微生物學(xué)化膿性細(xì)菌課件

1、1,第三篇 微生物學(xué)各論,三性兩法生物學(xué)性狀 微生物學(xué)檢查法致病性免疫性 防治法,,,2,第十四章 化膿性細(xì)菌,,3,化膿性細(xì)菌：一類能夠感染人體并引起化膿性炎癥的細(xì)菌。常引起創(chuàng)傷感染和醫(yī)院內(nèi)感染。根據(jù)革蘭染色性的不同可分成G+菌：葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌等G-菌：腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、銅綠假單胞菌等。,,4,第一節(jié) 葡萄球菌屬 (Staphylo

2、coccus),對(duì)人類致病的主要是金黃色葡萄球菌（S.aureus）。,5,分布廣泛，是最常見的化膿性球菌醫(yī)院內(nèi)交叉感染的重要傳染源所致疾病化膿性炎癥食物中毒燙傷樣皮膚綜合征毒性休克綜合征耐藥率高,6,1、形態(tài)與染色球形或橢圓形，平均直徑1µm，典型排列呈葡萄串狀；無鞭毛，無芽胞，體外培養(yǎng) 時(shí)一般不形成莢膜；革蘭染色陽性。衰老、死亡或被中性粒細(xì)胞 吞噬后易G－。,一、生物學(xué)性狀,7,膿標(biāo)本革蘭

3、染色鏡檢,8,2、培養(yǎng)特性,營(yíng)養(yǎng)要求不高，耐鹽，最適生長(zhǎng)溫度為37℃，最適pH為7.4。在普通瓊脂平板上孵育24~48h后，形成S型（光滑）菌落?？僧a(chǎn)生脂溶性色素，菌落呈現(xiàn)金黃色、白色、檸檬色不同的顏色。血瓊脂平板上，致病性葡萄球菌形成明顯的全透明溶血環(huán)（?溶血）。,9,三種葡萄球菌培養(yǎng),瓊脂培養(yǎng)基,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,金黃色色素,白色色素,檸檬或白色色素,致病力強(qiáng),條件致病菌,一般不致病,,10,金黃色葡

4、萄球菌—金黃色菌落,11,金黃色葡萄球菌血平板,,12,3、生化反應(yīng),觸酶陽性；可與鏈球菌區(qū)別多數(shù)菌株能分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖；致病株能分解甘露醇。,13,4、抗 原 結(jié) 構(gòu),14,葡萄球菌A蛋白 (staphylococcus A protein ，SPA) 是葡萄球菌細(xì)胞壁的一種表面蛋白，可與人類免疫球蛋白IgG的Fc段非特異性結(jié)合，而IgG分子的Fab段仍能同相應(yīng)抗原分子特異性結(jié)合，介導(dǎo)完成協(xié)同凝集

5、試驗(yàn)。,15,意義：,I. 含SPA的葡萄球菌可作為載體，結(jié)合特異性抗體后，開展簡(jiǎn)易、快速的協(xié)同凝集試驗(yàn)，檢測(cè)多種微生物抗原。,16,,II. SPA 與IgG結(jié)合后的復(fù)合物具有抗吞噬、促細(xì)胞分裂、引起超敏反應(yīng)、損傷血小板等多種生物學(xué)活性。,17,莢膜：體內(nèi)的大多數(shù)金黃色葡萄球菌有莢膜，有粘附作用，與細(xì)菌侵襲力有關(guān)。多糖抗原：具有群特異性，存在于細(xì)胞壁。,18,5、抵抗力,葡萄球菌在無芽胞菌中抵抗力最強(qiáng)。60℃ 1h或80℃

