微生物學(xué)檢驗(yàn)緒論

1、臨床微生物學(xué)檢驗(yàn),湖北文理學(xué)院醫(yī)學(xué)院李智山,Preface緒論,掌握有關(guān)微生物及微生物學(xué)的概念，了解微生物學(xué)的發(fā)展簡(jiǎn)史。 教學(xué)內(nèi)容：一、微生物與微生物學(xué)二、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的發(fā)展簡(jiǎn)史三、臨床微生物學(xué)檢驗(yàn),教學(xué)目的：,SARS Severe Acute Respiratory Syndrome,AIDS：Acquired Immune Deficiency Syndrome,乙肝(He

2、patitis B)是危及亞洲人民生命的致命殺手之一,全世界有3.5億慢性乙肝病攜帶者，其中75％在亞洲,微生物（Microorganism） ：是一群個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，肉眼不能直接看到，必須借助顯微鏡放大數(shù)百倍至數(shù)千倍才能觀察到的微小生物的總稱。微生物學(xué)（Microbiology）是生物學(xué)的一個(gè)分支，是研究微生物的類型、分布、形態(tài)結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)及規(guī)律、遺傳、進(jìn)化以及與人類、動(dòng)物、植物等相互關(guān)系的一門科學(xué)。,Department

3、 of Microbiology, Hebei North University,微生物的分類,1.非細(xì)胞型微生物 無(wú)典型細(xì)胞結(jié)構(gòu)，無(wú)產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)，只能在活細(xì)胞內(nèi)生長(zhǎng)增殖。核酸類型為DNA或RNA。病毒屬之。2.原核細(xì)胞型微生物 核呈環(huán)狀裸DNA團(tuán)塊結(jié)構(gòu)，無(wú)核膜、核仁。細(xì)胞器很不完善，只有核糖體。DNA和RNA同時(shí)存在。分為古生菌（archaea）和細(xì)菌（bacterium）二大類。細(xì)菌的種類繁多，包括細(xì)菌

4、、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體和放線菌等。3.真核細(xì)胞型微生物 細(xì)胞核分化程度高，有核膜和核仁。細(xì)胞器完整。真菌屬此類。,微生物的三種類型特點(diǎn),原核生物,,真核生物,非細(xì)胞型微生物,非細(xì)胞型微生物,腺病毒,乙肝病毒,噬菌體,流感病毒,HIV,Ebola病毒,原核細(xì)胞型微生物,螺旋體,立克次體,支原體,衣原體,真核細(xì)胞型微生物,單細(xì)胞型真菌,多細(xì)胞型真菌,微生物與人類的關(guān)系,微生物無(wú)處不在——無(wú)菌操作多數(shù)對(duì)人有益——正

5、常菌群（normal flora) 存在與人體體表與體內(nèi)與外界相同腔道與黏膜中對(duì)人體無(wú)致病作用的細(xì)菌稱為正常菌群。但當(dāng)機(jī)體體抗力低下時(shí)，那些平時(shí)對(duì)人體不致病的細(xì)菌表現(xiàn)對(duì)人致病，被稱為條件致病菌(conditioned pathogen)。少數(shù)對(duì)人有害——病原微生物 pathogenic microorganism 能引起人類或動(dòng)植物發(fā)生疾病的微生物稱為病原微生物,是醫(yī)學(xué)微生物的研究主體。,醫(yī)學(xué)微生物學(xué)（medical microbio

6、logy)： 是研究與醫(yī)學(xué)有關(guān)的病原微生物的生物學(xué)特性、致病性、免疫性，以及特異性診斷和防治措施的學(xué)科，以控制和消滅感染性疾病和與之有關(guān)的免疫損傷，以達(dá)到保障和提高人類健康水平的目的。,微生物學(xué)發(fā)展簡(jiǎn)史,經(jīng)驗(yàn)微生物學(xué)時(shí)期實(shí)驗(yàn)微生物學(xué)時(shí)期現(xiàn)代微生物學(xué)時(shí)期,,微生物在地球上存在了30多億年，人類并不知道一直和微生物生死共處我國(guó)公元2000多年前的夏禹時(shí)代就有了儀狄造酒的傳說(shuō)。許多疾病是由微生物引起的：宋朝劉真人提出肺癆由蟲(chóng)引起

7、。,微生物學(xué)的經(jīng)驗(yàn)時(shí)期,Department of Microbiology, Hebei North University,微生物學(xué)的經(jīng)驗(yàn)時(shí)期,古人雖未觀察到具體的微生物，但早已將微生物知識(shí)用于工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和疾病防治之中。 制醋、酒、醬、漚糞積肥等。 每種傳染病由獨(dú)特的活物所引起；傳染病的傳播有直接、間接和通過(guò)空氣等數(shù)種途徑；鼠疫的流行環(huán)節(jié)等。 將水煮沸后飲用；病人的衣服蒸過(guò)再穿就不會(huì)感染到疾病。,古代人早

