二甲雙胍抵抗線粒體氧化損傷延緩貢氏假鰓鳉衰老的機理研究.pdf

1、衰老是一個復(fù)雜的生理過程，衰老過程中常常會伴隨機體功能的下降，并發(fā)生許多衰老相關(guān)的疾病。隨著對衰老研究的深入，發(fā)現(xiàn)了一些衰老的生物標(biāo)記，比如基因的不穩(wěn)定、線粒體功能紊亂以及氧化應(yīng)激等。根據(jù)氧化應(yīng)激理論，活性氧（ROS）水平的升高會對一些生物大分子以及線粒體造成損傷，從而引起衰老。假鰓鳉（Nothobranchius）是一種生長在東非的硬骨魚，具有壽命短、繁殖速度快等優(yōu)點，正在成為一種衰老研究的新興動物模型。二甲雙胍（Metformin）

2、是從山羊豆中發(fā)現(xiàn)的胍類物質(zhì)衍生而來，是目前使用最廣的Ⅱ型糖尿病的治療藥物，在很多模式動物中具有延緩衰老延長壽命的作用，能夠調(diào)節(jié)代謝以及線粒體的功能。在細(xì)胞中已經(jīng)證實二甲雙胍能夠激活A(yù)MPK和SIRT1，而AMPK能夠通過磷酸化PGC-1α與FoxO3a來發(fā)揮促進(jìn)線粒體生物發(fā)生、下調(diào)ROS水平并維持氧化還原平衡的作用；SIRT1是一種去乙?；?，與衰老相關(guān)，能夠去乙?；疨GC-1α與FoxO3a。本文利用貢氏假鰓鳉來進(jìn)一步研究其中的機理。

3、我們通過對肝臟組織結(jié)構(gòu)和超微結(jié)構(gòu)、肝臟線粒體膜電位、氧化應(yīng)激指標(biāo)以及相關(guān)蛋白表達(dá)的檢測，來探究二甲雙胍是否通過抵抗氧化損傷來延緩貢氏假鰓鳉的衰老。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴與6月齡相比，9月齡貢氏假鰓鳉肝臟組織結(jié)構(gòu)出現(xiàn)了肝細(xì)胞形態(tài)改變、細(xì)胞板排列紊亂以及肝血竇減少的現(xiàn)象，等到12月齡，則出現(xiàn)細(xì)胞核變大、炎性細(xì)胞浸潤和肝細(xì)胞空泡化的現(xiàn)象，二甲雙胍處理減緩了貢氏假鰓鳉肝臟組織結(jié)構(gòu)隨年齡增加的衰退；9月齡貢氏假鰓鳉肝臟超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)了線

4、粒體數(shù)量減少，脂滴增加等現(xiàn)象，二甲雙胍處理則改善了9月齡肝臟超微結(jié)構(gòu)。⑵隨著衰老的進(jìn)程，貢氏假鰓鳉肝臟線粒體膜電位顯著下降，體內(nèi)ROS水平、蛋白氧化和脂質(zhì)過氧化程度明顯升高；經(jīng)過二甲雙胍長期飼喂，肝臟線粒體膜電位顯著升高，氧化應(yīng)激程度降低。⑶對12月齡貢氏假鰓鳉肝臟中AMPK、SIRT1、PGC-1α和FoxO3a蛋白表達(dá)的免疫組化染色分析，結(jié)果顯示：二甲雙胍處理上調(diào)了老年貢氏假鰓鳉肝臟中氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白的表達(dá)。⑷二甲雙胍減緩了貢氏假鰓