兩種體系中的15羥基十五烷酸甲酯酶催化合成環(huán)十五內(nèi)酯及動力學(xué)研究

1、分類號壘塑ZU D C博士學(xué)位論文密級兩種體系中的1 5 ．羥基十五烷酸甲酯酶催化合成環(huán)十五內(nèi)酯及動力學(xué)研究沈芳學(xué)科專業(yè) 化堂王苧指導(dǎo)教師 塞哇雄民數(shù)援論文答辯日期2 Q ! ! 生5 旦2 墨旦 學(xué)位授予日期2 Q ! ! 生魚旦2 三旦答辯委員會主席 韭題至數(shù)援論文評閱人兩種體系中的1 5 _ 羥基十五烷酸甲酯酶催化合成環(huán)十五內(nèi)酯及動力學(xué)研究摘要環(huán)十五內(nèi)酯屬于大環(huán)內(nèi)酯香料的一種，它在香水、精細化工品、食品等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。中國廣西特

2、產(chǎn)植物蒜頭果的油脂中含有5 0 ％的二十四碳．1 5 ．烯酸，它是合成麝香類香料一環(huán)十五內(nèi)酯的理想原料。很多化學(xué)方法已經(jīng)成功合成了環(huán)十五內(nèi)酯，但能耗大，反應(yīng)條件苛刻等缺點阻礙了其工業(yè)化生產(chǎn)。脂肪酶作為一種生物催化劑，在溫和的條件下具有高效、高選擇性及高特異性的催化作用，被廣泛應(yīng)用于有機合成、精細化工及食品加工等領(lǐng)域，有關(guān)脂肪酶催化合成大環(huán)內(nèi)酯方面的研究已有幾十年，但酶催化合成環(huán)十五內(nèi)酯的研究一直未受到關(guān)注。本文以自行篩選到的微生物產(chǎn)脂肪

3、酶，催化蒜頭果為原料制得1 5 ．羥基十五烷酸甲酯合成環(huán)十五內(nèi)酯。主要開展了五個方面的研究：( 1 ) 脂肪酶菌株的篩選及正交法優(yōu)化發(fā)酵條件；( 2 ) 將粗脂肪酶純化為層析純的酶；( 3 )酶催化動力學(xué)參數(shù)的求取及動力學(xué)方程的推導(dǎo)；( 4 ) 有機溶劑體系與水／有機溶劑兩相體系中酶催化反應(yīng)的對比及反應(yīng)條件的優(yōu)化；( 5 ) 兩種體系中酶催化反應(yīng)歷程的推斷。實驗篩選到1 0 株高產(chǎn)脂肪酶菌株，其中經(jīng)紫外誘變后的菌株C a n d i d

4、 as p ．G X U 0 8 ( 簡稱G X U 0 8 ) 對1 5 一羥基十五烷酸甲酯轉(zhuǎn)化為環(huán)十五內(nèi)酯具有良好的催化性能。通過正交試驗，得到菌株最佳培養(yǎng)基配方及發(fā)酵條件為：蔗糖0 ．5 ％，淀粉0 ．5 ％，蛋白胨1 ．5 ％，K 2 H P 0 4 0 ．0 5 ％，M g S 0 4 0 ．1 5 ％，( N H 4 ) 2 S 0 4 1 ％，茶油1 ．5 ％，菜籽油1 ．5 ％，p H = 8 ．5 ，發(fā)酵時間4 8h