豚鼠耳蝸deiters39;細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究

1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文豚鼠耳蝸Deiters'細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究姓名：戴陳凱申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師：孔維佳;楊成章2003.3.1畢中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院 碩士學(xué)位論文D e i t e r s ’細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究中文摘要& ≥；1i 6R 哆6 y ；【第一部分目的：探討分離單離D e i t e r s ’細(xì)胞的方法及活性判定標(biāo)準(zhǔn)。f 方法：分別用膠原酶，木瓜蛋白酶和胰蛋白酶消化基底膜后結(jié)合機(jī)械吹打分

2、離出D e i t e r s ’細(xì)胞，觀察并計(jì)數(shù)。結(jié)果：單離的D e i t e r s ’細(xì)胞呈豆點(diǎn)狀，分胞體，柄，指突三部分，平均每雙側(cè)耳可分離到2 0 ～3 2 個(gè)單離的D e i t e r s ’細(xì)胞．活性標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)胞膜光滑雙折射現(xiàn)象存在，細(xì)胞無水腫，細(xì)胞核位置正常，指突完整，無呈布朗運(yùn)動(dòng)的顆粒。∥結(jié)論：三種常用的酶孵育后結(jié)合吹打法均可以分離出相當(dāng)數(shù)量且具有活性保存較好的單離D e i t e r s ’細(xì)胞：標(biāo)準(zhǔn)可靠。關(guān)鍵詞

3、耳蝸D e i t e r s ’細(xì)胞第二部分目的：研究三磷酸腺苷( a d e n o s i n e t r i p h o s p h a t e ，A T P ) 介導(dǎo)的豚鼠耳蝸單離D e i t e r s ’細(xì)胞離子電流。／方法：應(yīng)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)，記錄不同的電壓對A T P 介導(dǎo)的離予電流的影響以及不同濃度的A T P 分別引出的離子電流。結(jié)果：A T P 介導(dǎo)的D e i t e r s ’細(xì)胞的離子電流呈電壓依賴性和

4、濃度依賴性，在1 0 m y 以下引出一個(gè)內(nèi)向電流，2 0 m y 以上引出一個(gè)外向電流，其反轉(zhuǎn)電位為8 + 0 ．1 7 m v ( n = 8 ) ，預(yù)加拮抗劑后，1 0 0 p m 的A T P 引出的內(nèi)向電流大幅度減小甚至消失。 膨結(jié)論：A T P 在D e i t e r s ’細(xì)胞介導(dǎo)的內(nèi)向電流是一種非選擇性的陽離子電流A T P 對D e i t e r s ’細(xì)胞的作用是電壓依賴性和濃度依賴性的。關(guān)鍵詞( D e i t