玉米zeamays.l中具有sorf的基因zm401和zm908的功能研究

1、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文玉米（Zea mays.L）中具有sORF的基因Zm401和Zm908的功能研究姓名：王冬雪申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：于靜娟20070601Z m 4 0 1 ，另一個(gè)克隆全長(zhǎng)1 8 2 2 b p ，命名為Z m 9 0 8 。采用5 ’R A C E 和R T - P C R 技術(shù)獲得了Z m 9 0 8c D N A 全長(zhǎng)( 1 2 5 6 b p ) ．序列分析表明z i n

2、9 0 8 由一個(gè)外顯子( 1 2 5 6 b p ) ，5 ’調(diào)控區(qū)( 2 2 9 b p ) 和3 ’非編碼區(qū)組成( 2 7 4 b p ) 。Z m 9 0 8 序列缺乏明顯的開放閱讀框，最長(zhǎng)的可能開放閱讀框編碼9 6 a a 。玉米基因組S o u t h e r n 雜交結(jié)果表明，2 m 9 0 8 基因以低拷貝存在于玉米基因組中．N o r t h e r n 雜交表明Z m 9 0 8 基因除了在葉片中有微量表達(dá)外，在花粉

3、不同發(fā)育時(shí)期有大量表達(dá)，在成熟花粉中表達(dá)量最高。Z r a 9 0 8 啟動(dòng)子片段與G U S 融合轉(zhuǎn)化煙草，對(duì)轉(zhuǎn)基因煙草的分析表明，Z m 9 0 8 啟動(dòng)子片段可以特異驅(qū)動(dòng)報(bào)告基因在轉(zhuǎn)基因煙草花粉中表達(dá)，與N o r t h e r n 雜交結(jié)果一致。為了研究Z m 9 0 8 基因的功能和作用形式，將最長(zhǎng)編碼框起始密碼子A T G 定點(diǎn)誘變和編碼框移碼誘交，利用C a M V 3 5 s 啟動(dòng)子，分別在煙草中異源表達(dá)Z m 9 0

4、 8 基因最長(zhǎng)編碼框和突變體。結(jié)果顯示，Z m 9 0 8 基因最長(zhǎng)編碼框異源表達(dá)導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因煙草小孢子母細(xì)胞減數(shù)分裂不同步，部分花粉粒干癟，不能正常積累內(nèi)容物，花粉育性下降，與Z m 9 0 8 全長(zhǎng)基因在煙草中異源表達(dá)產(chǎn)生的表型一致；而Z m 9 0 8 突變體的異源表達(dá)未影響煙草花粉發(fā)育和育性。以上研究結(jié)果表明，Z m 9 0 8基因可能與Z m 4 0 1 基因一樣，是通過(guò)最長(zhǎng)O R F 的9 6 a a 編碼產(chǎn)物參與花粉發(fā)育。關(guān)