燃煤細顆粒物不同組分對血管內(nèi)皮細胞ea.hy926細胞增殖及氧化損傷研究

1、山東大學碩士學位論文燃煤細顆粒物不同組分對血管內(nèi)皮細胞EA.hy926細胞增殖及氧化損傷研究姓名：劉芳盈申請學位級別：碩士專業(yè)：勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學指導教師：李杰；王菲菲20110524山東人學碩十學位論文l ：2 傳代，用含1 0 0 ／6 0 胎牛血清、1 ％雙抗的D M E M 培養(yǎng)液，在3 7 * ( 2 、5 ％C 0 2 條件下傳代培養(yǎng)至對數(shù)生長期。2 ．燃煤P M 2 ．5 采集及組分提取選擇大同散煤為樣煤，利用固定源稀釋

2、通道采集燃煤P M 2 ．5 ，超聲提取燃煤P M 2 ．5 全顆粒物和無機組分，索氏提取有機組分，并配制成1 0 0 、2 5 0 、5 0 0 、1 0 0 0 、2 0 0 0 g g ／m L 染毒母液，- 2 0 ℃保存?zhèn)溆谩? ．細胞毒性檢測采用M T S 法檢測燃煤P M 2 ．5 不同組分對E A ．h y 9 2 6 細胞毒性影響。根據(jù)預實驗結(jié)果，對人臍靜脈內(nèi)皮細胞E A ．h y 9 2 6 染毒2 4 h ，設置l

3、 O 、2 5 、5 0 、1 0 0 、2 0 0 9 9 ／m l五個劑量組，全顆粒物和無機組分以P B S 為溶劑對照，有機組分以D M S O 為溶劑對照，分別于染毒結(jié)束f i i i l 小時加入M T S ( 優(yōu)于M T T 的新型四唑化合物，檢測原理與M n ’相同) ，l 小時后用酶標儀測吸光度值( o D ) 。4 ．氧化損傷檢測將大同燃煤P M 2 ．5 不同組分對E A ．h y 9 2 6 進行染毒2 4 h ，

4、選擇氧化應激指標超氧化物歧化酶( S O D ) 、脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛( M D A ) 、谷胱甘肽過氧化物酶( G S H - P x ) 、過氧化氫酶( C A T ) 及炎性因子( N o ) 。按試劑盒要求用可見分光光度計測定細胞中氧化損傷指標的含量。研究結(jié)果1 燃煤P M 2 ．5 排放因子測定1 ．1 燃煤P M 2 ．5 可溶性離子含量捧放分析大同散煤燃燒排放P M 2 ．5 可溶性離子含量測定：S 0 4 2 ‘含量最