兒童B系急性淋巴細(xì)胞白血病樹(shù)突狀細(xì)胞的檢測(cè)和體外培養(yǎng).pdf

1、目的：1）通過(guò)檢測(cè)B系急性淋巴細(xì)胞白血?。˙ lineage acute lymphoblasticleukemia，B-ALL）患兒治療前后體內(nèi)髓系DC（myeloid dendritic cells，mDC）和漿細(xì)胞樣DC（plasmacytoid DC，pDC）的比例，以便了解ALL患兒體內(nèi)DC亞群的水平并探討其與微小殘留?。╩inor residual disease，MRD）的關(guān)系，為今后應(yīng)用DC瘤苗清除MRD尋找合適的治療時(shí)

2、間點(diǎn)。2）通過(guò)體外培養(yǎng)B-ALL骨髓（bone marrow，BM）的單個(gè)核細(xì)胞（mononuclear cells，MNCs）得到ALL來(lái)源的DC，為體外制備具有抗白血病作用的DC奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 方法：1）選取B-ALL初診患兒35例，治療第33天的患兒20例，用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其外周血（peripheral blood，PB）和BM中CD11c+mDC和CD123+pDC的比例，同時(shí)定量監(jiān)測(cè)B-ALL患兒治療第33天的M

3、RD數(shù)量。2）選取B-ALL患兒12例，初診7例，完全緩解（complete remission，CR）5例。從其BM中分離出MNCs，在體外聯(lián)合不同細(xì)胞因子培養(yǎng)7-10天（初診者應(yīng)用CD40L+IL-4，CR者應(yīng)用IL-4+GM-CSF+TNF-a）。用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定免疫表型（CD1a、CD80、CD83、CD86、CCR7和HLA-DR），MTT法檢測(cè)混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)。
　　 結(jié)果：1）B-ALL初診

4、患兒PB和BM中CD123+DC、CD11c+DC比例顯著低于正常對(duì)照組（P<0.001）和治療第33天忠兒（P<0.01），治療第33天患兒PB中CD123+DC比例明顯低于正常對(duì)照組（Z一2.326，P=0.020）～同一患兒不同部位（PB和BM）檢測(cè)結(jié)果比較，初診時(shí)PB中DC的水平（無(wú)論CD123+DC還是CD123+DC）與BM中DC的水平具有顯著相關(guān)性，而治療第33天時(shí)兩者無(wú)顯著相關(guān)性，治療第33天時(shí)PB中CD123+DC的比

5、例明顯低于BM中（t=-2.539，P=0.02）；患兒治療第33天CD123+DC、CD11C+DC的水平與MRD無(wú)顯著相關(guān)性。2）11/12例B-ALL細(xì)胞體外培養(yǎng)后可見(jiàn)典型的DC樣細(xì)胞；這些細(xì)胞表達(dá)CD1a、CD80、CD83、CD86、HLA-DR和CCR7，且具有刺激同種異體淋巴細(xì)胞增殖的能力，隨DC數(shù)量的增加刺激作用逐漸增強(qiáng)。
　　 結(jié)論：1）B-ALL兒童初診時(shí)體內(nèi)兩類(lèi)：DC表達(dá)水平顯著下降，經(jīng)治療后水平明顯上升；