6、30分鐘才被殺死。對(duì)堿性染料敏感，龍膽紫可抑制其生長(zhǎng)。對(duì)許多抗生素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。近年來出現(xiàn)的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）已成為醫(yī)院感染最常見的致病菌。,19,根據(jù)色素與生化反應(yīng)根據(jù)噬菌體：分為5個(gè)噬菌體群和26個(gè)噬菌體型。,,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,6、分類,20,二、致病性與免疫性,,致病物質(zhì)所致疾病,21,（一）致病物質(zhì),毒素 細(xì)胞毒素（?、?、?、?、殺白細(xì)胞素）

7、、表皮剝脫毒素、毒性休克綜合征毒素-1、腸毒素等。酶 凝固酶、纖維蛋白溶酶、耐熱核酸酶、透明質(zhì)酸酶、脂酶等。其他 粘附素、莢膜、胞壁肽聚糖等。,22,凝固酶（coagulase）,能使含有枸櫞酸鈉或肝素抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類物質(zhì)。作用：抗吞噬作用（纖維蛋白沉積細(xì)菌表面）保護(hù)病菌不受血清中殺菌物質(zhì)的破壞使感染易于局限化和形成血栓意義：鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標(biāo)。,23,葡萄球

8、菌溶素（膜損傷毒素）：損傷細(xì)胞膜的毒素，主要是?溶素。?溶素對(duì)多種哺乳動(dòng)物RBC有溶血作用。對(duì)白細(xì)胞、血小板、肝細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞等均有損傷作用。?溶素是一種外毒素，可制成類毒素。殺白細(xì)胞素：攻擊中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，能抗吞噬和增強(qiáng)病菌的侵襲力。,24,腸毒素（enterotoxin）,約1/3臨床分離的金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生腸毒素。耐熱的外毒素引起急性胃腸炎即食物中毒。作用機(jī)制：到達(dá)中樞神經(jīng)系統(tǒng)后刺激嘔吐中樞

9、而導(dǎo)致以嘔吐為主要癥狀的食物中毒。,25,表皮剝脫毒素（exfoliatin）,蛋白質(zhì)外毒素，使表皮和真皮脫離。可引起燙傷樣皮膚綜合征（staphylococcal scalded skin syndrome, SSSS），又稱剝脫性皮炎，多見于新生兒、幼兒和免疫功能低下的成人。,26,毒性休克綜合征毒素-1（ TSST-1）,TSST-1可引起機(jī)體發(fā)熱，增加對(duì)毒素的敏感性；可引起機(jī)體多個(gè)器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征（TSS

10、）。,27,其他,耐熱核酸酶（heat-stable nuclease）致病性葡萄球菌能產(chǎn)生該酶。耐熱，經(jīng)100℃15min或60℃ 2h不被破壞；能較強(qiáng)的降解DNA和RNA。 耐熱核酸酶可作為測(cè)定葡萄球菌有無致病性的重要指標(biāo)之一。,28,（二）所致疾病,1、化膿性感染: 化膿性炎癥大多由致病性較強(qiáng)的金葡菌引起。（1）局部感染：癤、癰、毛囊炎、甲溝炎、蜂窩組織炎、膿胸、傷口化膿（2）全身感染：敗血癥、膿毒血癥 特點(diǎn)：膿液稠厚

11、，不易擴(kuò)散,29,化膿性感染,癤,癰,:,30,化膿性感染,31,2、毒素性疾病食物中毒 由葡萄球菌腸毒素引起。為毒素性食物中毒，1～6h出現(xiàn)癥狀，以嘔吐為主要癥狀，大多于1～2d內(nèi)恢復(fù)。,32,,假膜性腸炎 是一種菌群失調(diào)性腸炎。主要表現(xiàn)為腹瀉。病理特點(diǎn)是腸粘膜被一層炎性假膜覆蓋?，F(xiàn)認(rèn)為主要由艱難梭菌所致，金黃色葡萄球菌僅為伴隨菌。,33,,燙傷樣皮膚綜合征 由表皮剝脫毒素引起，導(dǎo)致

