基因工程制藥復(fù)習(xí)提綱答案

1、名詞解釋1.基因工程基因工程是值在體外合成或重組特定的DNA，再與載體連接，最后導(dǎo)入到宿主細(xì)胞內(nèi)表達(dá)、擴(kuò)增出人們需要的蛋白質(zhì)，而且使這種性狀可遺傳給后代的技術(shù)。包括上游技術(shù)和下游技術(shù)。2.基因工程制藥基因工程制藥是通過基因工程的方法生產(chǎn)藥物，具體包括獲得目的基因、構(gòu)建重組質(zhì)粒、構(gòu)建基因工程菌、培養(yǎng)工程菌、產(chǎn)物分離純化、產(chǎn)品加工檢驗(yàn)等步驟。3.逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄（reversetranion）是某些RNA病毒由逆轉(zhuǎn)錄酶直接利用RNA為模板合成D

2、NA的過程。4.CDNA以生物細(xì)胞的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成cDNA的第一條鏈，然后在合成雙鏈DNA，并將合成的cDNA雙鏈重組到質(zhì)粒載體或噬菌體載體上，倒入宿主細(xì)胞進(jìn)行增殖。在這個(gè)過程中合成的雙鏈DNA叫做cDNA。5.引物引物是人工合成的單鏈DNA小片段，堿基順序分別與所要擴(kuò)增的模板DNA雙鏈的5’端相同。是PCR的起始點(diǎn)。6.表達(dá)載體所謂表達(dá)載體（expressionvect）是指具有宿主細(xì)胞基因表達(dá)所需的調(diào)節(jié)控制序

3、列，能使外源基因在宿主細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄和翻譯的載體。7.克隆載體克隆載體（cloningvect)是把一個(gè)有用的制藥DNA片段通過重組DNA技術(shù)，送進(jìn)受體細(xì)胞中進(jìn)行繁殖的工具。8.載體載體（vect），指在基因工程重組DNA技術(shù)中將DNA片段（目的基因）轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的一種能自我復(fù)制的DNA分子。9.報(bào)告基因載體分子上有一種特殊意義的基因序列，它們表達(dá)的目的是為了證明載體已經(jīng)進(jìn)入宿主細(xì)胞，并將含有外源基因的宿主細(xì)胞從其他細(xì)胞中區(qū)分并挑選出來。

4、這種基因就是報(bào)告基因。10.啟動(dòng)子啟動(dòng)子是位于結(jié)構(gòu)基因5端上游的DNA序列，能被RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合，具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性11.PCR聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一種體外放大擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它主要包括變性、退火、延伸三個(gè)過程，并且多次循環(huán)。12.包涵體包涵體（inclusionbody）是存在于細(xì)胞質(zhì)中的一種不可溶的蛋白質(zhì)聚集折疊而形成的晶體結(jié)構(gòu)物。通常包涵體雖然具有正確的氨基酸序列，但是空間結(jié)構(gòu)卻是錯(cuò)誤的。13.蛋白表達(dá)系統(tǒng)

5、蛋白表達(dá)系統(tǒng)是指由宿主、外源基因、載體和輔助成分組成的體系，通過這個(gè)體系實(shí)現(xiàn)外源基因在宿主細(xì)胞中表達(dá)的目的。14.單克隆抗體由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體，稱為單克隆抗體。15.基因工程抗體基因工程抗體就是按不同的目的和需求，對(duì)抗體基因進(jìn)行加工、改造和重新裝配，然后導(dǎo)入適當(dāng)?shù)氖荏w細(xì)胞中表達(dá)得到的抗體分子。16.改形抗體改性抗體（reshapedantibodyRAb）是指利用基因工程技術(shù)，將人抗體可變區(qū)（V

6、）中互補(bǔ)決定簇序列改換成鼠源單抗互補(bǔ)決定簇。重構(gòu)成既具有鼠源性單抗的特異性又保持抗體親和力的人源化抗體。17.嵌合抗體在基因水平上將鼠源單克隆抗體可變區(qū)和人抗體恒定區(qū)連接起來并在合適的宿主細(xì)胞中表達(dá)，這種抗體叫做嵌合抗體（chimericantibody）。18.鑲面抗體將鼠源單抗可變區(qū)中氨基酸殘基改造成人源的，消除了異源性且不影響可變區(qū)的整體空間構(gòu)象。指除去病原體中無免疫保護(hù)作用的有害成分，保留其有效的免疫原成分制成疫苗。34.重組活

7、載體疫苗用基因工程技術(shù)將病毒或細(xì)菌構(gòu)建成一個(gè)載體，把外源保護(hù)性抗原基因插入其中使之表達(dá)的活疫苗。35.反向遺傳操作與經(jīng)典的從表型改變到進(jìn)行基因特征研究的思路相反，是指通過構(gòu)建RNA病毒的感染性分子克隆，在病毒cDNA分子水平上對(duì)其進(jìn)行體外人工操作36.基因疫苗基因疫苗指的是DNA疫苗，即將編碼某種抗原蛋白的外源基因插入到含真核表達(dá)系統(tǒng)的質(zhì)粒上，然后將質(zhì)粒直接導(dǎo)入人或動(dòng)物體內(nèi)，讓其在宿主細(xì)胞中表達(dá)合成抗原蛋白，誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。37.

8、核酸疫苗核酸疫苗是將編碼某種抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)直接導(dǎo)入動(dòng)物體細(xì)胞內(nèi)，并通過宿主細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng)合成抗原蛋白，誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生對(duì)該抗原蛋白的免疫應(yīng)答，以達(dá)到預(yù)防和治療疾病的目的38.腫瘤疫苗是通過激活患者自身免疫系統(tǒng)，利用腫瘤細(xì)胞或腫瘤抗原物質(zhì)誘導(dǎo)機(jī)體的特異性細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)，增強(qiáng)機(jī)體的抗癌能力，阻止腫瘤的生長、擴(kuò)散和復(fù)發(fā)，以達(dá)到清除或控制腫瘤的目的。39.避孕疫苗避孕疫苗是一種具有科學(xué)性、長期性及可逆性的避孕方法。世界

9、各國都在從事這方面的研究工作。其基本原理是通過提取一種抗原成分制成疫苗，給予受試對(duì)象產(chǎn)生相應(yīng)的免疫反應(yīng)，從而阻止受孕。此法只處于實(shí)驗(yàn)和研究階段，尚未進(jìn)入臨床試驗(yàn)。問答題、1制藥基因的獲得方法有哪些制藥基因獲得的方法一般分為直接獲得法和間接獲得法。一般來說，所謂的直接獲得法就是直接從基因組DNA中獲得制藥基因；而間接獲得法要先獲得mRNA、cDNA等，間接從基因組DNA中獲得制藥基因。但真核生物基因組不僅龐大，而且結(jié)構(gòu)復(fù)雜，分離時(shí)還要盡可

10、能排除內(nèi)含子，所以常用間接法獲得制藥基因。具體方法常有兩種：一是從cDNA文庫克隆制藥基因，首先以mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成cDNA的第一條鏈，然后再合成雙鏈DNA，并將雙鏈DNA重組到質(zhì)粒載體或噬菌體載體上，導(dǎo)入大腸桿菌宿主細(xì)胞進(jìn)行增殖；二是通過RTPCR以mRNA逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA第一條鏈為模板，設(shè)計(jì)特定的引物，擴(kuò)增獲得制藥基因產(chǎn)物。但是RTPCR分離制藥基因必須以制藥基因的序列已知為前提。2基因工程制藥的內(nèi)涵？基因工