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文檔簡介
1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文草分支桿菌F.U.36對兒童急性白血病樹突狀細(xì)胞影響的研究姓名:葛云鵬申請學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):兒科學(xué)(小兒血液與腫瘤)指導(dǎo)教師:孫立榮20080607第二部分:草分支桿菌E U .3 6 對兒童急性白血病外周血樹突狀細(xì)胞影響的研究目的探討草分支桿菌E U .3 6 混懸注射液( 烏體林斯,U t i l i n ' s ,L I ) 對兒童急性白血病外周血樹突狀細(xì)胞( D C ) 數(shù)量及功能的影響。方法應(yīng)用F
2、 i c o l l .H y p a q u e 法分離急性白血病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞( P B M C ) ,對照組:r h G M .C S F + r h I I 廠4 + 刪F - a ( G I T ) 誘導(dǎo)培養(yǎng)D C ;實(shí)驗(yàn)組分為四組:單獨(dú)應(yīng)用U t i l i n 7 s 組( U ) 和G I T 聯(lián)合不同濃度的U t i l i n ' s 組( G I T U l ,0 .8 6 n g /m l :G 1
3、 T U 2 ,1 .7 2 n g /m l ;G I T U 3 ,2 .5 8 n g /m 1 ) 誘導(dǎo)培養(yǎng)D C ,區(qū)別是于培養(yǎng)第3 天分別加入不同濃度的U t i l i n ' s 。光學(xué)顯微鏡下每日觀察D C 的形態(tài),培養(yǎng)8 天后收獲D C ,而后將D C與兒童急性白血病異體外周血淋巴細(xì)胞混合反應(yīng)9 6 h 后觀察淋巴細(xì)胞的增殖情況,E L I S A 方法檢測上清中其I L - 1 2 、I F N - T 的
4、分泌情況;另將培養(yǎng)8 天后的H L - 6 0 抗原致敏后的D C 與已培養(yǎng)5 天淋巴細(xì)胞及H L - 6 0 細(xì)胞共孵育7 2 h ,觀察不同組別D C對淋巴細(xì)胞殺瘤作用影響的不同,M T I “ 法檢測其殺傷活性。結(jié)果培養(yǎng)8 天后,各組9 0 %以上的細(xì)胞表現(xiàn)出較為典型的樹突狀?;旌狭馨图?xì)胞反應(yīng)顯示:隨著刺激細(xì)胞的增加,T 細(xì)胞的擴(kuò)增指數(shù)明顯增加,P 均< O .0 5 ;實(shí)驗(yàn)各組其培養(yǎng)上清中I L - 1 2 、I F N
5、- T 的含量隨著U t i l i n ' s 濃度的增加,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P 均< 0 .0 5 ;殺瘤活性結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)各組與對照組殺傷活性比較差異均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,( t 分別為3 .0 0 7 8 、2 0 .3 5 3 2 、2 4 .8 5 4 2 、2 6 .9 6 8 6 ;P 均< 0 .0 5 ) :而且隨著U t i l i n ' s 濃度的增加,殺傷活性顯著增大,P 均&l
6、t; 0 .0 5 ,且均較單獨(dú)應(yīng)用U t i l i n 7 S 殺傷活性明顯增加,( t 分別為6 .5 9 5 9 、8 .9 0 4 9 、1 0 .5 3 4 5 ;P 均< 0 .0 5 ) 。結(jié)論U t i l i n ' s 誘導(dǎo)后的D C 一定程度上促進(jìn)T 細(xì)胞的增殖和分泌,且隨著其濃度的增加,作用進(jìn)一步增強(qiáng);T 細(xì)胞殺瘤活性隨著U t i l i I I ,S 濃度的增加逐步增強(qiáng)。在G I T聯(lián)合U t
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