12、表皮上層脫落。,34,,,,毒性休克綜合征 由毒性休克綜合征毒素-1引起，主要表現(xiàn)為急性高熱、低血壓、腥紅熱樣皮疹伴脫屑。嚴(yán)重時(shí)出現(xiàn)休克。,35,（三）免疫性,人類對(duì)葡萄球菌有一定的天然免疫力?；疾『螅塬@得一定的免疫力，但不強(qiáng)。,36,幼貓?jiān)囼?yàn),三、微生物學(xué)檢查法,標(biāo)本,膿汁、血液、腦脊液、剩余食物、嘔吐物等,分離培養(yǎng)與鑒定,觸酶血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶,直接涂片鏡檢,,革蘭陽性葡萄球菌,,,生長(zhǎng)現(xiàn)象,,色素

13、、溶血等,,生化反應(yīng),,毒素檢查,,,,37,致病性葡萄球菌的主要鑒別依據(jù),金黃色色素?溶血凝固酶陽性耐熱核酸酶陽性分解甘露醇,38,,四、防治原則,,,防,,,注意消毒隔離,注意個(gè)人衛(wèi)生,,,防止醫(yī)源性感染,防止耐藥性產(chǎn)生,,,治,,,抗菌素藥敏試驗(yàn),自身菌苗療法,39,第二節(jié) 鏈球菌屬（Streptococcus）,對(duì)人類致病的主要是A群鏈球菌和肺炎鏈球菌。,40,1、形態(tài)與染色球形或橢圓形，呈鏈狀排列。無

14、芽胞，無鞭毛。培養(yǎng)早期（2~4h）形成透明質(zhì)酸的莢膜。細(xì)胞壁外有菌毛樣結(jié)構(gòu)，含有型特異性M蛋白。革蘭染色陽性。,一、生物學(xué)性狀,41,42,2、培養(yǎng)特性,營(yíng)養(yǎng)要求較高，需補(bǔ)充血液、血清、葡萄糖等。在血清肉湯中易形成長(zhǎng)鏈，管底呈絮狀沉淀。在血瓊脂平板上形成灰白色半透明、表面光滑、邊緣整齊的菌落，不同菌株溶血不一。,43,3、生化反應(yīng),分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。觸酶陰性。鏈球菌一般不分解菊糖，不被膽汁溶解，這兩特性可用來鑒別甲型溶

15、血性鏈球菌和肺炎鏈球菌。,44,4、抗原結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)抗原：或稱表面抗原。具有型特異性。A群鏈球菌有M、T、R和S不同性質(zhì)的蛋白質(zhì)抗原，與致病性有關(guān)的是M抗原。多糖抗原：或稱C抗原。是群特異性抗原，是細(xì)胞壁的多糖組分。核蛋白抗原：或稱P抗原。無特異性。,45,5、分類,根據(jù)溶血現(xiàn)象分類根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的分類,46,根據(jù)溶血現(xiàn)象分類,甲型溶血性鏈球菌：草綠色溶血環(huán)，稱甲型溶血或?溶血，?溶血環(huán)中的紅細(xì)胞并未完全溶解。多為條件致病菌。乙型

16、溶血性鏈球菌：完全透明溶血環(huán)，稱乙型溶血或?溶血，?溶血環(huán)中的紅細(xì)胞完全溶解，致病力強(qiáng)。丙型鏈球菌：無溶血環(huán)，又稱不溶血性鏈球菌。一般不致病。,47,,48,根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的分類,按多糖抗原，可分成20群。對(duì)人致病的鏈球菌菌株，90%左右屬A群。A群根據(jù)其M抗原不同，可分為100個(gè)型。,49,6、抵抗力,抵抗力比較弱。對(duì)常用消毒劑敏感。對(duì)青霉素、紅霉素，四環(huán)素和磺胺藥都很敏感。青霉素是治療首選藥物，極少發(fā)現(xiàn)有耐藥菌株。,50,二、

