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1、618史堡叁趁匿堂盤查至塑堡壘旦筮!墨鲞筮魚塑魚墮墜』匭堡幽:』鯉2鯉:型:!:盟Q:基礎(chǔ)研究胰島素樣生長(zhǎng)因子I對(duì)重癥急性胰腺炎大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞凋亡的影響王映珍王世文高寧孫志江賈曉冬呂苗【摘要】目的研究外源性胰島素樣生長(zhǎng)因子I(IGF工)對(duì)重癥急性胰腺炎(SAP)大鼠腸黏膜上皮細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因bax,bel2,caspase3mRNA表達(dá)的影響。方法72只雄性Wistar大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法分為假手術(shù)組(so組)、重癥急性胰腺
2、炎組(SAP組)、IGFI治療組(IGFI組)共三組。通過胰膽管逆行注射5%牛磺膽酸鈉制作大鼠SAP模型,S0組用同樣方法經(jīng)胰膽管逆行注射生理鹽水;IGFI組分別于術(shù)后30rain和術(shù)后3h經(jīng)后肢內(nèi)側(cè)皮下注射IGFI。各組動(dòng)物分別于術(shù)后6,12,24h處死8只,檢測(cè)血漿淀粉酶,TUNEL法檢測(cè)小腸黏膜上皮細(xì)胞凋亡,觀察小腸組織病理學(xué)變化并進(jìn)行病理評(píng)分,逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)法檢測(cè)小腸黏膜上皮細(xì)胞中bax,bcl2和caspas
3、e3mRNA的表達(dá)。數(shù)據(jù)采用SPSS110統(tǒng)計(jì)軟件分析,多組間比較采用單因素方差分析。結(jié)果IGFI治療組與SAP組各時(shí)相點(diǎn)相比,血漿淀粉酶和小腸病理評(píng)分均低于各相應(yīng)時(shí)相點(diǎn),于12h和24h差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,均P005,而在IGFI組各時(shí)相點(diǎn)的表達(dá)則明顯增強(qiáng)E6h:(o654007)VS(054004)v8(0574O06);12h:(069004)v8(056005)V8(053005);24h:(072005)v8(054007)VS
4、(058008),P005),但12和24h與SAP組相同時(shí)點(diǎn)相比則均顯著降低(P005)。22各組大鼠回腸組織電鏡檢查及既染色評(píng)分so組小腸上皮細(xì)胞間連接結(jié)構(gòu)完整,偶見凋亡細(xì)胞;SAP組腸上皮細(xì)胞問緊密連接基本正常,吸收細(xì)胞腫脹明顯,微絨毛紊亂、稀疏、長(zhǎng)短不一,同時(shí)可見明顯細(xì)胞凋亡及凋亡后壞死現(xiàn)象,表現(xiàn)為核沿細(xì)胞膜濃縮、染色質(zhì)凝集等核邊界現(xiàn)象,12h后微絨毛稀疏、脫落及線粒體腫脹更加明顯。經(jīng)IGFI治療后微絨毛雖較稀疏,但無明顯缺損,
5、吸收細(xì)胞腫脹明顯減輕,凋亡細(xì)胞數(shù)量亦明顯減少。小腸組織病理學(xué)評(píng)分顯示SAP組較So組各相應(yīng)時(shí)相點(diǎn)明顯增高(P005)。見表1及圖1。24小腸組織中bax。bcl2,easpase3mRNA的表達(dá)BaxmRNA在SAP組表達(dá)強(qiáng)于其他各組,術(shù)后6h即達(dá)峰值,且變化與細(xì)胞凋亡指數(shù)呈顯著的正相關(guān)(r:056,P005),而在IGF—I組則呈明顯下降,與SAP組各時(shí)相點(diǎn)相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P001);caspase一3rnRNA表達(dá)在SAP組
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