8、已認(rèn)識(shí)到天花是一種烈性傳染病。已康復(fù)者去護(hù)理天花病人，則不會(huì)再得天花，我國(guó)祖先開(kāi)創(chuàng)了預(yù)防天花的人痘接種法。是我國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)上的一大貢獻(xiàn)。,實(shí)驗(yàn)微生物學(xué)時(shí)期,第一個(gè)通過(guò)自制顯微鏡觀察到細(xì)菌的人荷蘭科學(xué)家列文虎克(Antony van leeuweenhoek),,列文虎克的顯微鏡,列文虎克和他自制的顯微鏡 （放大266倍）,列文虎克觀察到的微生物,發(fā)明巴氏消毒法的法國(guó)科學(xué)家巴斯德（Louis Paster),微生物生理

9、學(xué)時(shí)代—醫(yī)學(xué)微生物成為一門獨(dú)立的學(xué)科,細(xì)菌性傳染病病原的證實(shí),郭霍（Robert Koch),①創(chuàng)立了固體培養(yǎng)基，使許多病原體相繼被發(fā)現(xiàn)。②發(fā)現(xiàn)了肺結(jié)核病的病原體結(jié)核桿菌，這是當(dāng)時(shí)死亡率極高的傳染性疾病，因此郭霍獲得了1905年的諾貝爾獎(jiǎng)；③提出了證明某種微生物是否為某種疾病病原體的基本原則——郭霍原則。特殊的病原菌應(yīng)在同一疾病中查見(jiàn)，在健康人中不存在；該特殊病原菌能被分離培養(yǎng)得純種；該培養(yǎng)物接種至易感動(dòng)物，能產(chǎn)生同樣病征自

10、人工感染的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)能重新分離得該病原菌純培養(yǎng),由于郭霍在病原菌研究方面的開(kāi)創(chuàng)性工作，自19世紀(jì)70年代至20世紀(jì)20年代成了發(fā)現(xiàn)病原菌的黃金時(shí)代，所發(fā)現(xiàn)的各種病原微生物不下百余種，其中還包括植物病原細(xì)菌。,病毒的發(fā)現(xiàn),1886年，在荷蘭工作的德國(guó)農(nóng)藝學(xué)家邁爾（A·Mayer）把患有花葉病的煙草植株的葉片加水研碎，取其汁液注射到健康煙草的葉脈中，可使大多數(shù)健康的煙草植株染病，首先證明煙草花葉病具有傳染性。麥爾認(rèn)為煙草花

11、葉病是由細(xì)菌引起的。,,,1892年俄國(guó)的伊凡諾夫斯基（Ivanowski）不僅重復(fù)了麥爾的試驗(yàn)，而且進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，患病煙草植株的葉片汁液，通過(guò)細(xì)菌過(guò)濾器（細(xì)菌濾器—細(xì)菌所不能通過(guò)的過(guò)濾器，其濾孔孔徑小于細(xì)菌的大小，可以將液體中存在的細(xì)菌除去 ）后，濾液還能引發(fā)健康的煙草植株發(fā)生花葉病。這種現(xiàn)象可以說(shuō)明，病原體不是細(xì)菌。但生活在巴斯德的細(xì)菌致病學(xué)說(shuō)的極盛時(shí)期，伊凡諾夫斯基未能做進(jìn)一步的思考，從而錯(cuò)失了一次獲得重大發(fā)現(xiàn)的機(jī)會(huì)。,Ivanow

12、ski,濾膜,,,,,,濾液致病,細(xì)菌濾器,濾膜,病原物質(zhì),濾膜上物質(zhì)不致病,1898年，荷蘭微生物學(xué)家貝杰林克（Beijerinck）重復(fù)和肯定了伊凡諾夫斯基的實(shí)驗(yàn)結(jié)果并且證明引起煙草花葉病的致病因子是一種不能用普通光學(xué)顯微鏡看到，也不能在細(xì)菌培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，而能夠通過(guò)細(xì)菌濾器，并且只能在活的植物體組織中繁殖的有機(jī)體，是一種新的感染性物質(zhì)。貝杰林克把這種有別于細(xì)菌的有機(jī)體稱為 “病毒”。貝杰林克打破了當(dāng)時(shí)人們普遍信奉的疾病菌源說(shuō)的