17、致病性與免疫性,51,（一）致病物質(zhì),鏈球菌溶素（streptolysin）致熱外毒素（pyrogenic exotoxin） 透明質(zhì)酸酶,脂磷壁酸M蛋白 鏈激酶（streptokinase; SK） 鏈道酶（streptodornase; SD）,52,1、毒素,致熱外毒素（紅疹毒素／猩紅熱毒素）是人類猩紅熱的主要毒性物質(zhì)。由A群鏈球菌溶原菌菌株產(chǎn)生。,53,根據(jù)對(duì)氧的穩(wěn)定性可分為：SLO (鏈球菌溶素O)：對(duì)O2

18、敏感，氧化后即失去溶血活性?？乖詮?qiáng)，可刺激機(jī)體產(chǎn)生SLO抗體（即抗“O”）， 常用于風(fēng)濕熱活動(dòng)性及腎小球腎炎的輔助診斷。（>1:400）SLS (鏈球菌溶素S)：對(duì)O2穩(wěn)定破壞紅細(xì)胞無免疫原性，不產(chǎn)生抗體。,鏈球菌溶素:,54,2、侵襲性酶,透明質(zhì)酸酶又名擴(kuò)散因子能分解細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸，使病菌易在組織中擴(kuò)散。,55,鏈激酶（streptokinase; SK）,能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶，可溶解

19、血塊或阻止血漿凝固，有利于病菌在組織中擴(kuò)散。,鏈道酶（streptodornase; SD）,亦稱鏈球菌DNA酶。能降解膿液中具有高度粘稠性的DNA，使膿液稀薄，促進(jìn)病菌擴(kuò)散。,56,3、細(xì)胞壁成分,脂磷壁酸（LTA） 圍繞在M蛋白外層，與M蛋白共同組成鏈球菌的菌毛樣結(jié)構(gòu)。與人類多種細(xì)胞膜上的受體結(jié)合，使細(xì)菌能定植在皮膚和粘膜表面。M蛋白,有抗吞噬和抵抗吞噬細(xì)胞內(nèi)的殺菌作用與某些超敏反應(yīng)疾病有關(guān),57,58,（二）所致疾病,A群

20、鏈球菌為主，占90%化膿性（淋巴管炎、淋巴結(jié)炎、扁桃體炎、咽炎、中耳炎等）中毒性猩紅熱超敏反應(yīng)性風(fēng)濕熱急性腎小球腎炎,59,猩紅熱皮疹,小兒猩紅熱,60,61,（三）免疫性,可獲得對(duì)同型鏈球菌的特異性免疫力。但因其型別多，各型間無交叉免疫力，故?？煞磸?fù)感染。患猩紅熱后能建立牢固的同型抗毒素免疫。,62,三、微生物學(xué)檢查法,標(biāo)本：膿液、咽拭子 直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定 接種在血瓊脂平板如

21、有?溶血菌落，應(yīng)與葡萄球菌區(qū)別?溶血菌落，要和肺炎鏈球菌鑒別,63,血清學(xué)診斷,抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn)（antistreptolysin O test, ASO test） SLO+RBC 溶血 SLO+患者血清+RBC 不溶血,,,結(jié)果：效價(jià)大于400單位意義：風(fēng)濕熱及其活動(dòng)性的輔助診斷,64,四、防治原則,減少傳染源注意消毒治療患者以青霉素G為首選

22、藥物，須治療徹底，防止超敏反應(yīng)性疾病的發(fā)生。,65,第三節(jié) 肺炎鏈球菌（S.pneumoniae）,,66,G+雙球菌，呈矛尖狀培養(yǎng)：營(yíng)養(yǎng)要求高。在血平板上的菌落細(xì)小、圓形略扁、灰白色半透明，菌落周圍出現(xiàn)草綠色溶血環(huán)，培養(yǎng)時(shí)間 >48小時(shí)，菌落呈臍狀生化反應(yīng)：與甲型鏈球菌的鑒別－－菊糖發(fā)酵試驗(yàn)、膽汁溶菌試驗(yàn),一、生物學(xué)性狀,67,肺炎球菌,68,肺炎鏈球菌菌落---扁平狀,69,肺炎鏈球菌落---臍狀,70,二、致病性,致

