紅霉素、四環(huán)素降解菌的篩選、鑒定及其降解性能研究.pdf

1、本研究從長(zhǎng)期堆放抗生素藥渣的土壤中馴化分離到一株紅霉素降解菌ED1和兩株四環(huán)素降解菌TD2和TD3。三株菌都能以降解的抗生素為唯一碳源。用微生物法測(cè)得ED1對(duì)紅霉素的降解率為53.6％,TD2和TD3對(duì)四環(huán)素的降解率分別為58.7％和67.4％。
　　 紅霉素降解菌ED1為球狀,2.5～3×3～4μm,出芽生殖,菌落為粉紅色、圓形、表面光滑、濕潤(rùn)、凸起、邊緣整齊。通過形態(tài)特征、生理生化和18S rDNA序列同源性分析鑒定該菌為粘

2、性紅圓酵母(Rhodotorula mucilaginosa)。其18S rDNA在GenBank中的登陸號(hào)為RU294522,根據(jù)18S rDNA同源性構(gòu)建該菌株與其同源性較高的并在數(shù)據(jù)庫(kù)中注冊(cè)的已有合法種名的菌株之間的遺傳發(fā)育樹。采用單因素多水平試驗(yàn)對(duì)菌株ED1降解紅霉素時(shí)的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,得出紅霉素降解菌ED1可以利用紅霉素為唯一碳源生長(zhǎng),適宜碳源與氮源分別為蔗糖和NH4C1。該菌降解紅霉素的最適溫度為30℃,最適p

3、H范圍為5.0-5.5,最適接菌量6％,降解率與通氣量成正相關(guān)。在優(yōu)化前該菌對(duì)紅霉素的降解率僅為53.6％,而在優(yōu)化后的最適反應(yīng)條件下培養(yǎng)48h,該菌株對(duì)紅霉素的降解率可達(dá)100％,與優(yōu)化前的降解率相比,提高了46.4％。
　　 四環(huán)素降解菌TD2和TD3均為革蘭氏陰性菌,細(xì)胞大小為1.5～1.8×0.4～0.5μm和1.5～1.8×0.5～0.8μm,桿狀,氧化酶陽性。通過形態(tài)特征、生理生化和16S rDNA序列同源性分析鑒定

4、TD2為缺陷短波單胞菌(Brevundimonas diminuta),TD3為人蒼白桿菌(Ochrobactrum anthropi)。根據(jù)16S rDNA同源性分別構(gòu)建降解菌株與其同源性較高的并在數(shù)據(jù)庫(kù)中注冊(cè)的已有合法種名的菌株之間的遺傳發(fā)育樹。通過對(duì)降解菌TD2、TD3的培養(yǎng)基成分和培養(yǎng)條件優(yōu)化,得出TD2的適宜碳氮源、適宜礦物質(zhì)分別是無碳源、蛋白胨0.50％、硫酸銅0.015％;最適培養(yǎng)條件是溫度30℃、25ml/200ml裝液