13、傳統(tǒng)觀念，是人類認(rèn)識(shí)病因過(guò)程中的一次重大突破。,免疫學(xué)的興起,愛(ài)德華·琴納,于1796年應(yīng)用研制的牛痘苗預(yù)防天花是人類運(yùn)用人工自動(dòng)免疫方法預(yù)防疾病的開(kāi)始。,德國(guó)學(xué)者貝林格 (Emil Adolf von Behring,1845～1917年) 在1891用含有白喉抗毒素的動(dòng)物免疫血清成功治愈一白喉女孩，此為被動(dòng)免疫的先例。,化學(xué)療劑的發(fā)明及抗生素的發(fā)現(xiàn),1929年英國(guó)人弗萊明 (Alexander Fleming,1881～

14、1955年) 發(fā)現(xiàn)青霉菌產(chǎn)物青霉素能抑制金黃色葡萄球菌的生長(zhǎng)。1940年Florey等提取出青霉素的結(jié)晶純品，并證實(shí)了其臨床應(yīng)用價(jià)值，給感染疾病的臨床治療帶來(lái)了一次大的革命。青霉素的發(fā)現(xiàn)帶動(dòng)了抗生素的尋找和生產(chǎn)。,36,,現(xiàn)代微生物學(xué)時(shí)期,近30年來(lái)，隨著分子生物學(xué)等學(xué)科的發(fā)展，微生物學(xué)得到極為迅速的發(fā)展。,（1）新病原微生物的發(fā)現(xiàn)：軍團(tuán)菌，幽門螺桿菌，人類免疫缺陷病毒(HIV)， 朊粒(prion)、SARS冠狀病毒等。,（2）微生物

15、全基因組的研究 1995年，第一個(gè)細(xì)菌—流感嗜血桿菌的全基因組DNA測(cè)序完成。目前已有150多種細(xì)菌完成測(cè)序。我國(guó)先后完成6種細(xì)菌測(cè)序工作。（3）新型疫苗的研究 腦膜炎 乙肝 百日咳 破傷風(fēng) 白喉（4）診斷技術(shù)快速發(fā)展 DNA雜交 PCR 氨基酸序列分析 基因探針 等 （5）新藥的研究有突破性進(jìn)展,目前，由病原微生物引起的多種傳染病仍嚴(yán)重威脅人類的健康，傳染病發(fā)病率和死亡

16、率在所有疾病中居第一位。,1）新現(xiàn)和再現(xiàn)的微生物感染不斷發(fā)生；2）迄今仍有一些感染性疾病的病原體未發(fā)現(xiàn)；某些病原體致病和免疫機(jī)制還未闡明；3）大量廣譜抗生素濫用，使許多菌株發(fā)生變異，導(dǎo)致耐藥性產(chǎn)生，人類健康受到新的威脅；4）某些微生物快速變異給疫苗設(shè)計(jì)和治療造成了很大障礙。,微生物學(xué)發(fā)展中的重大事件,,,,,,,,,,微生物學(xué)發(fā)展中的重大事件,,,,,,,臨床微生物學(xué)：屬于醫(yī)學(xué)微生物學(xué)的范疇。又稱診斷微生物學(xué)，是研究病原微生物檢查

17、及微生物與宿主相互作用的一門醫(yī)學(xué)專業(yè)和應(yīng)用學(xué)科。,臨床微生物學(xué)檢驗(yàn):是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中的重要專業(yè)課之一，它是利用微生物學(xué)的基礎(chǔ)理論、技能、和臨床微生物學(xué)的基本知識(shí)，掌握各類與臨床有關(guān)的微生物的特性，通過(guò)系統(tǒng)的檢驗(yàn)方法，及時(shí)、準(zhǔn)確地對(duì)臨床標(biāo)本做出病原學(xué)診斷和抗微生物敏感性報(bào)告，為臨床感染性疾病的診斷、治療和預(yù)防提供科學(xué)依據(jù)。,臨床微生物學(xué)的任務(wù),臨床微生物學(xué)的任務(wù) 研究感染性疾病的病原體特征 提供快速準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷 指導(dǎo)臨床

18、合理使用抗生素 對(duì)醫(yī)院感染進(jìn)行監(jiān)控,臨床微生物檢驗(yàn)的思路和原則,確保分析前質(zhì)量全面了解機(jī)體正常菌群保證檢驗(yàn)質(zhì)量微生物學(xué)定性、定量和定位分析加強(qiáng)與臨床聯(lián)系,臨床微生物檢驗(yàn)的現(xiàn)狀、發(fā)展和展望,感染性疾病的現(xiàn)狀：易感人群不斷增加新病原體不斷出現(xiàn)、已控制的病原體死灰復(fù)燃感染因子在非感染性疾病中的作用越來(lái)越明顯細(xì)菌耐藥和醫(yī)院感染的問(wèn)題日趨嚴(yán)重,快速診斷方法的進(jìn)展：改變流程、縮短報(bào)告周期：重視涂片檢查、實(shí)行分級(jí)報(bào)告制度非培