23、病物質(zhì)莢膜肺炎鏈球菌溶素O脂磷壁酸 神經(jīng)氨酸酶 所致疾病大葉性肺炎化膿性中耳炎、胸膜炎、膿胸、腦膜炎或敗血癥,71,三、微生物學(xué)檢查法,標(biāo)本：取痰液、膿汁、血液或腦脊液等 直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)與鑒定：（與甲型溶血性鏈球菌鑒別）膽汁溶菌試驗(yàn) Optochin試驗(yàn) 莢膜腫脹試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)：少量具有毒力的肺炎鏈球菌注入小鼠腹腔內(nèi)，一般24h內(nèi)死亡。,72,右側(cè)：肺炎鏈球菌（澄清、透明）左側(cè)：甲型溶血性鏈球菌（渾濁）,

24、膽汁溶菌試驗(yàn),73,四、防治原則,莢膜多糖多價(jià)疫苗治療前作常規(guī)藥物敏感試驗(yàn),74,第四節(jié) 奈瑟菌屬（Neisseria）,,75,概述,革蘭陰性雙球菌。無鞭毛。無芽胞。有莢膜和菌毛。種類腦膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）淋病奈瑟菌（N. gonorrhoeae）干燥奈瑟菌（N. sicca）、淺黃奈瑟菌（N. subflava）、金黃奈瑟菌（N. flavescens）、粘膜奈瑟菌（N. mucosa）等,76,

25、一、腦膜炎奈瑟菌（meningococcus）,,77,（一）生物學(xué)性狀,形態(tài)與染色：腎形或豆形革蘭陰性雙球菌，新分離菌株大多有莢膜和菌毛。培養(yǎng)特性：營(yíng)養(yǎng)要求較高，常用巧克力（色）培養(yǎng)基。專性需氧，5% CO2 條件下生長(zhǎng)更佳。菌落為圓形光滑似露滴狀。血平板上不溶血。抵抗力：很弱。對(duì)干燥、熱力、消毒劑等均敏感。,78,腦膜炎雙球菌,79,A B,A.腦膜炎奈瑟菌在血瓊脂平板上的

26、菌落特征(18-24h)B.腦膜炎奈瑟菌在巧克力瓊脂平板上的菌 落特征(18-24h),80,（二）致病性,致病物質(zhì)侵襲力：莢膜和菌毛毒素：內(nèi)毒素，是腦膜炎奈瑟菌的主要致病物質(zhì)。所致疾病流行性腦脊髓膜炎（簡(jiǎn)稱流腦） 主要經(jīng)飛沫傳播：鼻咽部炎癥-敗血癥-腦膜炎,81,標(biāo)本,分離培養(yǎng)與鑒定,腦脊液、血液、出血點(diǎn)滲出液、鼻咽拭子保暖、保濕、立即送檢，培養(yǎng)基預(yù)溫。最好床邊接種。,直接涂片鏡檢,中性粒細(xì)胞內(nèi)、外有革蘭陰性雙球菌

27、，可作出初步診斷。,巧克力（色）培養(yǎng)基，5% CO2氣體。生化反應(yīng)和玻片凝集試驗(yàn)鑒定。,快速診斷,對(duì)流免疫電泳，SPA協(xié)同凝集試驗(yàn),（三）微生物學(xué)檢查法,82,（四）防治原則,流腦莢膜多糖疫苗（A+C）進(jìn)行特異性預(yù)防。注意隔離治療流腦患者，控制傳染源。流行期間兒童可口服磺胺藥物等預(yù)防。,83,二、淋病奈瑟菌（gonococcus）,,84,（一）生物學(xué)性狀,形態(tài)與染色：革蘭陰性雙球菌，似一對(duì)咖啡豆。無芽胞。無鞭毛。有莢膜和菌毛。

