p r o t e i n a s

13、e 一 1 ；S mo o t hmu s c l ec e l l ；P DGF ． B：I L ． 1血 管 塑 形( v a s c u l a rr e mo d e l i n g ) 是 指 血 管 在 長 期 血流應(yīng) 力作用 下 為適 應(yīng) 血 流應(yīng) 力變 化而 產(chǎn) 生 的一 種 血管形 態(tài) 和( 或 ) 管壁 結(jié) 構(gòu) 的改 變 ， 包括 管腔 的增 大或 減小 ， 管 壁 的肥厚 或變 薄 ， 內(nèi)膜增生 等 ： 其 中至少

14、 涉及 四種病 理生 理過程 ， 包括 細胞 生長 、 細胞 死亡 、 細胞 遷 移 與細胞 外 基質(zhì) 的 生成 與 降解 ： 是血 流 應(yīng)力 、 血管 活 性 因子及 局部 生成 的生 長 因子 相互作 用 的結(jié) 果 ； 是 高血 壓 、 動 脈粥 樣硬 化 、 動 脈狹 窄 、 動靜 脈 畸形 、 動脈 瘤等 多種血 管性疾 病 發(fā)生 的病理 生理 基礎(chǔ) 基 質(zhì) 金 屬 蛋 白 酶 ( ma t r i xme t a l l o

15、D r o t e i n a s e ，MMP ) 是細 胞 外基 質(zhì)降 解 的最 主要 岡素 ． 可被 多 種 細 作 者 他 ： 3 0 0 0 5 2天 津 ， 滅 津 醫(yī) 科 大 學(xué) 總 醫(yī) 院 神 經(jīng) 外 科 ． 天 津 市 神經(jīng) 病 學(xué) 研 究 所 基 礎(chǔ) 研 究 ·胞 包括 平滑 肌細胞 、 內(nèi)皮細 胞等 以非 活性 的酶原 形式 合 成 分 泌 ， 其 活性 在 三 個水 平 ( 轉(zhuǎn) 錄 、 酶 原 的激 活

16、 、 蛋 白溶解 活性 的抑 制) 上 受 多種 因素 調(diào)控 。本 實 驗探討 了血 小板 源性 生長 因子 ． B ( P D GF — B 1及 白介素 一 l( I L — l) 對 原代 培養(yǎng) 的大 鼠動脈平 滑 肌細 胞 MMP — l 、 2及 基 質(zhì)金 屬蛋 白酶 的組 織 抑制 因子 ( t i s s u ei n h i b i t o r o fma t r i xme t a l l o p r o t e i

17、n a s e ， T I MP ) 一 l 在 轉(zhuǎn) 錄水 平 上 表 達 的影 響 材 料 與 方 法 一、 大 鼠動脈平 滑肌 細胞 的原 代培 養(yǎng) Wi s t a r 大 鼠 ， 雌 性 ， 體 重 約 1 5 0g 。在 嚴 格 的無 菌 條件 下 ， 取 出胸 腹 主 動脈 ， 放 人 D — H a n k ’ s 液 中 ， 剝 離 外膜 ，剪 開動 脈 ，用 刀 片輕 巧 地刮 除 內(nèi)膜 ．在盛 有 維普資訊 http

18、://www.cqvip.com #I 、 、． r2 0 0 5I1{4 芒 ：qm -( h m lN e m0 r n c t l ， S e p t e m b ~ ： r2 0 O 5V4No9一 ^． ¨ 一 i i , 2 I i nI7 6 2h p l ： 『 IM P - 2[ 4 h5h p l ： L：]I MI 。 一 【 I 2 5Ib p } ．I )M ： ma r k er ． 一 ^ I1

19、j - r～ l lJr 》2 0 05 1 I Ol _I ( ) l K I2l l ( ¨ l】 ： 1J I ’ I ‘ ．2II j II 。 I ) ( i F ． 『 j ： j1 ￡ I I II 【 1 - 、 4I ^ I ， 【 ) ( ； Fl ；I凰 3R¨ - l ’ 【R． 。 』F i ~ _ tR c s ~ d t s i J IRI - J(R』f l 冬 『l( 。 ) 弛

20、圣化 ' 0 2， J 、 ‘ )“ 1．I I 胞 n — a c t i n乜 ?( 『2 ) ．五‘ 卜計 ? L 圳也 ．噬 達 到 ’犄- ' R (g。Rl №I9 5 ' ! i ， J。、P D GF — B ‘I L 一 】 n 州 - ' d jl J’ F 卅 I 1 ／ 【f i l幢 M P — 1MB , ． I P - 2T 【 M P — lt uRN1 、舊 ll參—

21、 a c f i n的 P c『 {。 枸 J溥 繁-r {l ! JJ 睛 世{ = = !帶 均 J 敏 (3 A)、 J J i [J他 Z J l lP DGFB、 fl L 一 1l ” j I 1 , 1lP D GF - B 取 1I L — liq攬 卜仃 MM P 一 2 (3B ) 腱 r 】 MP 一 ? { f3(JI 1 1 RNA 岫 『．圳地fJ J l [ P D G F} {^ cJ L ．n。 J

22、l 、均 術(shù)MMP — lmRNA 舊 l．f芝 ／ I - h d時 J J l 『P DGF — B 墟 l L — l “ f I t Jfl f JMMP — In l R NAf點 If l 割 3DI『 i 4 -0t 也j．父． f 。 』 t l _ ¨ l l l I Jn 0討 論 f l 麗 刈 l脈 墑 晌 怕 I躚l j ． j { _ J L仍 1I 之 f 肌 呲 c ll 上 J lI

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24、 I ?J 能 t ∞ 遺 傳 索 MMP 昆 · 圳 擇 硎依 幘 r j的 賃 I【 溶 耕 似 ． 1 I _ 做’f川 【 糾 I 旰 世Jl身 l 1J I { grlJ 趕 技4 尚 川l l l虻 r fIz l釧 l 地f I JJ I f 業(yè)嵌： 疆 剃圳 地以一． 腑 形 ℃ ☆ 『 戊泌 ， f ． 出J 山 能 址降 解 糊 呲 l 1 l 符 蜷 { 膽 外 甚質(zhì) 舊 賃、 姻塹 『 l 羊 &

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27、MP — l 的 州 l 仃參 ‘r 管 站 締 Ⅲ ： 的 正 常 際 f ℃ i f I } ． 從 l i lJ持 動 脈 n 0 i 1 常 ．佝 i彤 志 ． 1MMP — IIJ 能 外 、 棼 。 ·I - * ' 1 {z 卉，? 精 忠 i發(fā) ： 作 j 1 I瑚 肺 壁 0 膠堂 lf 上』珊 、型 膠 原 蛋 I 。 I 掏 成 u l膠 r I 垃 動 脈 蛙 抗 忭 能 的 上