28、培養(yǎng)特性：專性需氧，初次分離培養(yǎng)時(shí)需供給5% CO2。營(yíng)養(yǎng)要求高，巧克力（色）血瓊脂平板是適宜培養(yǎng)基。抵抗力：熱、冷、干燥和消毒劑極敏感，1%石炭酸 3 min或1:4000硝酸銀2 min即死亡。,85,Neisseria gonorrhoeae Gram stain of pure culture,Neisseria gonorrhoeae Gram stain of a pustular exudate,Neisseria

29、gonorrhoeae,淋病奈瑟菌,86,致病物質(zhì)菌毛：粘附作用；抵抗吞噬。外膜蛋白Ⅱ：有助于粘附。IgA蛋白酶：能破壞黏膜表面sIgA。內(nèi)毒素：損害人體黏膜的重要因素。,87,人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主。主要通過性接觸引起泌尿道和生殖系統(tǒng)炎癥。,,,淋病,新生兒淋菌性結(jié)膜炎,新生兒由產(chǎn)道感染,,所致疾病,,88,,（三）微生物學(xué)檢查法,標(biāo)本,用無菌棉拭沾取,直接涂片鏡檢,在中性粒細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)有革蘭陰性雙球菌時(shí)，有診斷價(jià)值,

30、分離培養(yǎng)與鑒定,標(biāo)本采集后應(yīng)注意保暖保濕，立即送檢接種,泌尿生殖道膿性分泌物子宮頸口表面分泌物,巧克力色平板，5~10% CO2氣體,89,（四）防治原則,,防,開展防治性病的知識(shí)教育,防止不正當(dāng)?shù)膬尚躁P(guān)系,,治,新生兒1%硝酸銀滴眼。,,,,抗生素。參考體外藥敏試驗(yàn)。對(duì)青霉素、頭孢胺噻肟鈉、環(huán)丙沙星、壯觀霉素等多種抗生素敏感，近年報(bào)告耐藥菌株增多。,,90,Purulent conjunctivitisOphthalmia n

31、eonatorum Infection in newborns during vaginal delivery,91,第五節(jié) 假單胞菌屬Pseudomonas,,92,,一類G-桿菌，種類繁多，其中銅綠假單胞菌是一種常見的條件致病菌，也是院內(nèi)感染常見菌。因在生長(zhǎng)過程中產(chǎn)生綠色水溶性色素，感染后的膿汁或敷料上出現(xiàn)綠色，故俗稱綠膿桿菌。,93,直或微彎G－桿菌，有莢膜，單端有1～3根鞭毛，運(yùn)動(dòng)活潑。,革蘭染色,熒光染色,電鏡圖,形

32、態(tài)特征,94,需氧，4℃不生長(zhǎng)，42℃生長(zhǎng)。可產(chǎn)生帶熒光的 綠色水溶性色素，有溶血環(huán)。,血平板上細(xì)菌生長(zhǎng),普通培養(yǎng)基上細(xì)菌生長(zhǎng),培養(yǎng)特性,95,臨床表現(xiàn),多見于皮膚粘膜受損部位（燒傷和創(chuàng)傷等）與機(jī)體免疫力下降病人，表現(xiàn)為局部化膿性炎癥和全身感染。引起中耳炎、角膜炎、尿道炎、胃腸炎、 心內(nèi)膜炎、膿胸，也可引起菌血癥、敗血癥及引起嬰兒嚴(yán)重的流行性腹瀉。醫(yī)源性感染。,96,本章主要內(nèi)容小結(jié),葡萄球菌和鏈球菌的生物學(xué)性狀、致病性、微生物學(xué)